太行山區柴胡品質分析研究※

劉艷麗 王永艷 孔增科

(河北省邯鄲市食品藥品檢驗中心，河北 邯鄲 056002)

制劑與質量控制

太行山區柴胡品質分析研究※

劉艷麗 王永艷1孔增科△

(河北省邯鄲市食品藥品檢驗中心，河北 邯鄲 056002)

柴胡；柴胡皂甙；色譜法,薄層；色譜法,高壓液相；中藥鑒定

柴胡為傘形科植物柴胡BepleurumchineseDC.或狹葉柴胡BepleurumscorzonerifoliumWild.的干燥根，收載于《中華人民共和國藥典》2010年版一部，是一種常用的中藥材。性味辛、苦、微寒，歸肝、膽、肺經，具有疏散退熱、疏肝解郁、升舉陽氣的功效，主要用于感冒發熱，寒熱往來，胸脅脹痛，月經不調，子宮脫垂，脫肛等癥。太行山區為柴胡主產地，藥材資源豐富，品質優良。本研究對流通市場柴胡及太行山不同產地采集的柴胡進行質量比較研究分析，結果如下。

1 薄層定性分析

1.1 儀器與試藥 ZF-2型三用紫外儀(上海電子儀器廠)。硅膠G薄層板(青島海洋化工廠分廠)；5批藥材(產地：甘肅；涉縣栽培；武安石河灣；山西吉縣；武安瑯礦)；柴胡皂苷a對照品(中國藥品生物制品檢定所，批號：110777-200507)；柴胡皂苷d對照品(中國藥品生物制品檢定所，批號:110778-200506)；柴胡對照藥材(中國食品藥品檢定研究院，批號：120992-201108)；乙酸乙酯、乙醇,甲醇均為分析純，水為純化水。

1.2 方法與結果

1.2.1 供試品溶液的制備 分別取各樣品柴胡粉末(過四號篩)約0.5g，加甲醇20mL，超聲處理10min，濾過，濾液濃縮至5mL，作為供試品溶液。

1.2.2 對照品溶液的制備 取柴胡皂苷a對照品與柴胡皂苷d對照品，加甲醇制成每mL各含0.5mg的混合溶液，作為對照品溶液。

1.2.3 對照藥材溶液的制備 同“1.2.1供試品溶液的制備”制成對照藥材溶液。

1.2.4 薄層定性 按照薄層色譜法(《中華人民共和國藥典》一部 附錄Ⅵ B)試驗，吸取上述溶液各5μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-乙醇-水(8∶2∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以2%對二甲氨基苯甲醛的40%硫酸溶液，在60℃加熱至斑點顯色清晰，分別置日光和紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜和對照品色譜相應的位置上，顯相同的熒光斑點。 見封3，圖1。

2 柴胡皂苷a和柴胡皂苷d的定量分析

2.1 儀器與試藥 Waters e2695高效液相色譜儀(美國)；Empower工作站；waters 2498型紫外檢測器；XS105型電子天平(瑞士梅特勒)。甲醇、濃氨均為分析純，乙腈為色譜純，水為純化水，柴胡皂苷a對照品(中國藥品生物制品檢定所， 批號：110777-200507)；柴胡皂苷d對照品(中國藥品生物制品檢定所，批號:110778-200506)；5批藥材(產地：甘肅；涉縣栽培；武安石河灣；山西吉縣；武安瑯礦)。

2.2 方法與結果

2.2.1 色譜條件及系統性試驗 以乙腈為流動相A，以水為流動相B，進行梯度洗脫，0～50min，A：25%～75%，B：90%～10%；50～55min，A：25%；B為75%，延時10min，Sunfire C18(250mm×4.6mm,5μm)為固定相，波長為210nm，柱溫：30℃，進樣量：20μL。在上述色譜條件下，對照品和供試品的色譜圖見圖2。

2.2.2 對照品溶液的制備 精密稱取柴胡皂苷a對照品0.01053g與柴胡皂苷d對照品0.01323g，置25mL量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為混合對照品溶液。

2.2.3 供試品溶液的制備 分別取各樣品柴胡細粉(過四號篩)約0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加入5%濃氨試液的甲醇溶液25mL，密塞，30℃水溫超聲處理30min，濾過，用甲醇20mL分2次洗滌容器及藥渣，洗液與濾液合并，回收溶劑至干。殘渣加甲醇溶解，轉移至5mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續濾液即得。

