高爾基體糖蛋白73在58例肝癌患者診斷中的應用

王志茹　劉慶波　趙文靜

[摘要] 目的 探討GP73對原發性肝癌的診斷價值。方法 免疫組化法檢測肝癌組織、癌旁組織及正常肝臟組織中高爾基體糖蛋白73（golgiprotein-73，GP73）和甲胎蛋白（alpha-fetoprotein，AFP）的表達，ELISA法檢測肝癌患者血清GP73和AFP濃度。結果 GP73蛋白在肝癌組織強表達，癌旁組織細胞漿表達較弱，正常肝臟組織無表達，58例肝癌組織中GP73陽性為55例，AFP陽性為40例，兩者診斷肝癌的陽性率差異有統計學意義（P<0.05）；58例PHC患者GP73平均濃度為（238.1±121.6）ng/mL，42例GP73陽性，敏感性為72.4%；AFP平均濃度為（885.6±498.6） ng/mL，30例AFP陽性，敏感性為51.7%，GP73和AFP聯合檢測能將敏感性提高到85.9%（50/58）；PHC患者腫瘤大小之間、腫瘤個數之間血清GP73濃度無確切關系。結論 GP73是一個診斷PHC良好的血清標志物，其敏感性和特異性均較好，GP73和AFP聯合檢測可以提高早期肝癌的檢出率。

[關鍵詞] 高爾基體糖蛋白73；甲胎蛋白；原發性肝癌

[中圖分類號] R735.7 [文獻標識碼] B [文章編號] 2095-0616（2014）10-125-04

[Abstract] Objective To evaluate the diagnostic value of golgiprotein 73 for primary liver cancer. Methods The immunohistochemical method was used to detect the expression of golgiprotein 73（GP73） and alpha-fetoprotein（AFP） in liver cancer tissue， para-cancer tissue and normal liver tissue. The ELISA method was used to detect the serum GP73 and AFP concentrations in the patients with liver cancer. Results GP73 had strong expression in liver cancer tissue， weak expression in cytoplasma of para-cancer tissue and no expression in normal liver tissue. Of the 58 cases of liver cancer tissue， 55 cases were positive GP73 expression and 40 cases were positive AFP expression， with statistically significant difference in the positive rate of liver cancer diagnosis between the two indicators（P<0.05）； The average GP73 concentration of 58 PHC patients was （238.1±121.6）ng/mL， of which 42 patients had positive GP73 expression， with the sensibility of 72.4%； The average AFP concentration was （885.6±498.6）ng/mL， of which 30 patients had positive AFP expression， with the sensibility of 51.7%. Combined GP73 and AFP detection can increase the sensibility to 85.9%（50/58）. The serum GP73 concentrations between the PHC patients with different tumor sizes and tumor numbers did not have accurate relationship. Conclusion GP73 is a good serum marker for the diagnosis of PHC and it has good sensibility and specificity. Combined GP73 and AFP detection can improve the detection rate of early liver cancer.

[Key words] Golgiprotein 73；Alpha-fetoprotein；Primary liver cancer

原發性肝癌（primary hepatic cancer，PHC）是臨床上常見的惡性腫瘤。2011年《全球癌癥統計》顯示PHC的發病率居惡性腫瘤第5位，死亡率居第2位[1]。另有報道顯示我國為PHC高發區，發病人數和死亡人數約占全球總數的55%以上[2]。PHC具有起病隱匿、惡性度高、進展快、轉移早等臨床特點，多數患者在病程早期多無臨床癥狀，約70%～80%患者發現時已為腫瘤晚期，無法進行有效的根治治療，而且PHC患者術后復發率高，預后差，生存期短，因此肝癌的早期診斷尤為重要[3]。1.1 標本來源和處理

肝癌組組、癌旁組織取自2012年1～12月吉林肝膽病醫院收治的原發性肝癌手術切除的標本，其中男47例，女11例，年齡32～75歲，平均54歲，患者均經臨床、影像學診斷符合《內科學》第12版中原發性肝癌的診斷標準[4]，術前均未接受過任何抗腫瘤治療，術后病理證實為肝細胞癌。肝癌組織標本取自手術切除的無壞死癌組織，距癌組織標本取自大于2cm處無癌細胞浸潤的癌旁組織，采用10%中性福爾馬林固定，常規脫水，包埋，制備病理組織切片。

正常肝組織標本由同期住院的肝血管瘤患者活檢獲得，其中男12例，女8例，年齡21～36歲，平均26歲，均經病理證實。

52例對照組血清來自于吉林大學第一臨床醫院2012年7月收集的健康體檢者，其中男28例，女24例，年齡23～45歲。

1.2 試劑和方法

1.2.1 試劑 GP73蛋白雙抗體夾心ELISA檢測試劑盒和鼠抗人GP73蛋白單克隆抗體購自北京熱景生物技術有限公司；鼠抗人AFP單克隆抗體和SP染色試劑盒購自福州邁新生物技術開發有限公司；AFP電化學檢測試劑為Cobas601配套試劑盒，瑞士Roche公司。

1.2.2 肝癌組織、癌旁組織和正常肝組織GP73和AFP檢測

3 討論

目前PHC的診斷主要根據影像學、血清AFP濃度和病理學檢查。文獻報道PHC患者血清AFP檢測敏感度僅為40%～65%，特異性為76%～96%，在臨床上有近1/3的PHC患者血清AFP陰性[6]，因此尋找一種敏感性更高、特異性更強的肝癌血清標志物一直是研究的熱點。GP73是存在于高爾基體的一種跨膜蛋白，是新近發現的與肝癌關系密切的糖蛋白，大量研究表明GP73敏感度和特異度均超過AFP，GP73已成為新的早期診斷肝癌的標志物[7]。本研究首先采用免疫組化方法檢測肝癌組織、癌旁組織及正常肝組織中GP73和AFP的表達，研究結果顯示：正常肝臟組織中GP73和AFP為陰性，58例PHC患者肝癌組織和癌旁組織GP73陽性率分別為95.4%和89.1%，顯著高于AFP的陽性表達率（70.2%和51.8%）。實驗結果表明，對于PHC患者，GP73蛋白是一種有意義的組織病理標記蛋白，與文獻報道結果一致[8-10]。

本研究采用ELISA法檢測PHC患者血清GP73和AFP濃度，研究結果顯示GP73具有較好的敏感性和特異性，與本組病例中AFP檢測結果比較，GP73的敏感度高達72.4%，明顯高于AFP的敏感性。GP73和AFP聯合檢測可以將敏感性提高到85.9%，特異性仍可保持在87.1%這樣一個較高的水平，結果顯示GP73和AFP聯合檢測具有互補性，可以明顯提高早期肝癌的檢出率。為進一步確認血清GP73蛋白含量與PHC患者腫瘤大小、結節數量的相關性，我們對58例PHC患者進行了統計和觀察，研究結果表明血清GP73蛋白含量與PHC患者腫瘤大小、結節數量之間無確切關系，與其他學者研究結果一致[11-12]。

綜上所述，GP73是一個診斷PHC良好的血清標志物，其敏感性和特異性均較好。而且GP73和AFP聯合檢測可以提高早期肝癌的檢出率。

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（收稿日期：2014-03-19）