武莉芳，劉苑，楊海霞

臨床研究

妊娠高血壓疾病患者內皮功能及炎性因子的變化

武莉芳，劉苑，楊海霞

目的觀察妊娠高血壓疾病(HDP)患者內皮功能及炎性因子的變化。方法選擇妊娠高血壓疾病患者70例為HDP組，其中妊娠期高血壓亞組患者30例，輕度子癇前期亞組患者22例，重度子癇前期亞組患者18例，選擇同期待產的正常孕婦(健康對照組)30例。2組孕婦均檢測內皮素(ET)、一氧化氮(NO)、腫瘤壞死因子(TNF-α)、白細胞介素-6 (IL-6)及超敏C-反應蛋白(hs-CRP)，并進行組間和病例組內比較。結果HDP組ET、TNF-α、IL-6、hs-CRP水平明顯高于正常對照組， NO值明顯低于對照組，組間比較有顯著性差異(P<0.05)。HDP組各亞組患者 ET、TNF-α、IL-6、hs-CRP水平隨著妊娠高血壓病情的加重而逐步升高，且各亞組間比較有顯著性差異(P<0.05)；NO隨著妊娠高血壓病情的加重而逐步降低，且各亞組間比較有顯著性差異(P<0.05)。HDP組ET與TNF-α、IL-6、hs-CRP水平呈正相關(r=0.89，0.99，0.92，P<0.01)，與NO水平呈負相關(r=-0.64，P<0.01)。結論妊娠期孕婦定期監(jiān)測ET、NO、TNF-α、IL-6、hs-CRP，可早期發(fā)現(xiàn)、預測HDP的嚴重程度，對預防、治療及控制疾病的發(fā)展具有重要的臨床意義。

妊娠高血壓疾病；內皮素；一氧化氮；腫瘤壞死因子；白細胞介素-6 ；超敏C-反應蛋白

妊娠高血壓疾病(hypentensive disordens complicating pregnancy,HDP)是妊娠與血壓升高并存的一組疾病，其發(fā)生率約為5%～12%[1]。該組疾病嚴重影響母嬰健康，是孕產婦和圍產兒病死率升高的主要原因。本病的發(fā)病機制目前尚未完全闡明，但諸多專家認為，血管內皮損傷及血管舒縮因子異常是HDP的中心環(huán)節(jié)，而炎性因子的參與也是HDP發(fā)生發(fā)展的主要因素。本文旨在通過監(jiān)測孕婦晚期的內皮功能及炎性因子的改變，以期為HDP的早期治療及判定預后方面提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2011年5月—2013年10月于我院產科就診的妊娠期高血壓疾病患者70例作為HDP組，均符合HDP診斷標準[1]，其中妊娠期高血壓患者30例，年齡22～38(24.8±4.2)歲，平均孕期(37.0±1.2)周；輕度子癇前期亞組患者22例，年齡21～40(27.2±4.1)歲，平均孕期(36.9±1.4)周；重度子癇前期亞組患者18例，年齡22～41(26.9±4.5)歲，平均孕期(36.7±1.1)周。選擇同期待產的正常孕婦(健康對照組)30例，年齡21～36歲，平均(25.6±3.8)歲，平均孕(37.2±1.3)周。2組均為單胎，且無胎膜早破、前置胎盤、胎盤早剝等產科并發(fā)癥，無慢性高血壓、糖尿病、心臟病和肝腎病等內科合并癥病史。觀察組孕婦平均年齡、平均孕周與對照組比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具有可比性。入選者均知情同意并簽署知情同意書。

1.2 檢測指標與方法

1.2.1 ET、NO檢測 觀察組患者均于治療前抽取清晨空腹靜脈血2 ml，抗凝(EDTA二鈉)后3 000 rpm離心10 min，取上層血漿裝于Ep試管中，-70℃低溫冰箱保存，用酶聯(lián)免疫吸附試驗測定血漿ET值；用放射免疫法測定血清NO。試劑盒均由北京科美東雅生物技術有限公司提供，由專業(yè)人員嚴格按照操作程序進行操作。對照組孕婦ET、NO檢測方法與觀察組相同。

1.2.2 TNF-α、IL-6、hs-CRP檢測 (1)TNF-α、IL-6檢測：觀察組患者均于治療前抽取清晨空腹靜脈血2 ml注入普通試管中，血液凝固后3 000 rpm離心10 min，取上層血清裝于Ep試管中，-70℃低溫冰箱保存，用放射免疫法測定血清TNF-α、IL-6值。試劑盒均由北京科美東雅生物技術有限公司提供，由專業(yè)人員嚴格按照操作程序進行操作。(2)hs-CRP檢測：觀察組患者均于治療前取肘靜脈血3 ml送檢，采用免疫比濁法，儀器為日立7180全自動生化分析儀，試劑為南京澳林生物科技有限公司提供，由專業(yè)人員嚴格按照操作程序進行操作。對照組孕婦TNF-α、IL-6、hs-CRP檢測方法與觀察組相同。

