蕎麥黃酮復合物對小鼠白念珠菌性陰道炎IGFBP7的影響

姜妍等

摘 要：目的——觀察蕎麥黃酮復合物對小鼠白色念珠菌性陰道炎IGFBP7的影響，評價蕎麥黃酮復合物的療效。方法——苯甲酸雌二醇刺激下構建小鼠白色念珠菌陰道炎模型，以蕎麥黃酮復合物為治療組，西藥氟康唑和中藥潔爾陰作為有效標準對照。以Western Blot 法檢測各組胰島素生長因子結合蛋白7（IGFBP7）含量。結果——與模型對照組比較蕎麥黃酮復合物，可以抑制IGFBP7的高表達，其高劑量組作用與中藥潔爾陰組相近似，并且呈一定的劑量依賴性。結論——蕎麥黃酮復合物對小鼠白色念珠菌性陰道炎IGFBP7蛋白的高表達具有抑制作用，具體機制有待進一步研究。

關鍵詞：蕎麥黃酮復合物 ；胰島素生長因子結合蛋白7（IGFBP7） ；白念珠菌性陰道炎；Western Blot法

1.材料

雌性SPF級昆明小鼠（北京華阜康生物科技股份有限公司）；唐山市開灤醫院檢驗科提供白色念珠菌臨床新分離菌株。蕎麥黃酮復合物：采用正交試驗法以水加分離劑（殼聚糖）提取蕎麥黃酮復合物（成熟技術），配伍葛根、天花粉、麥冬、玄參和麻仁的水提物制成；顯微鏡（常州銳品精密儀器有限公司）。

2.方法

（1）模型建立與分組。將75只昆明雌性小鼠隨機挑出15只做空白對照組。剩余60只隔日皮下注射苯甲酸雌二醇注射液0.1 ml·d-1 使小鼠處于假發情狀態，6天后將密度為2.5×106 cfu·mL-1的菌懸液20?L（即白色念珠菌孢子接種量為5×104cfu），灌注入小鼠陰道內。在接種白色念珠菌孢子后第2—5天對小鼠進行模型鑒定：兩次分別隨機挑選5只進行外陰情況觀察、鏡檢、處死后做陰道病理組織切片。結果發現外陰陰道腫脹并有膿性分泌物，鏡檢有大量孢子并有菌絲生成，觀察陰道病理組織切片有充血、紅腫即確定造模成功。造模成功后對60只小鼠進行隨機分組：模型對照組、西藥氟康唑組、中藥潔爾陰洗液對照組、蕎麥黃酮復合物高劑量組、蕎麥黃酮復合物中劑量組、蕎麥黃酮復合物低劑量組。

（2）指標檢測。頸椎脫臼處死小鼠后，取陰道黏膜，Western Blot檢測各組IGFBP7蛋白含量。

（3） 統計分析方法。計量資料表示，所有結果比較均采用SPSS16.0 軟件進行，計量資料數據采用方差分析。

3.結果

如表顯示，IGFBP7蛋白于正常對照組陰道黏膜有少量表達。模型組陰道黏膜IGFBP7蛋白含量明顯增高 （P<0.01）。中、西陽性藥物及蕎麥黃酮復合物高劑量組對IGFBP7蛋白的含量具有抑制作用。蕎麥黃酮復合物高劑量與中藥潔爾陰洗液對照組作用相近（P<0.01）。

4.討論

念珠菌性陰道炎是一種由念珠菌在陰道內過度繁殖引起的疾病。迄今為止，臨床對本病的治療重點還是西醫抗真菌藥物直接殺滅病原菌，如氟康唑、制霉菌素等。藥物的毒副作用和菌株的耐藥性成為一個潛在的問題。隨著對本病認識的深入以及醫學微生態學的研究，新的替代療法不斷出現：沖洗療法、乳酸桿菌、硼酸及大蒜素治療等。近年來，我國醫學不斷發展，許多學者應用念珠菌動物模型，對中藥制劑的安全性及有效性進行了研究。具有非常重要的社會意義、經濟效益和極大的開發應用前景。胰島素生長因子結合蛋白7（IGFBP7）是一種新發現的分泌蛋白，通過結合IGF-iv，進而對免疫起調控作用。本次在實驗研究上，主要進行了體外抑真菌實驗和構建白念珠菌陰道炎小鼠模型以了解藥物的療效，并探討上述問題。在以后的工作中，還可以篩選劑型穩定、效高、價廉、副作用少、順應性好的藥物進行廣泛多層次研究，更好服務于患者。

參考文獻：

[1]梁君兒，黎小斌，何成群.香荷藥條治療白念珠菌性陰道炎的實驗研究[J].實用醫學雜志，2000，16（12）：983—984.

[2]Wajapeyee.N，Serra.R.W，Zhu.X，eta.Oncogenic BRAF Induces Senescence and Apoptosis through Pathways Mediated by the Secreted Protein IGFBP7[J].Cell 2008，132（3）：363—374.

（作者單位：姜 妍 金 玲 王 妍河北聯合大學冀唐學院；高福佳 河北聯合大學公共衛生學院；韓淑英 河北聯合大學基礎醫學院）endprint