微生態制劑噬菌28對金鯽魚血液指標的影響

陳景明

摘要：利用不同劑量的微生態制劑（噬菌28）添加在飼料中飼養金鯽魚8 d、16 d、24 d，測定其與魚體生長和健康相關的血液指標。結果顯示：試驗組紅細胞壓積、紅細胞數、血紅蛋白含量等血液指標相對于對照組均有明顯變化，且隨著微生態制劑添加量的增加和飼喂時間的延長而提高，表明噬菌28能改善金鯽魚的血液指標，提高新陳代謝，促進魚類健康生長。

關鍵詞：微生態制劑；金鯽魚；血液指標

20 世紀中葉，抗生素的發現以及化學抗菌物質合成的成功，作為飼料添加劑被廣泛利用，特別在畜牧生產和動物保健中發揮了重要作用。隨著使用率的增多，弊端也越來越得到了人們廣泛的認識，世界各國科學家正在努力尋求和開發無毒副作用的新型飼料添加劑。微生態制劑，又名活菌制劑或生菌劑［1］，具有無毒副作用、無殘留污染、不產生抗藥性和成本較低等特點，是理想的抗生素替代品［2-3］。微生態制劑以其綠色安全、無毒副作用、無殘留的優點逐步成為抗生素類添加劑替代品，已廣泛應用于豬、雞、鴨、牛、羊、兔以及水產養殖等各個方面，在畜牧業生產中的作用越來越凸顯。

最早對益生菌(Probiotics)定義的是1974年Parker［4］，認為益生菌是“有助于腸道菌群平衡的微生物和物質(可能含有抗生素)”。而首次將益生菌應用于水產養殖的則是Kozasa［5］，他用了1株芽孢桿菌(從土壤中分離的)處理日本鰻鱺，發現能抑制或殺滅愛德華氏菌，從而降低了死亡率。此后，有關益生菌的研究開始引起人們的興趣，越來越多的成果見諸報端，對益生菌的理解也得到了相應的發展。Moriarty把益生菌的含義擴展為“一類添加到養殖水體中的有益微生物”［6］。“微生態制劑”［7］、微生態調節劑等新的名詞不斷出現。某些微生態制劑如噬菌蛭弧菌微生物生態制劑，具有獨特的“寄生”和“溶解”有害細菌的生態效應［8］。有關微生態制劑對魚類血液指標影響的研究少見報道。本試驗旨在了解添加微生態制劑喂養金鯽魚后血液生理指標的變化情況，為合理配制飼料，改善魚的體質，實現魚類的健康養殖積累一些基礎資料。

1材料與方法

1.1試驗材料

1.1.1試驗魚將48尾體重相近的金鯽魚（購買于泉州東街魚類市場），隨機分為3個試驗組和1個對照組，各組分別放養12尾，各組均使用規格相同的塑料養殖箱養殖。并配有供氧設施。

1.1.2噬菌28主要成分：噬菌蛭弧菌＞5.6×107puf/mL，單胞菌噬菌體＞4.7×108puf/mL，凈水因子＞5 mg/L，促生長因子＞4 mg/L。由南京巨豹生物工程有限公司生產。

1.1.3試驗試劑赫姆氏液、白細胞稀釋液、0.1 mol/L鹽酸、氯化鈉溶液、抗凝劑（3.8%的檸檬酸鈉）。

1.1.4飼喂方法將微生態制劑按飼料重的比例量取，對照組不加，試驗組1（5 mL/kg）、試驗組2（10 mL/kg）、試驗組3（20 mL/kg）噴于飼料上，晾干投喂，每天早上10：00、傍晚18：00左右投喂兩次。投餌量為金鯽魚體重的2%，以魚0.5 h內吃完并略有剩余為標準，試驗時間8 d為一個間段，共三個間段，試驗總時間為24 d。

1.2試驗方法

1.2.1樣本處理在試驗的第8 d、16 d、24 d，分別采用鰓部取血，進行紅細胞壓積、白細胞數、紅細胞數、血紅蛋白含量、紅細胞滲透脆性等5個血液指標的測定。

1.2.2測定指標與方法

白細胞數：用白細胞稀釋液，將血樣稀釋20倍后，用血細胞計數板計數。

紅細胞數：以赫姆氏液為稀釋液，將血樣稀釋200倍后，用血細胞計數板計數。

血紅蛋白含量：沙利氏法。

紅細胞壓積：將抗凝血裝入帶刻度的離心管中，再以3 000 r/min的速度離心30 min，最后計算紅細胞壓積之百分數。

紅細胞滲透脆性：試管稀釋法［9］。

1.2.3數據處理原始數據經EXCEL處理后，再制作數據表。

2結果與分析

2.1噬菌28對血液指標的影響情況

表1、2、3顯示，添加不同濃度的噬菌28均能使金鯽魚的血液指標得到優化，特別是血紅蛋白含量、紅細胞數、紅細胞壓積等指標影響較大，而且量效關系明顯，而紅細胞的脆性隨著噬菌28在飼料中添加量的增加，則逐漸降低。

