云南某警犬基地犬弓形蟲和旋毛蟲血清學(xué)調(diào)查報告

曹景鋒，杜曉鵬，星 云，徐 陶，唐樹生

（公安部昆明警犬基地，云南 昆明 650204）

1 材料與方法

1.1 血清 2011年12月5～7日，分別采集79頭警犬血樣，3～5 mL/頭，帶回實(shí)驗(yàn)室，經(jīng)3000 r/min離心10 min，取上層血清，-20℃冷凍備用。

1.2 檢測試劑盒 犬弓形蟲IgG抗體酶免檢測試劑盒（ELISA），購自珠海經(jīng)濟(jì)特區(qū)海泰生物制藥有限公司；動物弓形蟲IHA試劑盒，購自江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院獸醫(yī)研究所；旋毛蟲病抗體快速檢測試劑條，購自河南百奧生物工程有限公司。

1.3 主要儀器 酶標(biāo)儀（Bio Tek Instrument Inc,Vermont,USA)、臺式離心機(jī)、移液器、37℃恒溫箱、微量振蕩器、110°醫(yī)用V型血凝板等。

1.4 方法

1.4.1 弓形蟲IgG抗體ELISA檢測 按照ELISA試劑盒說明書進(jìn)行操作，結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)如下.陽性：樣品OD值＞臨界對照OD均值×1.1;可疑：臨界對照OD值均值×0.9≦樣品OD值≦臨界對照OD均值×1.1;陰性：樣品OD值＜臨界對照OD值平均值×0.9。

1.4.2 弓形蟲間接血凝實(shí)驗(yàn)（IHA）檢測 按照弓形蟲間接血凝試劑盒說明書進(jìn)行操作，結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)如下。陽性血清對照效價應(yīng)≥1∶1024，凝集反應(yīng) ≥50%（++）;血清凝集價 ≥ 1∶64為陽性;血清凝集價≥1∶32為可疑;血清凝集價≤1∶16為陰性。

1.4.3 旋毛蟲檢測 按照旋毛蟲病快速檢測試劑條操作說明書操作，結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)如下。試劑條出現(xiàn)兩條棕色“││”線時，判為陽性。僅出現(xiàn)一條棕色“│”對照線，判為陰性。

2 結(jié)果與分析

2.1 弓形蟲抗體檢測結(jié)果 對79份血清進(jìn)行弓形蟲抗體檢測，用ELISA檢出陽性血清38份，陽性率為48.10%（38/79），可疑6份。IHA檢出陽性血清27份，陽性率為34.18%（27/79)，可疑7份。結(jié)果見表1。

表1 犬弓形蟲和旋毛蟲抗體檢測

上述兩種方法檢測，均為陽性有17份，陽性率為21.52%（27/79)，2份都檢為可疑。

ELISA方法檢測警犬血清弓形蟲抗體陽性率（48.10%）高于IHA（34.18%），但是兩者的差異不顯著（P＞0.05）。說明兩種方法均可行，不同檢測方法所獲得結(jié)果存在的差異在正常范圍之內(nèi)。

2.2 旋毛蟲抗體檢測結(jié)果 79份血清共檢出5份旋毛蟲抗體呈陽性，陽性率為6.33%（5/79），結(jié)果見表1。

2.3 結(jié)果分析 弓形蟲病為重要的人犬共患病，犬感染弓形蟲主要是因?yàn)槭秤昧宋粗笫斓暮泄蜗x包囊的肉，或是因誤食了終末宿主貓排出的感染性卵囊。犬感染弓形蟲后，可以傳播給人，主要通過兩種途徑，一是機(jī)械性的傳播，即犬將戶外的弓形蟲卵囊攜帶入室后被人食入；二是人食用了未煮熟的含有弓形蟲包囊的狗肉。警犬是重要的工作犬，獲悉其弓形蟲感染情況具有重要的意義，目前，尚未見警犬弓形蟲病流行情況報道，為此，開展了本試驗(yàn)調(diào)查，已為警犬弓形蟲病的防控奠定基礎(chǔ)。

