電針五臟俞配合益髓通經方對EAN家兔神經電生理功能的影響

李樂文，王洪峰，于 磊，陳新華

(1.雙遼市中醫院，吉林 雙遼136400；2.長春中醫藥大學，吉林 長春130117)

實驗性自身免疫性神經炎(EAN)是急性格林-巴利綜合征(GBS)的經典動物模型，兩者在發病機制、臨床表現、神經電生理等方面極為相似。GBS屬于中醫學“痿證”范疇，中藥和針灸療法對GBS的具有良好的臨床療效[1-3]。本實驗通過觀察電針五臟俞配合益髓通經方對EAN家兔神經電生理功能的影響。

1 材料和方法

1.1 實驗動物

健康大耳白兔64只，雌雄不限，體重在2.0-2.5 kg之間，皮毛光滑潤澤，呼吸道通暢，足部皮膚紅潤，由長春生物制品研究所提供[許可證號SCXK-(吉)2003-0002]。自由給水和家兔飼料，實驗室溫度保持在17-24℃之間。

1.2 主要實驗試劑和儀器

益髓通經方(主要藥物為馬錢子和龜板膠，由長春中醫藥大學制劑實驗室提供)；完全弗氏佐劑(北京鼎國生物技術有限責任公司)；兔免疫球蛋白標準品(北京鼎國生物技術有限責任公司)；牛坐骨神經髓鞘堿性蛋白(MBP，由吉林大學酶工程實驗室提取)；五通道肌電圖誘發電位儀(英國Medelec Synergy)。

1.3 EAN動物模型建立方法

參照郭向東[4]方法建立國際公認的髓鞘堿性蛋白II(P2)免疫動物模型。取3 ml提取的牛坐骨神經髓鞘堿性蛋白(MBP)加上3 ml完全弗氏佐劑，經試管振蕩器搖勻，將兩者充分混合后多點注入兔背部皮下。第21 d加強免疫，以出現下述癥狀表現為造模成功：精神萎靡，活動減少，食欲減退，體重下降，尾部及足爪皮毛不潔，四肢無力，軟癱，以后肢為重，反射和應激機能減低。加強免疫后第2天開始實驗治療。

1.4 動物分組與給藥

64只家兔隨機分為空白組、模型組、免疫球蛋白組和針藥結合組，每組16只。除空白組外，其余三組均按造模方法制備EAN動物模型。空白組和模型組，不予任何治療，僅作同期對照觀察。免疫球蛋白組予以腹腔注射丙種球蛋白(IVIG)治療，每只家兔治療劑量為400 mg/kg/d，連續治療5 d。針藥結合組采用電針膀胱經五臟俞治療，其中心俞、肝俞、脾俞、肺俞四穴向內下方斜刺0.5-1 cm，腎俞向下斜刺0.5-1 cm，然后接電針疏密波，電壓2v，頻率2-30 Hz，15 min/次，1次/d，連續治療14 d；同時配合益髓通經方灌胃治療，10 ml/次，2次/d。各組分別于第7 d、14 d各半數動物評價1次。

1.5 評價指標及檢測方法

1.5.1 運動神經傳導速度測定 每只家兔取雙側坐骨神經進行測定，沿家兔坐骨神經走行路線備皮，在其臀橫紋處放置刺激電極，遠端肌腹與肌腱處放置記錄電極，給予電刺激，記錄時間。再向下移動刺激電極的位置，給予電刺激，記錄時間。用皮軟尺測量出兩次刺激電極的距離及潛伏期時間差，計算出家兔坐骨神經運動傳導速度。刺激電脈沖頻率為20 Hz，強度為10-20 V，波寬0.2 ms，掃描速度定為2 ms/cm。

1.5.2 坐骨神經F波檢測 將刺激電極置于坐骨神經近端某一端點，陰極置于遠端，以表面電極在相應支配肌肉處記錄。用刺激電極對坐骨神經施以超強刺激，引起一個大的順行傳導的復合肌肉動作電位為M波，在肌肉動作電位(M波)后又出現一個小的肌肉反應電位稱為F波，不隨刺激強度的增加而減小。本實驗通過檢測F波的出現頻率作為確認F波異常的指標，實驗中對各組家兔雙側坐骨神經分別施以20次超強刺激，檢測其F波出現頻率，以F波出現頻率低于刺激數的80%作為F波異常的判定標準[5]。

1.6 統計學處理

運動神經傳導速度及F波異常率檢測數據采用雙樣本t檢驗，檢驗水準為α=0.05。

2 結果

2.1 一般情況

實驗動物在免疫后第14天左右開始出現不同程度的EAN臨床癥狀，發病率達78%。其表現為精神萎靡，活動減少，食欲減退，體重下降，尾部及足爪部皮毛不潔，四肢無力，反射和應激機能減低，先出現雙后肢癱，繼而發展到四肢癱，約在免疫后第21天達到高峰。各組實驗動物在實驗治療后，至第1次評價(第7天)時，模型組死亡2只；至第2次評價(第14天)時模型組死亡4只。