2.2噬菌28在不同天數對血液指標的影響情況

表1、2、3同時也表明，同一試驗組添加相同濃度的噬菌28在飼喂時間增加時，也能使金鯽魚的血液指標得到進一步優化，血紅蛋白含量、紅細胞數、紅細胞壓積等指標受影響較明顯。并且隨著飼喂噬菌28的時間延長，時效關系明顯，而紅細胞的滲透脆性隨著飼喂噬菌28時間的延長，也逐漸降低。

表1噬菌28在飼喂8 d后對金鯽魚血液生理指標的影響

測定項目

對照組

試驗組1

試驗組2

試驗組3

紅細胞數/萬·mm-3

104

111

114

118

白細胞數/萬·mm-3

5.6

5.2

5.0

4.8

血紅蛋白/g·100 mL-1

5.2

5.3

5.5

5.8

紅細胞脆性/NaCl%

開始溶血

0.48～0.45

0.47～0.44

0.45～0.43

0.42～0.40完全溶血

0.36～0.33

0.35～0.33

0.32～0.29

0.31～0.28

紅細胞比容/%

26

28

31

34

表2噬菌28在飼喂16 d后對金鯽魚血液生理指標的影響

測定項目

對照組

試驗組1

試驗組2

試驗組3

紅細胞數/萬·mm-3

105

112

115

123

白細胞數/萬·mm-3

5.8

5.2

5.1

4.7

血紅蛋白/g·100 mL-1

5.2

5.5

5.9

6.8

紅細胞脆性/NaCl%

開始溶血

0.48～0.44

0.46～0.44

0.44～0.42

0.40～0.38完全溶血

0.36～0.32

0.34～0.32

0.33～0.28

0.31～0.26

紅細胞比容/%

27

29

31

35

表3噬菌28在飼喂24 d后對金鯽魚血液生理指標的影響

測定項目

對照組

試驗組1

試驗組2

試驗組3

紅細胞數/萬·mm-3

105

114

117

126

白細胞數/萬·mm-3

6.0

5.3

5.2

4.8

血紅蛋白/g·100 mL-1

5.1

5.7

6.1

7.1

紅細胞脆性/NaCl%

開始溶血

0.48～0.44

0.46～0.42

0.44～0.40

0.40～0.34完全溶血

0.36～0.32

0.34～0.30

0.32～0.26

0.30～0.24

紅細胞比容/%

26

30

33

37

3結論與討論

3.1噬菌28與血液生理指標

魚類血液學指標受多種因素的影響而有較大的差異，因此被廣泛地用來評價魚類的健康狀況、營養狀況以及對環境的適應狀況，是重要的生理、病理和毒理學指標。魚類血液與機體的代謝、營養狀況以及疾病有著密切的關系。雌鯽魚饑餓半個月，紅細胞數下降，但當餌料充足，營養條件好時血紅蛋白含量明顯增高［10］。沈曉民等在研究“團頭魴血液指標與水環境的關系”時發現，魚類缺氧代償能力的獲得主要靠增加紅細胞和血紅蛋白的數量［11］。

本試驗在金鯽魚的飼料中添加了微生態制劑噬菌28，試驗魚的血液中的紅細胞數、血紅蛋白含量、紅細胞壓積等指標的量效關系明顯（見表1、2、3）。

3.2噬菌28與魚類健康生長

本試驗結果也證明：當噬菌28進入魚體腸道后，改善了魚體內環境以及消化和吸收的狀態，明顯改善了試驗魚的血液指標，特別是血紅蛋白含量和血細胞數的增加，保證了魚體組織對二氧化碳的排除和氧氣的需求，促進了試驗魚的健康生長。

同時，噬菌28殺菌力強，可以清除動物體內及水中的假單胞菌、氣單胞菌、弧菌等多種細菌，裂解率可達97%以上。有報道稱將不同數量的蛭弧菌投放于水族箱中，用浸泡法對鯉魚進行人工感染嗜水氣單胞菌試驗，蛭弧菌對嗜水氣單胞菌有較強的裂解和凈化作用，對水中的氨氮有一定的降解作用［12］。張梁、周維祿［13］用添加蛭弧菌的飼料喂養草魚，能夠顯著降低餌料系數，加快草魚的生長發育。同時明顯影響各項免疫指標，免疫力增強。

