2型糖尿病腎病患者血清中骨形態發生蛋白-7及轉化生長因子-β1水平的變化及意義

劉玉倩 寧 均 劉 青

(吉林大學第一醫院內分泌科，吉林 長春 130021)

糖尿病腎病(DN)也已成為慢性腎衰竭的主要原因〔1〕。DN的發病機制尚未明確，現有研究其受遺傳易感性、血流動力學因素、氧化應激、細胞因子和生長因子等多種因素影響。轉化生長因子-1(TGF)-β1和骨形態發生蛋白(BMP)-7在DN中的作用逐漸成為研究的熱點。本研究觀察DN及患者血清TGF-β1，BMP-7的變化，為進一步指導臨床治療提供理論依據。

1 資料與方法

1.1一般資料 2011年7月至2012年7月吉林大學第一醫院住院2型糖尿病(T2DM)患者96例，均符合1999年WHO的診斷和分型標準，根據尿微量白蛋白/肌酐值(ACR)(<30 mg/g,30～300 mg/g,>300 mg/g),分為正常白蛋白尿A組32例，微量白蛋白尿B組31例，臨床白蛋白尿C組24例；另外選擇同期門診健康體檢者為正常對照D組24例。

排除病例：(1)不符合上述納入標準者；(2)在測定血清TGF-β1、BMP-7之前曾應用過大量糖皮質激素者；(3)嚴重肝腎功能受損或結締組織疾病者；(4)合并腫瘤或惡性血液病者；(5)血壓不達標者。

1.2方法 所有受試者均禁食8 h以上，于次日清晨采肘靜脈空腹血，離心后取血清2 ml 保存于-40℃的冰箱中。采用北京愛普華美生物科技有限公司TGF-β1、BMP-7酶聯免疫吸附試劑盒檢測血清TGF-β1，BMP-7濃度，隨機尿液測定ACR。

糖化血紅蛋白(HbA1c)及ACR測定采用德國西門子糖化血紅蛋白/尿微量白蛋白分析儀，血液生化指標測定采用美國貝克曼庫爾特LX20全自動生化分析儀,空腹血糖(FPG)采用葡萄糖氧化酶-過氧化酶法，總膽固醇(TC)采用免疫化學比色法，尿素氮(BUN)采用脲酶比色法，血肌酐(Cr)采用肌氨酸氧化酶法，甘油三酯(TG)采用甘油磷酸氧化酶-過氧化酶法，體重指數(BMI)=體重/身高2(kg/m2)。

2 結 果

2.1糖尿病各組血清中各臨床指標比較 糖尿病各組及健康對照組相比，年齡、性別無統計學差異(P>0.05)，與健康對照組相比，糖尿病各組TGF-β1濃度水平降低，C組與對照組比較有統計學意義(P<0.05)。與健康對照組比較，糖尿病各組BMP-7濃度水平升高(P<0.05)。見表1。

糖尿病各組間，低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、TG、TC、HbA1c無統計學差異(P>0.05)；B組與A組比較，FPG、TGF-β1水平差異無統計學意義(P>0.05)；C組與A組比較，BMP-7、TGF-β1、ACR、BUN、Cr、BMI水平差異有統計學意義(P<0.05)，C組與B組比較BMP-7、ACR、BUN、Cr、FPG水平差異有統計學意義(P<0.05)。血清TGF-β1水平與ACR呈正相關(r=0.433,P<0.001)，與BMP-7呈負相關(r=-0.493,P<0.001)。

2.2糖尿病各組中患者ACR水平與其他指標的相關性分析 A組中ACR與BMP-7呈負相關(r=-0.403，P<0.05)，與TGF-β1呈負相關(r=-0.141，P>0.05)，與LDL-C、TG、TC、HbA1c、BMI、BUN、Cr、FPG無明顯相關性(P>0.05)。B組中ACR與BMP-7呈負相關(r=-0.413，P<0.05)，與TGF-β1呈正相關(r=0.4，P<0.05)，與FPG呈正相關(r=0.046，P<0.05)，與Cr呈正相關(r=0.345，P<0.05)，與LDL-C、TG、TC、HbA1c、BMI、BUN，無明顯相關性(P>0.05)。