2.2.4 線性關系的考察 取上述混合對照品溶液，分別進樣5、10、20、30、50μL于高效液相色譜儀中，按上述色譜條件進行峰面積測定，以對照品濃度(mg/mL)為橫坐標，峰面積為縱坐標，進行線性回歸，柴胡皂苷d回歸方程：Y=5E+06X+36462,r=0.999 9，結果表明柴胡皂苷d在0.1323mg/mL～1.323mg/mL濃度范圍內線性關系良好。柴胡皂苷a回歸方程：Y=9E+06X+509 48,r=0.999 9，結果表明柴胡皂苷d在0.1053mg/mL～1.053mg/mL濃度范圍內線性關系良好。

圖2 柴胡高效液相色譜圖

0柴胡皂苷a、d標準品；1膜緣柴胡(甘肅)；2柴胡(涉縣栽培)；3柴胡(武安石河灣)；4柴胡(山西吉縣)；5柴胡(武安瑯礦)

2.2.5 精密度試驗 精密吸取上述混合對照品溶液20μL，重復進樣5次，測定峰面積，柴胡皂苷a、柴胡皂苷d的相對標準偏差(RSD)分別為0.2%、0.2%。

2.2.6 重復性試驗 取同一批供試品5份按上述供試品溶液制備方法和色譜條件進行測定，測得柴胡皂苷a、柴胡皂苷d的含量分別為1.211mg/g、2.842mg/g。

2.2.7 穩定性試驗 精密吸取同一批供試品溶液20μL，每隔2h進樣，共測定5次，其RSD為1.2%。

2.2.8 加樣回收率試驗 精密稱取6份已知含量的供試品細粉約0.25g，再分別精密加混合對照品溶液1mL，按供試品溶液的制備方法和色譜條件下進行測定，柴胡皂苷a、d平均回收率為97.26%、97.83%，RSD分別為0.9%、0.7%。結果見表1。

2.2.9 樣品含量測定 取樣品,按上述供試品溶液制備方法制備，精密量取供試品溶液和對照品溶液20μL,注入高效液相色譜儀測定。結果見表2。

表1 回收率測定結果

表2 樣品測定結果

3 討 論

3.1 根據薄層色譜發現，與柴胡對照藥材、混合對照品比較，5批柴胡在相應的位置上均含有有效活性成分柴胡皂苷a、d，其中山西吉縣產柴胡斑點清晰，顏色深，其次是武安石河灣產柴胡、涉縣產栽培柴胡、武安瑯礦產柴胡、甘肅產膜緣柴胡，其他色斑比較深淺有所不同，說明5批柴胡藥材所含成分有所差異。

3.2 通過采用液相色譜法定量測定柴胡皂苷a、d含量比較發現，涉縣栽培柴胡比甘肅產膜緣柴胡中柴胡皂苷a、d的含量高出幾倍，太行山區產柴胡皂苷a、d含量比《中華人民共和國藥典》規定含量普遍偏高，說明太行山區產柴胡品種優良，質量上乘。

3.3 近年來藥品流通市場上出售的柴胡甘肅產膜緣柴胡占較大份額，本研究通過實驗數據分析比較，其所含柴胡皂苷a、d的量低于《中華人民共和國藥典》規定，應引起藥品生產、經營、使用機構和藥品監督單位的重視。

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典2010年版(一部)[S].北京：中國醫藥科技出版社，2010: 263-264.

[2]李競,高英，李海龍，等.太行山區柴胡中總皂苷及柴胡皂苷a、d的含量測定[J].中國醫藥導報,2013,10(8):124-126，129.

[3]李競,高英，王振華，等.柴胡的質量評價研究[J].北方藥學,2013， 10(6):8-10.

[4]付正良，孔增科.涉縣野生柴胡資源與品質研究報告[C]//第二屆全國中藥商品學術大會論文集.隴西：中國商品研究編輯委員會，2011：171-175.

(本文編輯：董軍杰)

※ 項目來源：河北省邯鄲市科學技術研究與發展計劃項目(編號：1113108018)

劉艷麗(1973—)，女，副主任藥師,學士。從事藥品檢驗及標準研究工作。

R282.5;R282.71;R284.1

A

1002-2619(2014)11-1698-03

2014-04-08)

△ 通訊作者： 河北省邯鄲市食品藥品檢驗中心，河北 邯鄲 056002

1 河北省邯鄲市第一醫院藥劑科，河北 邯鄲 056001