兒童血液中25-羥基維生素D3含量測定及臨床研究進展

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1.昆明醫科大學研究生部，云南 昆明 650500；2.昆明醫科大學附屬兒童醫院，云南 昆明 650228

兒童血液中25-羥基維生素D3含量測定及臨床研究進展

孫幫燕1何文姬2楊曉紅2張楨2*

1.昆明醫科大學研究生部，云南 昆明 650500；2.昆明醫科大學附屬兒童醫院，云南 昆明 650228

維生素D是一組具有生物活性的脂溶性類固醇衍生物，25-羥基維生素D3是它的代謝物中較為重要的一種，在兒童保健和多種兒童疾病的診療中具有重要意義。筆者就其含量測定及臨床研究進展作一綜述。

25-羥基維生素D3；含量測定；臨床研究；兒童

維生素D是人體必須的營養素之一，對人體健康有重要意義。研究發現[1]，維生素D除具有傳統的調節鈣磷代謝和骨骼健康等作用外，還具調節免疫、抗腫瘤、防治代謝綜合征等骨外生物效應。有研究表明[2]，維生素D還具有抗炎、減少氣道重塑等能力。對于兒童，合理的維生素D濃度對預防兒童佝僂病、腫瘤、1型糖尿病、心臟疾病和骨質疏松的發生有較大作用[3]。因此，實時對體內的維生素D進行含量檢測，并適時補充維生素D對兒童的健康尤為重要。

維生素D包括維生素D2(麥角骨化醇)和維生素D3(膽骨化醇)兩者。前者存在于植物中，后者系由人體或動物皮膚中的7-脫氫膽固醇經日光中紫外線的光化學作用轉變而成。維生素D在體內必須經過兩次羥基化作用后才能發揮生物效應。首先，經肝細胞發生第一次羥基化，生成25-羥基維生素D3(25-(OH)D3)，然后循環中的25-(OH)D3與α-球蛋白結合被運載到腎臟，在近端腎小管上皮細胞線粒體中的1-α羥化酶的作用下再次羥化，生成有很強生物活性的1,25-二羥維生素D，即1,25-(OH)2D3[2]。雖然其代謝物中1,25-(OH)2D3的生物活性是最強的，但25-(OH)D3是循環中維生素D的主要形式，其含量在血液中相對較高，半衰期也較長，因此一般認為臨床上可以通過測定血中25-(OH)D3的含量來了解維生素D的營養狀況[3,4]。

目前，國內外對25-(OH)D3的含量監測和臨床研究越來越多，但由于試劑盒之間的差異和方法不同，實驗室之間結果也有一定的差異。本文就其研究進展和存在的問題進行綜述。

1 含量測定

25-(OH)D3的經典測定法是競爭性蛋白結合測定法和放免法[5]。目前，國內外測定25-(OH)D3的方法主要分兩類：酶聯免疫法和色譜法。酶聯免疫法有競爭性蛋白結合測定法和放免法，色譜法有高效液相色譜法、超高效液相色譜法和高效液相色譜-質譜聯用檢測法。酶聯免疫法的樣品處理過程較簡單，耗時少，但具有嚴重的交叉反應現象，因此國內外已使用較少。色譜法樣品處理過程相對復雜，但具有特異性高、靈敏度高、檢測速度快的優點，是目前臨床使用較多的方法[5,6,7,8]。其中，高效液相色譜-質譜聯用檢測法的檢測時間最短，但成本高；高效液相色譜法檢測時間相對較長，成本較前兩者均低；而超高效液相色譜法的成本和檢測速度均介于兩者之間，可以在臨床上推廣使用。

2 臨床應用

2.1 與兒童佝僂病的關系 第七版的《兒科學》中明確提出維生素D的含量檢測和骨骼X線的檢查為診斷維生素D缺乏性佝僂病的金標準，其中血清25-(OH)D3水平為最可靠的診斷標準[2]。王曉燕等[9]的研究中佝僂病患兒血清25-(OH)D3水平明顯低于非佝僂病小兒，證實了它對兒童健康的重要性。

2.2 與兒童肥胖的關系 國內外研究均表明，兒童肥胖與體內缺乏25-羥基維生素有關，尤其是腹部脂肪積聚。分析其原因，一是肥胖兒童的戶外活動時間少，皮膚暴露于紫外線中的時間亦少，其體內合成的25-(OH)D3相應減少；二是維生素D作為一種脂溶性分子，它在脂肪中的溶解和儲存也可能影響了循環水平，從而導致兒童體重增加。但目前對于補充維生素D是否改善肥胖及其合理劑量尚無定論，肥胖與維生素D的關系及前瞻性研究值得進一步探討[10,11]。

