FISH檢測糾正核型分析18—三體誤報1例

李會平

(邢臺市人民醫院 檢驗二科，河北 邢臺054001)

1 臨床資料

患兒男，因出生后呼吸稍促2.5 h入院。患兒系第二胎第一產，足月兒，無誘因自然分娩，出生體重2 350 g。入院時查體：頭頂部突出，前囟平坦，張力不高，口周無發青，口唇無發紺，高顎弓，無鼻翼，耳位低，頸部粗短，吸氣性三凹征弱陽性，雙手通貫掌，雙手緊握，拇指內收，中指壓在食指上，足趾背曲，四肢肌張力低，原始反應弱。

2 外周血染色體分析

無菌抽取患兒外周血常規進行G顯帶染色體核型分析，發現一衍生染色體，疑似18號衍生染色體der(18)(Y；18)(q11；q23)，核型暫定為46，X，+18，der(18)(Y；18)(q11；q23)。具體核型如圖1。為查找該衍生染色體來源，建議患兒父母做染色體核型分析，父母雙方均拒絕檢測。為此對在染色體核型分析中留取的細胞懸液進行分子學水平18、X、Y染色體熒光原位雜交(FISH)檢測。檢測試劑采用北京金菩嘉醫療科技有限公司試劑盒，18號、X、Y染色體相應標記顏色為藍色、綠色、紅色，具體探針標記位置為：18號染色體(18p11.1-q11.1),X染色體(Xp11.1-q11.1),Y染色體(Yp11.1-q11.1)。FISH檢測結果如圖2。FISH結果顯示一個紅信號和一個綠色信號及兩個藍色信號，這三個不同顏色的信號分別是一個帶有著絲粒的Y染色體和X染色體及兩個均帶有著絲粒的18號染色體，說明該患兒染色體核型分析圖中的衍生染色體是Y染色體而不是18號染色體。按照原暫定核型46，X，+18，der(18)(Y；18)(q11；q23)，FISH結果應顯示三個藍色信號(即三個均含有著絲粒的18號染色體)和一個藍色信號，說明我們所暫定的染色體核型分析是錯誤的，具體核型應該是46，XY，add(Y)(q12)，即兩條正常的18號染色體、一條正常X染色體和一條未知來源附加物的Y染色體。

圖1(a) 圖1(b)

3 討論

18—三體綜合征是僅次于先天愚型的一種常見染色體三體綜合征，主要臨床表現為多發畸形，如早產，過期產，出生體重低，小于胎齡兒，頭顱小，眼裂小，耳位低，小下頜，顎弓高，胸廓畸形，先天性心臟病以及手足異常等，通常表現為手指緊握，拇指壓于食指，無名指和小指壓于中指，或者食指疊壓于中指上，小指壓于無名指上，患兒大多于生后數周死亡[1]。該患兒具有典型的18—三體臨床特征，并且其染色體核型中未知來源附加物的Y染色體酷似18號染色體q23位置附加外來物質，造成核型暫定為18三體的錯誤核型。后經分子學水平FISH檢測后證實原暫定核型錯誤，說明傳統的細胞遺傳學水平核型分析技術也有一定的瑕疵，并不能百分之百確認，對于復雜的、難于確認的染色體需和分子學水平的FISH檢測技術相互結合才能互補優缺、完成對染色體核型的準確分析。

染色體核型分析是傳統的染色體疾病診斷技術，既可檢測染色體數目異常，也可檢測染色體結構異常，是臨床篩查染色體疾病的傳統有效方法。然而因其受到細胞培養周期的限制，不利于快速診斷，且操作技術要求高，影響試驗因素多，有些染色體重排由于涉及的片斷太小或具有相似的帶型，一些微畸變、微缺失往往在常規染色體核型分析技術中不能夠檢出，造成診斷上的誤差。染色體熒光原位雜交(FISH)技術是近年發展的針對特定染色體進行數目結構異常診斷的一種新方法，用于染色體疾病診斷具有快速，特異，定位準確等優點，該技術能識別微小染色體易位、缺失，確定附加染色體、標記染色體、衍生染色體的組成和來源[2-3]，是常規染色體核型分析的有利補充。FISH技術用于染色體疾病診斷也有一定的局限性，因為它對診斷染色體疾病的可靠性在很大程度上依賴于探針的特異性，受特異性探針的制約僅能提供有限的染色體信息，即用一種探針只能檢測一種異常，不利于常規檢測。對懷疑存在多種異常染色體需采用多個探針進行檢測，造成成本增加，另外，FISH對相互易位等染色體結構異常檢出有一定困難，這是由于斷裂點的不可預見性很難制備適宜的探針，再次，目前用于染色體異常檢測的商品化FISH探針多數屬于著絲粒探針，該類探針不能對染色體結構進行檢測[4]，易造成染色體結構異常漏診。

該患者染色體核型分析暫定核型屬于誤報，經FISH糾正仍不能確定附加物質來源，是由于我實驗室FISH探針針對點位的局限性，僅憑一兩組探針無法完成對該Y染色體附加物的確認，該患者Y染色體上的附加物質來源進一步確認需對該患兒父母進行染色體核型分析。

總之，對于染色體核型分析復雜的，難于確定的染色體，應選擇FISH進一步檢測，可以防止錯報、漏報。二者有機結合將大大提高染色體疾病診斷的準確性及誤診率，為臨床提供更加準確可靠的診斷依據。

參考文獻：

[1]張美和.檢驗與臨床診斷兒科學分冊[M].第1版．北京：人民軍醫出版社，2006：87-88.

[2]肖云山，張靜引.熒光原位雜交檢測在產前診斷中的臨床價值[J].中國優生與遺傳雜志,2010,18(3)：57.

[3]王 華，林 梅.產前染色體疾病診斷方法的研究進展[J].中華婦幼臨床醫學雜志，2011，7(4)：366.

[4]宋蘭林,熊 麗,劉思平,等.FISH技術在快速診斷自然流產胚胎染色體數目異常中的應用[J].南方醫科大學學報,2011,31(9)：1605.