基于開發產業化的蕎麥黃酮復合物對細菌性陰道炎療效評估

姜妍 高福佳　金玲　王妍　韓淑英

摘 要：以混合細菌感染建立大鼠細菌性陰道炎模型，以高、中、低劑量蕎麥黃酮復合物為受試藥物，以潔爾陰洗液作為對照，選擇大鼠一般狀態（體重）和陰道局部外觀、陰道分泌物、細菌及壞死的脫落細胞鏡檢及陰道組織的病理變化作為觀察指標。結果顯示：蕎麥黃酮復合物能有效地改善外陰腫脹和分泌物增多的現象，明顯抑制大鼠陰道組織病理學損傷，與模型組比較病理積分有明顯差異。表明蕎麥黃酮復合物對大鼠細菌性陰道炎有較好療效，具有開發生產的潛力。

關鍵詞：蕎麥黃酮復合物；金黃色葡萄球菌；綠膿桿菌；大腸桿菌；陰道炎

一、材料

SPF級SD大鼠，♀，無孕。蕎麥黃酮復合物：采用正交試驗法以水加分離劑（殼聚糖）提取蕎麥黃酮復合物（成熟技術），配伍葛根、天花粉、麥冬、玄參和麻仁的水提物制成；陽性對照藥潔爾陰洗液。金黃葡萄球菌，綠膿桿菌，大腸桿菌臨床新分離菌株，由開灤醫院檢驗科提供。

二、試驗方法

（一）模型制備。將3種菌株復蘇、傳代，用無菌營養肉湯將每種菌配制成各自濃度為1.0x109個/mL的菌液，之后將三種菌液按1：1：1的比例混合成感染菌液。用微量加樣器緩慢插入大鼠陰道約1 cm～1.5 cm，注入混合細菌液為50ul，1次/d，連續6天。模型鑒定成功后，成摸大鼠隨機分組。

（二）分組與給藥。雌性大鼠隨機分為正常對照組、模型組、陽性藥物潔爾陰洗液組以及蕎麥黃酮復合物高劑量組（1.35g/kg/d）、中劑量組（0.27g/kg/d）、低劑量組（0.135g/kg/d），共6組n=12。除正常對照組和模型組大鼠每天陰道灌注0.5ml/100g生理鹽水， 其余各給藥組每天陰道灌注相應藥物1次， 0.5ml/100g，連續7d。

（三）試驗觀察指標。（1） 一般狀態。試驗期間動態觀察各組大鼠精神狀態、活動、毛色、飲食、飲水、體重變化及大小便等有無改變。（2）外陰及陰道分泌物觀察。于給藥第0、5、8天觀察各組大鼠外陰紅腫及陰道分泌物情況。（3） 陰道灌洗液檢測。（a）鏡下觀察活動細菌量：各組大鼠均于給藥第0、5、8天用50ul

PBS灌洗陰道，置灌洗液于載玻片，即刻于40倍倒置顯微鏡下觀察活動細菌量。（b）鏡檢白細胞及陰道脫落細胞：各組大鼠均于給藥0、5、8天取PBS陰道灌洗液于載玻片上，40倍顯微鏡下鏡檢白細胞及陰道脫落上皮細胞。（c）G染色鏡檢細菌：分別于給藥0、5、8天取PBS陰道灌洗液涂片革蘭氏染色鏡檢。（4）陰道組織病理學檢查。于給藥8天陰道灌洗后，脫臼處死大鼠，隨機取6只大鼠陰道組織及其周圍組織作常規石蠟包埋，HE染色，鏡下觀察病理變化。

（四）統計分析方法。采用SPSS16.00統計軟件處理數據。計量資料以x±s表示。統計結果分別采用秩和檢驗和Ridit檢驗進行處理。

三、結果

（一）各組大鼠一般狀態。各組大鼠精神狀態、活動、毛色、飲食、飲水、體重變化及大小便均未見明顯改變，各組間無明顯差異。

（二）大鼠外陰肉眼觀察。正常對照組大鼠陰道外觀無充

血、紅腫，無膿性分泌物；模型對照組大鼠接種細菌第3天開始見陰道外觀充血、紅腫，隨時間逐漸加重，并有大量膿性分泌物。各治療組隨著給藥天數增加外陰紅腫明顯消失，分泌物明顯減少，給藥第8天多數大鼠陰道外觀于正常對照組大鼠相近。

（三）各組大鼠陰道灌洗液直接鏡檢混合菌量。給藥后第5、8天各組大鼠陰道灌洗液鏡檢。顯示：蕎麥黃酮復合物隨著劑量的增加及藥物應用的時間延長，細菌檢出量逐漸減少，細菌轉陰率增加，高劑量組作用更明顯，與陽性對照藥潔爾陰相近；而模型對照組組無轉陰。

（四）各組大鼠陰道灌洗液G染色鏡檢細菌量。給藥后第

5、8天各組大鼠陰道灌洗液涂片G染色鏡檢細菌。表明：蕎麥黃酮復合物隨著劑量的增加及藥物應用的時間延長，細菌檢出量逐漸減少，同時細菌轉陰率增加，高劑量組作用更明顯，與陽性對照藥潔爾陰相近；而模型對照組無轉陰。

（五）陰道灌洗液脫落上皮細胞檢查結果。給藥后第5、8天各組大鼠陰道灌洗液脫落上皮細胞直接鏡檢。結果：蕎麥黃酮復合物隨著劑量和應用時間的增加，脫落上皮細胞檢出率逐漸減少，高劑量作用更明顯，與潔爾陰相近。

（六）陰道組織病理檢查結果。模型對照組大鼠病理組織學觀察為中度和重度充血、水腫，有大量炎細胞浸潤。蕎麥黃酮復合物高劑量組大鼠病理組織學觀察為輕度充血、水腫，少量炎細胞浸潤，其治療效果與陽性對照藥物組潔爾陰洗液相近。

結論：蕎麥黃酮復合物對混合細菌感染所致大鼠陰道炎有一定的療效，中、高劑量作用與陽性對照藥物潔爾陰治療效果相近。

蕎麥花葉總黃酮是經過水加分離劑提取的蕎麥黃酮復合物的主要藥用成分，其來源于內蒙古庫倫旗無果的霜凍后蕎麥花、葉，來源豐富，經濟實惠，提取工藝簡單成熟，適合工業化生產，就有巨大的開發產業化的價值。

參考文獻：

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