本試驗結果表明，噬菌28能使魚體血液指標得到改善，紅細胞脆性明顯降低，這對于改善紅細胞膜的組成成分和膜的流動性，調節機體微生態平衡，促進新陳代謝具有積極意義，在維持機體正常生理功能及正常代謝水平方面有非常重要的作用。

參考文獻：

［1］ Sal minen S, OuweSand A,BennoYeta1.Probiotics:How Should bfined［J］.Trends Food Sci- teeh ,1999,10 :107-110

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［3］ 王建業，王永坤.微生物分類及益生菌必備條件.動物微生態研究進展［M］.北京：中國農業大學出版社，2000：1-24 

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［5］ Kozasa M. Toyocerin(Bacillus toyoi) as growth promoter for animal feeding［J］. Microbiol Aliment Nutr,1986, 4:121-135

［6］ Moriarty D J W.Control of lu minous vibrio species in penaeid aquaculture ponds［J］.Aqua,1998,164(1/4):351-358

［7］ 薛恒平.微生態制劑淺析［J ］.飼料工業，1996，17(1)：30-34

［8］ 秦生巨. 噬菌蛭弧菌及其微生物生態制劑在水生動物養殖上的應用［J］.水產科技情報, 2007, 34 (2)：79-81.

［9］ 解景田，趙靜.生理學實驗（第2版）［M］.北京：高等教育出版社，2002:62-65

［10］ 林浩然. 魚類生理學［M］.廣東：廣東高等教育出版社，1999：82-87

［11］ 沈曉民，童合一，華苒. 團頭魴血液指標與水環境的關系［J］. 生態學報，1991，11(1)：92-94

［12］ 楊莉，王秀茹.蛭弧菌對鯉感染嗜水氣單胞菌預防效果的觀察［J］.大連水產學院學報，2000，15(4)：288-292

［13］ 張梁，周維祿.蛭弧菌對草魚生長及免疫力的影響［J］.糧食與飼料工業，2005（4）：36-37

Effect of the Microbial ecological agents on the Blood Parameters of Carasslus auratus



CHEN Jing ming



（Quanzhou Preschool Education College,Quanzhou Fujian 362000）

Abstract：Carasslus auratus were fed different amounts of Microbial ecological agents(phage 28) as additive of the fodder 8 days,16 days,24 days,and the blood parameters related to their growth and health were measured. Red blood cell number (RBC), haemoglobin content(Hb), hemotocrit(Ht) in the treatment groups were superior to those of the control group and with increasing amount of the Microbial ecological agentsadditive and the fed time.Thus,the result demonstrated that Microbial ecological agents can improve blood parameters of Carasslus auratus, enhance their metabolism and expedite their healthy growth.



Key words：Microbial ecological agents; Carasslus auratus; parameter

本試驗在金鯽魚的飼料中添加了微生態制劑噬菌28，試驗魚的血液中的紅細胞數、血紅蛋白含量、紅細胞壓積等指標的量效關系明顯（見表1、2、3）。

3.2噬菌28與魚類健康生長

本試驗結果也證明：當噬菌28進入魚體腸道后，改善了魚體內環境以及消化和吸收的狀態，明顯改善了試驗魚的血液指標，特別是血紅蛋白含量和血細胞數的增加，保證了魚體組織對二氧化碳的排除和氧氣的需求，促進了試驗魚的健康生長。

同時，噬菌28殺菌力強，可以清除動物體內及水中的假單胞菌、氣單胞菌、弧菌等多種細菌，裂解率可達97%以上。有報道稱將不同數量的蛭弧菌投放于水族箱中，用浸泡法對鯉魚進行人工感染嗜水氣單胞菌試驗，蛭弧菌對嗜水氣單胞菌有較強的裂解和凈化作用，對水中的氨氮有一定的降解作用［12］。張梁、周維祿［13］用添加蛭弧菌的飼料喂養草魚，能夠顯著降低餌料系數，加快草魚的生長發育。同時明顯影響各項免疫指標，免疫力增強。

本試驗結果表明，噬菌28能使魚體血液指標得到改善，紅細胞脆性明顯降低，這對于改善紅細胞膜的組成成分和膜的流動性，調節機體微生態平衡，促進新陳代謝具有積極意義，在維持機體正常生理功能及正常代謝水平方面有非常重要的作用。

參考文獻：

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［11］ 沈曉民，童合一，華苒. 團頭魴血液指標與水環境的關系［J］. 生態學報，1991，11(1)：92-94

［12］ 楊莉，王秀茹.蛭弧菌對鯉感染嗜水氣單胞菌預防效果的觀察［J］.大連水產學院學報，2000，15(4)：288-292

［13］ 張梁，周維祿.蛭弧菌對草魚生長及免疫力的影響［J］.糧食與飼料工業，2005（4）：36-37

Effect of the Microbial ecological agents on the Blood Parameters of Carasslus auratus



CHEN Jing ming

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（Quanzhou Preschool Education College,Quanzhou Fujian 362000）

Abstract：Carasslus auratus were fed different amounts of Microbial ecological agents(phage 28) as additive of the fodder 8 days,16 days,24 days,and the blood parameters related to their growth and health were measured. Red blood cell number (RBC), haemoglobin content(Hb), hemotocrit(Ht) in the treatment groups were superior to those of the control group and with increasing amount of the Microbial ecological agentsadditive and the fed time.Thus,the result demonstrated that Microbial ecological agents can improve blood parameters of Carasslus auratus, enhance their metabolism and expedite their healthy growth.



