呼腸孤病毒與鏈球菌混合感染雛鴨的病理學研究

李美霞+楊軍+艾博+谷長勤+劉曉麗+張萬坡+程國富+胡薛英

摘要：以攜帶有鴨源呼腸孤病毒（ＤＲＶ）的７日齡雛鴨為試驗動物，人工感染解沒食子酸鏈球菌巴氏亞種（S. gallolyticus subsp. pasteurianus）ＡＬ１０１００２菌株，旨在建立混合感染的病理模型。采用病理學研究手段，觀察感染雛鴨的臨床癥狀、病理變化及組織學病理變化。研究結果表明，雛鴨于感染后１ ｄ出現死亡，感染后３ ｄ表現出典型臨床癥狀，死亡率為５０％；剖檢病理變化主要表現為脾臟表面灰白色壞死灶，質地堅實，心包膜炎和肝包膜炎，腦膜充血嚴重；組織學病理變化主要表現為脾組織壞死、包囊的形成、心肌炎、腦膜炎等。

關鍵詞：解沒食子酸鏈球菌巴氏亞種（Ｓ． ｇａｌｌｏｌｙｔｉｃｕｓ ｓｕｂｓｐ． ｐａｓｔｅｕｒｉａｎｕｓ）；鴨源呼腸孤病毒（ＤＲＶ）；混合感染；病理學研究

中圖分類號：Ｓ８５２．６５文獻標識碼：Ａ文章編號：０４３９－８１１４（２０１４）０８－1848－０３

Ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ Ｓｔｕｄies ｏｆ Ｄｕｃｋ Ｒｅｏｖｉｒｕｓ Ｃｏ－ｉｎｆｅｃｔed ｗｉｔｈ

Ｓ． ｇａｌｌｏｌｙｔｉｃｕｓ ｓｕｂｓｐ． pａｓｔｅｕｒｉａｎｕｓ

ＬＩ Ｍｅｉ－ｘｉａ，ＹＡＮＧ Ｊｕｎ，ＡＩ Ｂｏ，ＧＵ Ｃｈａｎｇ－ｑｉｎ，ＬＩＵ Ｘｉａｏ－ｌｉ，ＺＨＡＮＧ Ｗａｎ－ｐｏ，ＣＨＥＮＧ Ｇｕｏ－ｆｕ，ＨＵ Ｘｕｅ－ｙｉｎｇ

（Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ， Ｈｕａｚｈｏｎｇ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｗｕｈａｎ ４３００７０）

Ａｂｓｔｒａｃｔ： ７－ｄａｙ－ｏｌｄ ｄｕｃｋｌｉｎｇｓ ｗｉｔｈ ｄｕｃｋ ｒｅｏｖｉｒｕｓ（ＤＲＶ） ｗｅｒｅ ｉｎｆｅｃｔｅｄ ｗｉｔｈ Ｓ． ｇａｌｌｏｌｙｔｉｃｕｓ ｓｕｂｓｐ． ｐａｓｔｅｕｒｉａｎｕｓ（ＡＬ１０１００２） ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｉｔｓ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｓｙｍｐｔｏｍｓ， ａｎａｔｏｍｉｃａｌ ａｎｄ ｈｉｓｔｏｌｏｇｉｃａｌ ｐａｔｈｏｌｏｇｙ ｃｈａｎｇｅｓ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｄｅａｔｈ ｏｆ ｄｕｃｋｌｉｎｇｓ ｏｃｃｕｒｒｅｄ ａｔ １ ｄｐｉ ａｎｄ ｔｙｐｉｃａｌ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｓｙｍｐｔｏｍ ｃｏｕｌｄ ｂｅ ｏｂｓｅｒｖｅｄ ａｔ ３ ｄｐｉ with ｔｈｅ ｍｏｒｔａｌｉｔｙ of ５０％． Ｔｈｅ ａｎａｔｏｍｉｃａｌ ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎ ｓｈｏｗｅｄ ｈｏａｒｙ ｎｅｃｒｏｓｉｓ ｆｏｃｉ occurred ｉｎ ｔｈｅ ｓｐｌｅｅｎ ａｎｄ ｆｅｌｔ ｃｈａｒａｃｔｅｒ ｏｆ ｓｏｌｉｄ， ｐｅｒｉｃａｒｄｉｔｉｓ， ｐｅｒｏｈｅｐａｔｉｔｉｓ， ａｎｄ ｓｅｒｉｏｕｓｌｙ ｍｅｎｉｎｘ ｃｏｎｇｅｓｔｉｏｎ． Ｔｈｅ ｈｉｓｔｏｌｏｇｉｃａｌ ｐａｔｈｏｌｏｇｙ ｍａｉｎｌｙ ｐｒｅｓｅｎｔｅｄ ｔｈｅ ｎｅｃｒｏｓｉｓ ｏｆ ｓｐｌｅｅｎ ｗｉｔｈ ｃｙｓｔ， ｍｙｏｃａｒｄｉｔｉｓ ａｎｄ ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｓ．

Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： Ｓ． ｇａｌｌｏｌｌｙｔｉｃｕｓ ｓｕｂｓｐ． ｐａｓｔｅｕｒｉａｎｕｓ； ＤＲＶ； ｃｏ－ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ； ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｓｔｕｄｙ

解沒食子酸鏈球菌巴氏亞種（S. gallolyticus subsp. pasteurianus）又被稱為牛鏈球菌Ⅱ/2［1］，可以感染人也可以感染多種動物，感染人主要是引起新生兒的腦膜炎和菌血癥及成年人的腦膜炎［2-6］；感染動物如禽類，已報道的有鴿子、火雞、鵝、鴨，主要是引起多器官的損傷及敗血癥［7-10］。AL101002菌株是2010年華中農業大學動物醫學院獸醫病理實驗室從發病雛鴨的腦和脾分離并鑒定的一株高致病性菌株［10］。2006年以來湖北省周邊地區的部分鴨場相繼出現一種新的傳染性疾病，剖檢以肝臟和脾臟的壞死為主要特點，且該實驗室已從發病雛鴨的脾臟成功分離并鑒定了多株呼腸孤病毒［11］；與此同時北京市周邊地區多個鴨場也出現了一種新的傳染性疾病，2010年有學者首次從北京鴨壞死的脾臟分離并鑒定了一株高致病性呼腸孤病毒，命名為DRV-HC［12］。鑒于目前臨床鴨發病已不僅僅因某一種病毒或細菌感染發病，常常是混合感染，或是某種病原微生物感染之后的繼發感染。因此本研究建立了解沒食子酸鏈球菌巴氏亞種AL101002和鴨源呼腸孤病毒DRV的混合感染模型，以期為臨床發病雛鴨的診斷及確診提供可靠的理論依據。

1材料與方法

1.1試驗菌種及復蘇

解沒食子酸鏈球菌巴氏亞種AL101002由華中農業大學動物醫學院獸醫病理實驗室分離鑒定并保存［13］。取凍干菌種在無菌超凈臺里接種于TSA血清平板上，37 ℃恒溫培養24 h，從優勢菌落中挑取單菌落于10 mL TSB培養基中，37 ℃ 200 r/min振蕩培養12 h至菌液渾濁。

1.2試驗動物分組及處理

1日齡雛鴨15羽購于武漢市畜牧獸醫科學研究所，籠養自由采食和飲水，飼養至7日齡后采用頸部皮下接種TSB細菌培養液，0.2 mL/羽，對照組頸部皮下接種TSB培養基0.2 mL/羽。于感染后第5天剖殺3羽，感染后14 d所有雛鴨全部剖殺，處死方式采用頸靜脈放血處死。

1.3病毒學檢測

隨機取1日齡雛鴨5羽，頸靜脈放血處死，取脾臟做鴨源呼腸孤病毒的檢測。特異性引物參照楊旭［13］畢業論文，目的片段大小為282 bp。

1.4臨床癥狀觀察

觀察雛鴨的臨床癥狀，記錄雛鴨的食欲及精神狀態變化。

1.5剖檢病變觀察與細菌學檢查

觀察并記錄雛鴨的剖檢病理變化；感染5 d后取剖殺雛鴨的脾臟和心血在無菌條件下用TSA血清平板進行細菌分離，37 ℃恒溫培養16 h，觀察菌落形態，按照常規方法進行革蘭氏染色。

1.6組織學病理變化觀察

分別取心、肝、脾、肺、腎、胸腺、法氏囊、腦組織用10%的福爾馬林充分固定，常規石蠟切片，切片厚4 μm，HE染色，顯微鏡下觀察組織病理學變化。

2結果與分析

2.1病毒學檢測結果

鴨源呼腸孤病毒的PCR檢測結果均為陽性，說明此次購買的雛鴨本身攜帶有鴨源呼腸孤病毒。

2.2臨床癥狀

雛鴨于感染1 d后開始出現死亡，鴨群整體精神狀態很差，感染3 d后表現出典型的臨床癥狀：站立不穩、眼睛流淚、縮頸（圖1-A），瀕死鴨頭頸震顫，出現典型的神經癥狀。感染7 d后停止死亡，共死亡5羽，死亡率為50%。