C組中ACR與BMP-7呈負相關(r=-0.353，P<0.05)，與TGF-β1呈正相關(r=0.832，P<0.001)，ACR與LDL-C呈正相關(R=0.41，P<0.05),與BUN、TG、TC、HbA1c、BMI、Cr、FPG無明顯相關性(P>0.05)。

2.3糖尿病組中ACR水平與其他指標的相關性分析 整體糖尿病組ACR與BMP-7呈負相關(r=-0.493,P<0.001)，與TGF-β1呈正相關(r=0.433,P<0.001)，與LDL-C呈正相關(r=0.295，P<0.05)，與Cr呈正相關(r=0.327,P<0.05)，與糖尿病家族史、BUN、TG、TC、BMI、FPG無相關性(P>0.05)。

表1 各組臨床指標檢測結果

3 討 論

TGF-β家族是一組可調節細胞生長、分化的蛋白質家族，這類細胞因子可使正常的成纖維細胞發生轉化，故而命名為轉化生長因子〔2〕。而在腎臟中，TGF-β1含量最高。鑒于大量的臨床及動物實驗研究可知，TGF-β1通過多種途徑對腎臟造成損傷。TGF-β是重要的腎臟纖維化的啟動因子，DN的腎臟纖維化本質是源自于管狀上皮細胞向間質細胞轉化(EMT),而TGF-β1可啟動并完成整個EMT過程〔3〕；TGF-β1升高時，便刺激系膜細胞合成IV型膠原蛋白，IV型膠原蛋白使細胞外基質降解所需要的酶合成減少，活性減低，合成多于降解，最終腎小球系膜細胞、近曲小管上皮細胞及足細胞等多種細胞細胞外基質(ECM)堆積〔4,5〕；在DN早期可介導足細胞凋亡。

BMP-7也稱為成骨蛋白-1(OP-1)，是TGF-β超家族的一個亞群，其高表達于集合管、髓袢升支厚壁段、遠端小管及腎小球臟層上皮細胞(足細胞)〔6〕，BMP-7的作用機制是防止腎小管萎縮、腎管狀上皮細胞向間質細胞轉化，阻斷單側輸尿管梗阻導致的上皮細胞凋亡及保持腎臟正常形態、功能等作用。許多實驗研究均證明，BMP-7是TGF-β重要的拮抗因子。BMP-7在腎小球系膜細胞激活BMP-RII和減少蛋白激酶C(PKC)觸發信號以防止高糖誘導的氧化應激，起著重要的抗氧化的作用〔7〕。最近研究發現，BMP-7在腎發生早期促進EMT，在腎功能逐漸喪失及腎臟纖維化中通過BMP-7抑制鈣黏蛋白、α-肌動蛋白(α-SMA)、纖連蛋白、I型膠原蛋白等因子的依賴物質，從而以抵消TGF-β1介導的EMT，以減緩腎衰竭的進展〔7,8〕。

在本實驗中，A組中ACR與TGF-β1呈負相關,這可能是TGF-β1系統功能下降引起的一種代償性反應。但整體糖尿病組ACR與TGF-β1呈正相關，在日后的研究中需要加大樣本量進一步證實。本實驗顯示，隨DN進展，血清BMP-7水平逐漸升高，且與ACR呈正相關。同時本實驗也提示糖尿病ACR正常時，血清BMP-7濃度已升高，對BMP-7和TGF-β1進行評估比傳統的監測蛋白尿及腎小球濾過率能更準確地預測出腎臟疾病終點〔9〕。因此血清BMP-7可能成為診斷早期DN的新的敏感指標，同時為DN的治療提供新的靶點。

4 參考文獻

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