2.3 與兒童免疫性疾病的關系 研究證實，25-(OH)D3可影響多種細胞的生長和分化，是一種重要的免疫調節劑，是類固醇激素超家族中的一員。研究發現維生素D受體的多樣性與T輔助淋巴細胞的發育失衡有關，從而引起免疫系統代謝性疾病，如兒童呼吸系統感染疾病(如支氣管炎[12]，支氣管哮喘[15,17]和肺炎[16])、Ⅰ型糖尿病[13]、白癜風[18]等。

2.3.1 與兒童Ⅰ型糖尿病的關系 王凌飛等[13]的研究表明，Ⅰ型糖尿病(T1dM)患兒體內的血清25-羥基維生素D的水平明顯低于正常健康兒童。基于糖尿病的流行病學及對T1dM動物模型的研究表明，T1dM的發生、發展與Th1/Th2平衡狀態密切相關，而25-羥基維生素D可以糾正T1dM的這種免疫失衡狀態。這些研究預示，維生素D可能成為T1dM早期預防、干預的新手段[13,14]。

2.3.2 與人博卡病毒感染肺炎的關系 萬國鳳等[16]的研究表明，人博卡病毒感染肺炎患兒體內的血清25-(OH)D3水平明顯低于正常健康兒童。25-(OH)D3對免疫系統有著重要的調節作用，其機制是維生素D的受體在體內分布較廣，免疫細胞中均有表達，它作為一種調節劑，抑制炎性細胞因子及刺激抗微生物多肽的產生，從而發揮預防肺部感染的作用。

2.3.3 與兒童患白癜風的關系 楊蘇等[18]的研究結果表明，白癜風患兒體內的25-(OH)D3含量顯著低于正常健康兒童。由于維生素D影響新陳代謝，尤其對免疫系統具有廣泛作用，且參與黑素合成，而白癜風的發病與自身免疫及黑素細胞破壞有關，因此推測兒童白癜風的發病可能與維生素D含量低有關，維生素D缺乏可能參與了白癜風發病的某個環節，如免疫功能失調，黑色素合成障礙。但該研究樣本數尚小，有待于擴大樣本數進一步研究，對維生素D與疾病的嚴重性、活動性的關系以及補充維生素D是否有助于白癜風臨床改善尚有待于進一步探討。

2.4 與兒童缺鐵性貧血的關系 缺鐵性貧血為兒童常見的營養缺乏性疾病之一，尤其是嬰幼兒期。黃梅等[19]的研究表明缺鐵也可能削弱腸道對維生素D的吸收而導致維生素D的缺乏。補充鐵劑能促進維生素D在腸道的吸收，提高血清維生素 D水平，改善維生素D缺乏狀況。

3 25-羥基維生素D3的正常值范圍

到目前為止，國內關于25-(OH)D3的正常值范圍暫無統一標準，表1為部分文獻中25-羥基維生素D3的正常值范圍。究其原因，兒童體內25-(OH)D3的值與年齡、居住環境、喂養方式、飲食習慣、戶外活動、反復呼吸道感染有關，且個體差異較大[20,21,22,23]。如年齡越小越易發生維生素D缺乏，紫外線較強的地區維生素D吸收較多，夏秋季節25-(OH)D3含量的均值高于春冬。

表1 部分文獻中25-羥基維生素D3的正常值范圍參考值

綜上所述，25-(OH)D3的含量檢測及臨床研究對兒童的健康有重要意義，但仍有許多問題需要進一步研究、探討，以便在臨床上為患兒的診治提供重要的理論依據。

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Theprogressforthedeterminationandclinicalstudyof25-HydroxyvitaminD3inchildren’sserum

SUN Bang-yan1HE Wen-ji2YANG Xiao-hong2ZHANG Zhen2

(1.Kunming Medical University postgraduate department,Kunming 650500,China;2.Department of Clinical Laboratory,Children Hospital of Kunming Medical University, Kunming 650228, China

Vitamin D is a group of fat-soluble steroid derivatives which have biological activity.25-(OH)-D3 is the relatively important one of the VitD’s metabolism substance, playing an critical role in the diagnosis and treatment of children diseases and healthy. This article is a review centering on the progress of determination and clinical study.

25-Hydroxyvitamin D3; determination; clinical application; children

孫幫燕(1991-)，女，昆明醫科大學2013級臨床藥理專業研究生。

張楨(1976-)，男，2012年云南省醫學學科帶頭人，醫學碩士,昆明醫科大學碩士研究生導師，昆明市兒童醫院副教授/副主任藥師。

R446.11

A

1007-8517(2014)15-0037-02

2014.05.13)