2.3剖檢病變觀察

死亡雛鴨剖檢病變表現為：脾臟極度腫大，表面有灰白色的壞死灶，質地較硬（圖1-B），肝臟表面有細小的出血點（圖1-C），心包積液，心包膜增厚，肺和腎淤血，腦膜充血，胰腺出血，法氏囊萎縮。感染后5 d，隨機取3羽雛鴨，頸靜脈放血致死，剖檢病變可見心包積液、脾臟腫大，表面有小的白色壞死灶，質地堅實。耐過雛鴨剖檢可見心內膜出血，嚴重的纖維素性心包膜炎（圖1-D）。

2.4組織學病理變化觀察

脾臟組織結構消失，壞死包囊的形成（圖2-A）；肝細胞脂肪變性嚴重，肝血管單核細胞及肝竇內可見大量細菌團塊（圖2-B），肝細胞壞死；心肌纖維間有大量的炎性細胞浸潤；大腦可見腦膜炎、小膠質細胞結節、噬神經元現象（圖2-C）；小腦軟腦膜增厚，炎性細胞滲出，血管內可見細菌栓塞，浦肯野細胞嗜酸性增強（圖2-D）；肺淤血，大量炎性細胞浸潤，血管內可見細菌團塊；腎小球細菌栓塞，腎小管上皮細胞壞死，異嗜性粒細胞浸潤。

３討論

鴨源呼腸孤病毒主要引起雛鴨的肝脾壞死，進而引起免疫抑制，表現為對中樞免疫器官和外周免疫器官的直接損傷［１２，１４］，從而導致雛鴨機體的免疫力下降，但死亡率不高。解沒食子酸鏈球菌巴氏亞種主要引起雛鴨多臟器的炎癥和敗血癥［１０］，且死亡率較高。人工接種高毒力株解沒食子酸鏈球菌巴氏亞種ＡＬ１０１００２后，雛鴨的死亡率顯著升高，顯然當雛鴨的免疫器官受到損傷時，解沒食子酸鏈球菌巴氏亞種可以乘機侵入血液，導致多器官損傷及敗血癥，尤其是較單獨感染時腦組織的損傷更為嚴重。根據該實驗室之前對解沒食子酸鏈球菌巴氏亞的研究結果可知，其本身對免疫器官的損傷也比較嚴重，尤其是對脾臟和法氏囊的損傷，但筆者并沒有在腦血管周發現有細菌團塊及小腦浦肯野細胞的嗜酸性增強，因此，攜帶有鴨源呼腸孤病毒的雛鴨在感染解沒食子酸鏈球菌巴氏亞種后，更有助于細菌侵入機體，逃避宿主的免疫機制，近而在機體內大量增殖，對雛鴨各器官造成更加嚴重的病理損傷。

參考文獻：

［１］ ＰＯＹＡＲＴ Ｃ， ＱＵＥＳＮＥ Ｇ， ＰＡＴＲＩＣＫ Ｔ Ｃ． Ｔａｘｏｎｏｍｉｃ ｄｉｓｓｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｂｏｖｉｓ ｇｒｏｕｐ ｂｙ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｍａｎｇａｎｅｓｅ -ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ ｄｉｓｍｕｔａｓｅ ｇｅｎｅ （ｓｏｄＡ） ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ： ｒｅｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ‘Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｉｎｆａｎｔａｒｉｕｓ ｓｕｂｓｐ． ｃｏｌｉ ａｓ Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌｕｔｅｔｉｅｎｓｉｓ ｓｐ． ｎｏｖ． ａｎｄ Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｂｏｖｉｓ ｂｉｏｔｙｐｅ Ⅱ／２ ａｓ Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐａｓｔｅｕｒｉａｎｕｓ ｓｐ． ｎｏｖ［Ｊ］． Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Jｏｕｒｎａｌ ｏｆ Sｙｓｔｅｍａｔｉｃ ａｎｄ Eｖｏｌｕｔｉｏｎａｒｙ Mｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，２００２，５２（４）：１２４７－１２５５．

［２］ ＧＡＶＩＮ Ｐ Ｊ， ＴＨＯＭＳＯＮ Ｒ Ｂ， ＳＨＯＷ Ｎ Ｈ， ｅｔ ａｌ． Ｎｅｏｎａｔａｌ ｓｅｐｓｉｓ ｃａｕｓｅｄ ｂｙ Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｂｏｖｉｓ ｖａｒｉａｎｔ （Ｂｉｏｔｙｐｅ Ⅱ／２）： ｒｅｐｏｒｔ ｏｆ ａ ｃａｓｅ ａｎｄ ｒｅｖｉｅｗ ［Ｊ］． Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Cｌｉｎｉｃａｌ Mｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，２００３，４１（７）： ３４３３－３４３５．