2 結 果

2.1 HDP組與健康對照組ET、NO和TNF-α、IL-6、hs-CRP水平比較 HDP組ET、TNF-α、IL-6、hs-CRP水平明顯高于健康對照組，NO值明顯低于對照組，組間比較有顯著性差異(P<0.05)。見表1。

2.2 HDP組各亞組患者ET、NO和TNF-α、IL-6、hs-CRP水平比較 HDP組各亞組患者ET、TNF-α、IL-6、hs-CRP水平隨著妊娠高血壓病情的加重而逐步升高，且各亞組間比較有顯著性差異(P<0.05)；HDP組中各亞組患者NO隨著妊娠高血壓病情的加重而逐步降低，且各亞組間比較有顯著性差異(P<0.05)。見表2。

2.3 相關性分析 HDP組血清ET與TNF-α、IL-6、hs-CRP水平呈正相關(r=0.89、0.99、0.92、P<0.01)，與NO水平呈負相關(r=-0.64，P<0.01)。

3 討 論

HDP多在妊娠20周以后發(fā)病，臨床表現(xiàn)為高血壓、尿蛋白、水腫等，嚴重時可出現(xiàn)抽搐、昏迷等體征，甚至危及母嬰生命安全。其確切的病因目前仍未完全闡明，但基本病理生理改變?yōu)槿焉锲谌硇用}痙攣性收縮和繼發(fā)性損傷[2，3]。目前認為，孕婦的免疫功能、胎盤淺著床、血管內皮細胞損傷和胎盤、蛻膜血管網(wǎng)絡發(fā)育不良等因素均可能具有重要的作用。

內皮功能障礙主要是由于內皮的損傷和修復之間的動態(tài)平衡發(fā)生破壞。目前評價血管內皮功能主要方法主要通過檢測血清 ET、NO 等分子生物學方法。ET 是目前所知的由內皮細胞分泌的血管收縮作用最強的血管收縮肽，而NO 是血管內皮細胞分泌的最主要的內源性舒血管物質[4]。生理狀態(tài)下孕婦ET和NO的適量釋放對胎盤血液循環(huán)的調節(jié)起重要作用[5]。內皮細胞的功能完整與否，在一定程度上依賴ET與 NO 等血管活性物質的動態(tài)平衡，內皮細胞損傷可造成它們之間的平衡失調[6]。ET升高和NO產生減少，二者之間存在負反饋關系，在妊娠高血壓疾病發(fā)病機制中起重要作用。

TNF-α主要是由巨噬細胞產生的一種多肽因子，是參與多種生理和免疫過程中的重要介質。在人類子宮蛻膜和胎盤組織中存在大量的巨噬細胞，TNF-α對正常妊娠的維持和分娩的發(fā)動有一定作用。在正常情況下，TNF具有抗腫瘤、抗感染等重要作用，對機體有利。TNF-α主要是通過損傷血管內皮細胞參與HDP的發(fā)病[7]，高水平的TNF-α可通過與血管內皮細胞上的受體結合或直接激活蛋白酶、膠原酶、氧自由基等，引起血管內皮細胞損傷，血管活性物質分泌失調，動脈痙攣，從而導致HDP的發(fā)生或加重。IL-6是一種分子量為 21～26 kD的糖蛋白，它可由多種組織細胞產生，其生物學作用廣泛，可通過激活血小板促進血小板聚集，導致血管內皮細胞損害。研究表明，免疫失衡及血管內皮損傷是妊娠期高血壓疾病的重要環(huán)節(jié)[8]。患妊娠期高血壓疾病時由于單核細胞及淋巴細胞等被激活，IL-6 mRNA基因迅速開放，血清 IL-6 合成增加，并參與妊娠期高血壓疾病的發(fā)病過程[9]。國內研究[10～12]發(fā)現(xiàn)，妊娠期高血壓、輕度、重度子癇前期患者血清 IL-6水平明顯高于正常妊娠組，且隨著病情加重明顯升高，本研究也證實了這點。CRP在炎性反應中促進巨噬細胞吞噬細菌等，導致IL-6釋放，IL-6促進肝臟不斷產生一種非特異性的急性時相蛋白。正常人血清中CRP含量極少，但是在急性炎癥反應期、外傷、類風濕性關節(jié)炎等患者血清中含量可成倍增加，具有高敏感性和精確性，hs-CRP是參與炎性反應或急性時相反應的主要蛋白，當有炎性反應存在時，hs-CRP明顯升高。正常晚期妊娠的孕婦其CRP水平也高于懷孕初期的水平，呈現(xiàn)明顯的隨著孕周的增加CRP水平