Key words：Microbial ecological agents; Carasslus auratus; parameter

本試驗在金鯽魚的飼料中添加了微生態制劑噬菌28，試驗魚的血液中的紅細胞數、血紅蛋白含量、紅細胞壓積等指標的量效關系明顯（見表1、2、3）。

3.2噬菌28與魚類健康生長

本試驗結果也證明：當噬菌28進入魚體腸道后，改善了魚體內環境以及消化和吸收的狀態，明顯改善了試驗魚的血液指標，特別是血紅蛋白含量和血細胞數的增加，保證了魚體組織對二氧化碳的排除和氧氣的需求，促進了試驗魚的健康生長。

同時，噬菌28殺菌力強，可以清除動物體內及水中的假單胞菌、氣單胞菌、弧菌等多種細菌，裂解率可達97%以上。有報道稱將不同數量的蛭弧菌投放于水族箱中，用浸泡法對鯉魚進行人工感染嗜水氣單胞菌試驗，蛭弧菌對嗜水氣單胞菌有較強的裂解和凈化作用，對水中的氨氮有一定的降解作用［12］。張梁、周維祿［13］用添加蛭弧菌的飼料喂養草魚，能夠顯著降低餌料系數，加快草魚的生長發育。同時明顯影響各項免疫指標，免疫力增強。

本試驗結果表明，噬菌28能使魚體血液指標得到改善，紅細胞脆性明顯降低，這對于改善紅細胞膜的組成成分和膜的流動性，調節機體微生態平衡，促進新陳代謝具有積極意義，在維持機體正常生理功能及正常代謝水平方面有非常重要的作用。

參考文獻：

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［3］ 王建業，王永坤.微生物分類及益生菌必備條件.動物微生態研究進展［M］.北京：中國農業大學出版社，2000：1-24 

［4］ Parker R B. Probiotics-The other half of the antibiotics story［J］. Anim Nutr Heal,1974,29:4-8. 

［5］ Kozasa M. Toyocerin(Bacillus toyoi) as growth promoter for animal feeding［J］. Microbiol Aliment Nutr,1986, 4:121-135

［6］ Moriarty D J W.Control of lu minous vibrio species in penaeid aquaculture ponds［J］.Aqua,1998,164(1/4):351-358

［7］ 薛恒平.微生態制劑淺析［J ］.飼料工業，1996，17(1)：30-34

［8］ 秦生巨. 噬菌蛭弧菌及其微生物生態制劑在水生動物養殖上的應用［J］.水產科技情報, 2007, 34 (2)：79-81.

［9］ 解景田，趙靜.生理學實驗（第2版）［M］.北京：高等教育出版社，2002:62-65

［10］ 林浩然. 魚類生理學［M］.廣東：廣東高等教育出版社，1999：82-87

［11］ 沈曉民，童合一，華苒. 團頭魴血液指標與水環境的關系［J］. 生態學報，1991，11(1)：92-94

［12］ 楊莉，王秀茹.蛭弧菌對鯉感染嗜水氣單胞菌預防效果的觀察［J］.大連水產學院學報，2000，15(4)：288-292

［13］ 張梁，周維祿.蛭弧菌對草魚生長及免疫力的影響［J］.糧食與飼料工業，2005（4）：36-37

Effect of the Microbial ecological agents on the Blood Parameters of Carasslus auratus

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CHEN Jing ming

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（Quanzhou Preschool Education College,Quanzhou Fujian 362000）

Abstract：Carasslus auratus were fed different amounts of Microbial ecological agents(phage 28) as additive of the fodder 8 days,16 days,24 days,and the blood parameters related to their growth and health were measured. Red blood cell number (RBC), haemoglobin content(Hb), hemotocrit(Ht) in the treatment groups were superior to those of the control group and with increasing amount of the Microbial ecological agentsadditive and the fed time.Thus,the result demonstrated that Microbial ecological agents can improve blood parameters of Carasslus auratus, enhance their metabolism and expedite their healthy growth.

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Key words：Microbial ecological agents; Carasslus auratus; parameter