乙丙肝重疊感染者血清學(xué)及病毒學(xué)檢測(cè)結(jié)果分析

陳繼梅，丁雪芳，許葉虹

(蕪湖市第三人民醫(yī)院 檢驗(yàn)科，安徽 蕪湖241000)

我國(guó)是病毒性肝炎高流行地區(qū)，乙型肝炎病毒(HBV)和丙型肝炎病毒(HCV)是引起慢性肝炎的主要病因，同時(shí)由于HBV與HCV具有相同的傳播途徑，發(fā)生同時(shí)感染或在某一種感染的基礎(chǔ)上重疊另一種病毒感染的現(xiàn)象廣泛存在。隨著檢驗(yàn)水平的提高，乙丙肝重疊感染病例逐漸升高，此類感染對(duì)肝病的重癥化和治療困難化有著不可忽視的影響[1]。本研究對(duì)HBV和HCV重疊感染者病毒學(xué)及血清學(xué)指標(biāo)進(jìn)行分析，并以HBV、HCV單獨(dú)感染者為對(duì)照，旨在了解重疊感染患者血清學(xué)及病毒學(xué)指標(biāo)的特點(diǎn)。

1 材料與方法

1.1標(biāo)本來(lái)源所有病例均來(lái)自我院2008年6月-2013年4月間就診患者。HCV和HBV重疊感染者33例，男19例，女14例，年齡48.67±12.03；單純HBV感染者60例，男44例，女14例，年齡39.58±16.03；單純HCV感染者61例，男26例,女35例，年齡51.20±12.19。HBV單純感染的診斷，根據(jù)血清中檢測(cè)到HBsAg和(或)HBeAg和(或)HBVDNA，血清抗-HCV陰性；HCV單純感染的診斷，根據(jù)血清中檢測(cè)到HCVRNA和(或)抗-HCV抗體，血清乙肝標(biāo)志物均為陰性；HBV和HCV合并感染的診斷依據(jù)血清存在兩種病毒的標(biāo)志物，其中HBV血清標(biāo)志物(HBV-M)有一項(xiàng)/一項(xiàng)以上陽(yáng)性(排除單獨(dú)抗-HBs抗體病人)。診斷參照2000年中華醫(yī)學(xué)會(huì)修訂的病毒性肝炎防治方案的臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)[2]。

1．2試劑和方法

應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)研究對(duì)象HBV-M、抗-HCV抗體，試劑由上海科華生物有限公司出品，結(jié)果在MK3型酶標(biāo)儀上測(cè)定。實(shí)時(shí)熒光定量PCR法(FQ-PCR)檢測(cè)研究對(duì)象HBVDNA及HCVRNA，儀器為美國(guó)SLAN Real Time PCR Detection System 7300熒光定量檢測(cè)儀，試劑購(gòu)自上海科華生物有限公司，以病毒量≥1*103copies/ml為陽(yáng)性結(jié)果。

1．3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié)果

2.1乙丙肝重疊感染組病毒復(fù)制情況乙丙肝重疊感染組共33例,病例病毒復(fù)制情況如下：其中HBVDNA(-)/HCVRNA(-)共7例(21.21%)；HBVDNA(+)/HCVRNA(+)共5例(15.16%)；HBVDNA(+)/HCVRNA(-)共7例(21.21%)；HBVDNA(-)/HCVRNA(+)共14例(42.42%)。33病例中有HCVRNA復(fù)制病例為(14+5)/33(57.58%)，存在HBVDNA復(fù)制病例為(5+7)/33(36.36%)，經(jīng)卡方檢驗(yàn)χ2=2.98，P=0.084。重疊感染病例表現(xiàn)出4種病毒學(xué)模式，丙肝病毒復(fù)制多于乙肝病毒，但兩者并不存在顯著性差異。

2.2重疊感染組與單純乙肝感染組血清HBV-M比較

33例重疊感染者HBV-M中HBsAg、HBeAg陽(yáng)性率顯著低于單純HBV感染者，抗-HBs陽(yáng)性率顯著高于單純HBV感染者，抗-HBe、抗-HBc兩者不存在顯著性差異(見(jiàn)表1)。

表1 不同組別血清HBV-M比較(%)

2．3重疊感染者與單純乙肝感染組血清HBVDNA陽(yáng)性率及病毒載量比較

乙丙肝重疊感染組患者血清HBVDNA陽(yáng)性率顯著低于單純HBV感染組(χ2=8.88，P=0.003)，其陽(yáng)性患者病毒載量均值也顯著低于單純HBV感染組(t=5.06，P=0.001)(見(jiàn)表2)。

表2 不同組別患者HBVDNA陽(yáng)性率及病毒載量比較(%)

2.4重疊感染者與單純丙肝感染組血清HCVRNA陽(yáng)性率及病毒載量比較

乙丙肝重疊感染組HCVRNA陽(yáng)性率稍低于單純HCV感染組，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.427，P=0.514)，但重疊組病毒載量均值顯著低于單純性HCV感染組(t=2.16，P=0.035)(見(jiàn)表3)。