表1 2組ET、NO和TNF-α、IL-6、hs-CRP水平比較

表2 HDP組各亞組ET、NO、TNF-α、IL-6、hs-CRP水平比較

不斷增加的狀態(tài)[13]。HDP患者較相同孕周正常妊娠者hs-CRP升高，其作用機制可能為各種原因導致炎性反應的過度激活，炎性介質、炎性細胞因子、氧化應激產物明顯增多，由于高濃度CRP參與炎性反應，損傷血管內皮細胞，使內膜增厚，血管阻力增加，血管的舒張功能降低，從而引起血壓升高。本研究發(fā)現(xiàn)ET、TNF-α、IL-6和hs-CRP在正常妊娠維持較低水平，而NO在正常妊娠維持較高水平，ET、TNF-α、IL-6和hs-CRP水平隨HDP的嚴重程度增加而逐漸升高，NO隨HDP的嚴重程度增加而逐漸降低，其中重度子癇前期組升高及降低最顯著。上述細胞因子通過損害血管內皮細胞，導致血管阻力增加，減低血管各方面功能，引發(fā)HDP，并隨著HDP病程進展，上述血管因子隨之上升或下降，表現(xiàn)出與疾病程度明顯的相關性和一致性。

本研究通過正常妊娠孕婦與HDP患者血清ET、NO、TNF-α、IL-6、hs-CRP的監(jiān)測，進一步證實HDP患者存在不同程度的血管內皮損傷，妊娠期孕婦定期監(jiān)測ET、NO、TNF-α、IL-6、hs-CRP，可早期發(fā)現(xiàn)、預測HDP的嚴重程度，對預防、治療及控制疾病的發(fā)展具有重要的臨床意義。

1 謝幸,茍文麗.婦產科學[M].8版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2013:64-81.

2 趙輝，周英杰，石彬.妊娠高血壓綜合征血清血管內皮生長因子與子宮螺旋動脈血流動力學參數(shù)的相關性[J].疑難病雜志,2014，(7)：749-751.

3 韓治偉，范書英，李菁，等.妊娠高血壓的治療進展[J].中國全科醫(yī)學，2012，15(26)：2978-2982.

4 李毅,秦儉.血管內皮功能的研究進展[J].檢驗醫(yī)學與臨床,2010,13(13):1391-1393.

5 文偉,王晨虹,李智泉,等.妊娠期高血壓疾病孕婦及其所分娩新生兒血內皮素-1和一氧化氮水平的變化[J].中國婦幼保健,2010,25(35):5182-5183.

6 夏紅衛(wèi),劉先知,趙寧,等.妊娠期高血壓疾病孕婦血內皮素、一氧化氮、腫瘤壞死因子水平變化及意義[J].實用婦產科雜志,2009,25(3):159-161.

7 王義,甄學慧,楊東梅,等.妊娠期高血壓疾病患者血清脂聯(lián)素和TNF-α的變化及意義[J].中國婦幼保健,2009,17(17):2345-2346.

8 Kocyigit Y,Atamer Y,Atamer A,et al.Changes in serum levels of leptin, cytokines and lipoprotein in pre-eclamptic and normotensive pregnant women[J].Gynecol Endocrinol,2004,19(5):267-273.

9 王景銀,辛兵,徐然,等.妊高征患者母血、臍血白細胞介素-6與腫瘤壞死因子的研究[J].中國醫(yī)科大學學報,2001,30(4):307-308.

10 孫敬霞,王澤華,盧實.妊娠期高血壓疾病腫瘤壞死因子-α及IL-6 IL-8在胎盤及血清中的表達及意義[J].中國實用婦科與產科雜志,2006,22(9):682-684.

11 劉萍,周曉梅,陳沛林.妊娠期高血壓疾病患者血清IL-2及IL-6水平及臨床意義[J].罕少疾病雜志,2007,14(3):35-37.

12 陳倩,傅曉冬,段成城.妊娠期高血壓疾病患者血清IL-2、IL-6和IL-10的變化與意義[J].中國婦幼保健,2010,25(3):400-402.

13 Deveci K,Sogut E,Evliyaoglu O,et al.Pregnancy-associated plasma protein-A and C-reactive protein levels in pre-eclamptic and normotensive pregnant women at third trimester[J].J Obstet Gynaecol,2009,35(1):94-98.

075100 張家口，河北北方學院附屬第二醫(yī)院檢驗科(武莉芳)，婦產科(劉苑、楊海霞)

10.3969 / j.issn.1671-6450.2014.09.029

2014-06-04)