本調(diào)查分別采用ELISA和IHA檢測犬血清弓形蟲抗體，陽性率較高，不管哪種方法檢測為陽性，都只能說明被檢犬只曾感染過弓形蟲，并在體內(nèi)產(chǎn)生了弓形蟲抗體，并不能說明抗體陽性犬體內(nèi)正帶蟲，是否正帶蟲，需要取其相應(yīng)的組織做進(jìn)一步檢測，而取警犬的內(nèi)臟組織可行性不大。介于抗體陽性率的存在，建議進(jìn)一步加強(qiáng)犬只弓形蟲病的防治。除了用藥物預(yù)防之外，特別注意在（野外）訓(xùn)練時，盡量避免其吞咬非專屬犬食，特別防止其接觸貓糞。同時，還需要采取有效措施，禁止野貓出入。犬感染旋毛蟲主要是因?yàn)槭橙肓撕行x包囊的生或半生的動物肉。籠養(yǎng)警犬的感染與戶主平時飼養(yǎng)有很大關(guān)系，喂食生的或未煮熟的含有旋毛蟲包囊的肉制品是犬主要的感染來源，通常應(yīng)提倡熟食飼喂，盡可能將旋毛蟲的感染幾率降到最低，防治該病在使用一些藥物的同時，還應(yīng)該保證警犬犬舍周圍的環(huán)境衛(wèi)生，可控制或消滅周圍環(huán)境的鼠類，避免犬?dāng)z食性嚙齒動物而感染。

2.3.1 犬弓形蟲血清抗體陽性率 對79份警犬血清進(jìn)行弓形蟲抗體檢測，用ELISA檢出陽性血清38份，可疑6份，陽性率為48.10%；IHA檢出陽性血清27份，可疑7份，陽性率為34.18%。79份血清中有17份兩種方法檢測都檢為陽性，2份都檢為可疑；有4份ELISA檢測為陽性的血清用IHA檢測為可疑；17份ELISA檢測為陽性而用IHA檢測為陰性；7份ELISA檢測為陰性而IHA檢測為陽性。

ELISA方法檢測警犬血清弓形蟲抗體陽性率（48.10%）高于IHA（34.18%），但是兩者的差異不顯著（P＞0.05）。

2.3.2 犬旋毛蟲抗體膠體快速檢測 79份血清共檢出5份旋毛蟲抗體呈陽性，陽性率為6.33%，見表1。

3 結(jié)論

該警犬基地犬弓形蟲感染率較高，ELISA和IHA檢測陽性率分別為48.10%和34.18%。說明警犬接觸到弓形蟲卵囊的幾率高，警犬感染的弓形蟲的風(fēng)險較高。兩種方法檢測的是警犬血清中弓形蟲抗體的水平，不管哪種方法檢測為陽性，都只能說明被檢犬只曾感染過弓形蟲，并在體內(nèi)產(chǎn)生了弓形蟲抗體，并不能說明抗體陽性犬現(xiàn)在體內(nèi)是否帶蟲，抗體陽性犬只帶蟲與否還需作進(jìn)一步調(diào)查。

ELISA方法的特異性和敏感性一般要高于IHA方法，鑒于兩種檢測方法檢出的結(jié)果，建議兩種方法檢測為陽性和可疑的犬都應(yīng)該引起犬主的重視，在不知是否帶蟲的情況下，可以選用一些抗弓形蟲藥物進(jìn)行防治，并且應(yīng)勤打掃犬舍，注意警犬生活環(huán)境衛(wèi)生，從多方面防犬弓形蟲病于未然。

犬等宿主因食入含有旋毛蟲包囊的生或半生的動物肉類而感染。本調(diào)查結(jié)果所檢測出的血清陽性，同樣說明警犬曾經(jīng)感染過或正帶蟲感染。防治該病在使用一些藥物的同時，還應(yīng)該保證警犬犬舍周圍的環(huán)境衛(wèi)生，可控制或消滅周圍環(huán)境的鼠類，并提倡熟食飼喂。

本次調(diào)查只是針對犬弓形蟲病和旋毛蟲病進(jìn)行了檢測，犬是否感染有其他寄生蟲等疾病，有待進(jìn)一步研究。