2.2 坐骨神經運動傳導速度的測定結果

實驗結果顯示，在第7天時，模型組、免疫球蛋白組、針藥結合組與空白組比較，坐骨神經運動傳導速度明顯降低，具有極顯著性差異(P<0.01)；但免疫球蛋白組、針藥結合組與模型組比較，坐骨神經運動傳導速度顯著加快，具有極顯著性差異(P<0.01)。在第14天時，免疫球蛋白組、針藥結合組與模型組比較，具有極顯著性差異(P<0.01)；與第7天時比較，兩組家兔坐骨神經運動傳導速度均明顯加快，具有統計學意義(P<0.05)，但兩組間比較無統計學意義(P>0.05)，詳見表1。

表1 各組家兔坐骨神經運動傳導速度測定結果(m/s)

注：◇表示與空白組比較P<0.01；△表示與模型組比較P<0.01；□表示與第7 d比較P<0.05；▽表示與免疫球蛋白組比較P>0.05。

2.3 坐骨神經F波異常出現率的測定結果

實驗結果顯示，在第7天時，免疫球蛋白組、針藥結合組與模型組比較，坐骨神經F波異常出現率明顯降低，具有極顯著性差異(P<0.01)。在第14天時，免疫球蛋白組、針藥結合組與模型組比較，同樣具有極顯著性差異(P<0.01)；與第7天時比較，兩組家兔坐骨神經F波異常出現率明顯改善，具有統計學意義(P<0.05)，但兩組間比較無統計學意義(P>0.05)。詳見表2。

表2 各組家兔坐骨神經F波異常出現率測定結果(m/s)

注：△表示與模型組比較P<0.01；□表示與第7 d比較P<0.05；▽表示與免疫球蛋白組比較P>0.05

3 討論

GBS作為一種免疫介導的炎性脫髓鞘性多發性神經根疾病，神經電生理檢查在GBS診斷中有重要價值，GBS的神經肌電圖主要表現為神經傳導阻滯，神經傳導速度明顯減慢，不同程度的失神經改變等異常。江文等[6]對100例GBS病人神經電生理資料進行分析，發現原發性脫髓鞘型51例，原發性軸索型25例，神經失電位型8例，不明確型12例，正常型4例，表明GBS主要發病形式是原發性脫髓鞘型。李淮玉等[7]對GBS神經電生理改變特點進行了分析，約96%患者的神經電生理改變符合脫髓鞘損害，4%患者神經電生理改變為軸索損害型。

中醫學認為GBS的發病，因髓虛導致邪毒易襲，邪毒侵襲后又能導致氣滯血瘀，致使五臟陰陽失衡、腎精虧虛，加重髓虛，成為一個惡性循環。因此，五臟失衡、髓虛不足的表現存在于該病的全過程。在治療上，不僅要注意疏通經絡、導邪外出，更要注意調和五臟，益髓養精。五臟俞是五臟之氣輸注于背部的腧穴，具有反應五臟功能狀態、調節五臟氣血精微、治療五臟相關疾病的作用，電針膀胱經五臟俞可通調五臟氣機，恢復五臟正常功能。益髓通經方由龜板和馬錢子組成，兩者配伍，補中有通，相得益彰。其中，龜板為血肉有情之品，善滋腎損，腎為先天之本，腎中精氣是機體生命活動的根本，對機體各方面的生理活動起著重要的作用，既能發揮對臟腑組織的滋養、濡潤作用，又能對組織器官起到推動、溫煦作用，腎精得以充養，則氣血流暢，經絡暢通；馬錢子疏通經絡，促進氣血運行，既可促進毒邪的排出，又可使五臟功能和調，則腎精充盈，脊髓得養，兩藥共同針對痿病的發病機制而發揮治療作用。本研究表明，電針膀胱經五臟俞配合益髓通經方可以明顯提高EAN家兔坐骨神經運動傳導速度，降低F波異常出現率，充分證明該治療方法能有效恢復EAN家兔的神經傳導功能，對GBS等痿證具有良好的治療作用，在臨床中可采用該療法以提高GBS等痿證的治療水平。

參考文獻：

[1]劉寶芳.針刺為主治療格林-巴利綜合征20例[J].上海針灸雜志,2007,26(1):30.

[2]陳學農,周清毅,趙開祝,等.電針治療格林-巴利綜合征88例[J].上海針灸雜志,2003,22(6)：30.

[3]劉世瓊,駱文郁.針灸治療格林-巴利綜合征恢復期4例觀察[J].中醫函授通訊,1993,3：22.

[4]郭向東,許賢豪,林嘉友,等.P2蛋白及其合成肽與實驗性變態反應性神經炎的研究[J].中國神經免疫學和神經病學雜志,2003,10(1):25.

[5]湯曉芙.神經系統臨床電生理學(下)[M].北京:人民軍醫出版社,2002.

[6]江 文,徐 燕,吳保仁,等.吉蘭-巴雷綜合征病人100例電生理學分型分析[J].中華神經科雜志.2000,33(4):234.

[7]李淮玉.格林-巴利綜合征的臨床、電生理、病理對照研究[J].中風與神經疾病雜志,2002,19(4):230.