表3 不同組別患者HBVDNA陽(yáng)性率及病毒載量比較(%)

3 討論

乙丙肝重疊感染者可表現(xiàn)出多樣的病毒復(fù)制狀態(tài)，從我們調(diào)查中顯示，33例重疊感染患者表現(xiàn)出4種病毒學(xué)模式[3，4]，HBV/HCV均活躍5例(15.16%)，HBV/HCV均不活躍7例(21.21%)，HBV活躍/HCV不活躍7例(21.21%)，HCV活躍/HBV不活躍14例(42.42%)，與各研究資料[3，4]研究在病毒復(fù)制模式相同，構(gòu)成比不盡相同，主要是因?yàn)橹丿B患者病毒水平不是固定不變，近3成患者體內(nèi)的病毒學(xué)水平呈動(dòng)態(tài)變化，血清HBVDNA/HCVRNA水平在不同時(shí)間節(jié)點(diǎn)，高于或低于臨界值[3]，病患來(lái)源不同，檢測(cè)時(shí)間段都可能影響到各種模式構(gòu)成比，重疊感染者的病毒學(xué)譜非常復(fù)雜。鑒于此，我們建議對(duì)重疊感染者應(yīng)長(zhǎng)期動(dòng)態(tài)檢測(cè)血清HCVRNA/HBVDNA水平，以便準(zhǔn)確了解重疊患者血清中病毒水平。

近年的研究發(fā)現(xiàn)，乙丙肝重疊感染時(shí)，病毒之間存在相互干擾和抑制現(xiàn)象[5、6]，我們的調(diào)查顯示，乙丙肝重疊感染時(shí)，合并感染者HBsAg、HBeAg陽(yáng)性率顯著低于單純HBV感染組(P值分別為0.000、0.0281)，抗-HBs陽(yáng)性率顯著高于單純HBV感染者(P=0.001)，抗-HBe、抗-HBc兩者不存在顯著性差異(見(jiàn)表1)。同時(shí)重疊感染者血清病毒水平也與單純感染者有區(qū)別，重疊組HBVDNA陽(yáng)性率和HBVDNA載量水平明顯低于單純HBV感染組(見(jiàn)表2)。表明乙丙肝重疊患者HBV的復(fù)制能力減弱，影響HBsAg、HBeAg的表達(dá)，重疊感染者以表達(dá)抗-HBs、抗-HBe、抗-HBc為主，重疊感染后可表現(xiàn)多種血清學(xué)指標(biāo)譜，可能導(dǎo)致重疊感染者出現(xiàn)隱匿性HBV感染[7]。HCV對(duì)HBV抑制的機(jī)制不明，可能是HCV感染后誘導(dǎo)了IFN、IFN樣物質(zhì)或其他可溶性介質(zhì)的釋放，激活特定的細(xì)胞，下調(diào)HBV表達(dá)；也可能是機(jī)體細(xì)胞免疫應(yīng)答作用，即HCV促進(jìn)HBV誘導(dǎo)T細(xì)胞免疫反應(yīng)，從而抑制HBVDNA復(fù)制[8]，現(xiàn)階段多數(shù)學(xué)者支持HCV核心抗原可能在其中起著重要的調(diào)控作用[6，9]，Schuttler CG[9]等研究證實(shí)HCV通過(guò)其完整的核心蛋白抑制HBV增加子1和增強(qiáng)子2，直接抑制HBV轉(zhuǎn)錄，這種反式抑制作用可能在合并兩種病毒感染的患者中起到抑制HBV復(fù)制的作用，因此合并HCV感染的乙型肝炎患者有較低的HBVDNA水平[5]。

乙丙肝重疊組雖然在HCVRNA陽(yáng)性率上與單純HCV感染組上無(wú)差異，但在病毒水平上還是低于單純感染組(見(jiàn)表3)。提示，兩種病毒合并感染時(shí)，不但存在HCV抑制HBV復(fù)制與表達(dá)，同時(shí)，HBV也可以一定程度上抑制HCV復(fù)制[10]，抑制程度相對(duì)較輕，不足以使血清HCVRNA轉(zhuǎn)為陰性，僅僅降低了重疊組病毒復(fù)制水平。

總之，我們研究顯示,HBV/HCV重疊感染在病毒學(xué)上是相互干撓和抑制的,但與此相矛盾的是，重疊感染在組織學(xué)和臨床失代償程度上肝病表現(xiàn)的更為嚴(yán)重[11]。重疊感染的機(jī)制非常復(fù)雜和不明確，治療可能造成重疊患者病毒間相互作用及抑制的失衡，此消彼長(zhǎng)現(xiàn)象會(huì)發(fā)生[5]，對(duì)這類患者的診療是臨床醫(yī)生要面臨的挑戰(zhàn)。

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