［３］ ＯＮＯＹＡＭＡ Ｓ， ＯＧＡＴＡ Ｒ， ＷＡＤＡ Ｍ， ｅｔ ａｌ． Ｎｅｏｎａｔａｌ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｓ ｃａｕｓｅｄ ｂｙ Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｇａｌｌｏｌｙｔｉｃｕｓ ｓｕｂｓｐ． ｐａｓｔｅｕｒｉａｎｕｓ ［Ｊ］． Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ， ２００９， ５８（９）： １２５２－１２５４．

［４］ ＮＡＧＡＭＡＴＳＵ Ｍ， ＴＡＫＡＧＩ Ｔ， ＯＨＹＡＮＡＧＩ Ｔ， ｅｔ ａｌ． Ｎｅｏｎａｔａｌ ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｓ ｃａｕｓｅｄ ｂｙ Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｇａｌｌｏｌｙｔｉｃｕｓ ｓｕｂｓｐ． ｐａｓｔｅｕｒｉａｎｕｓ［Ｊ］． Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ，２０１２，１８（２）： ２６５－２６８．

［５］ ＫＬＡＴＴＥ Ｊ Ｍ， ＣＬＡＲＲＩＤＧＥ ＩＩＩ Ｊ Ｅ， ＢＲＡＴＣＨＥＲ Ｄ， ｅｔ ａｌ． Ａ ｌｏｎｇｉｔｕｄｉｎａｌ ｃａｓｅ ｓｅｒｉｅｓ ｄｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｏｆ ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｓ ｄｕｅ ｔｏ Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｇａｌｌｏｌｙｔｉｃｕｓ ｓｕｂｓｐ． ｐａｓｔｅｕｒｉａｎｕｓ ｉｎ ｉｎｆａｎｔｓ［Ｊ］． Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Cｌｉｎｉｃａｌ Mｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，２０１２，５０（１）：５７－６０．

［６］ ＳＴＵＲＴ Ａ Ｓ， ＹＡＮＧ Ｌ， ＳＡＮＤＨＵ Ｋ， ｅｔ ａｌ． Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｇａｌｌｏｌｙｔｉｃｕｓ ｓｕｂｓｐｅｃｉｅｓ ｐａｓｔｅｕｒｉａｎｕｓ （Ｂｉｏｔｙｐｅ Ⅱ／２）， ａ ｎｅｗｌｙ ｒｅｐｏｒｔｅｄ ｃａｕｓｅ ｏｆ ａｄｕｌｔ ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｓ ［Ｊ］． Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Cｌｉｎｉｃａｌ Mｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ， ２０１０， ４８（５）： ２２４７－２２４９．

［７］ ＤＥＶＲＩＥＳＥ Ｌ Ａ， ＵＹＴＴＥＢＲＯＥＫ Ｅ， ＧＥＶＡＥＲＴ Ｄ， ｅｔ ａｌ． Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｂｏｖｉｓ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ ｉｎ ｐｉｇｅｏｎｓ［Ｊ］． Ａｖｉａｎ Ｐａｔｈｏｌ， １９９０， １９（３）： ４２９－４３４．

［８］ ＤＲＯＵＡＬ Ｒ， ＧＨＡＺＩＫＨＡＮＩＡＮ Ｇ Ｙ， ＳＨＩＶＡＰＲＡＳＡＤ Ｈ Ｌ， ｅｔ ａｌ． Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｂｏｖｉｓ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｉｎ ｔｕｒｋｅｙ ｐｏｕｌｔｓ ［Ｊ］． Ａｖｉａｎ Ｐａｔｈｏｌ， １９９７， ２６（２）： ４３３－４３９．

［９］ ＢＡＲＮＥＴＴ Ｊ， ＡＩＮＳＷＯＲＴＨ Ｈ， ＢＯＯＮ Ｊ Ｄ， ｅｔ ａｌ． Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｇａｌｌｏｌｙｔｉｃｕｓ ｓｕｂｓｐ． ｐａｓｔｅｕｒｉａｎｕｓ ｓｅｐｔｉｃａｅｍｉａ ｉｎ ｇｏｓｌｉｎｇｓ ［Ｊ］． Ｔｈｅ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｊｏｕｒｎａｌ ， ２００８， １７６（２）： ２５１－２５３．

［１０］ ＬＩ Ｍ Ｘ， ＧＵ Ｃ Ｑ， ＺＨＡＮＧ Ｗ Ｐ， ｅｔ ａｌ． Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｇａｌｌｏｌｙｔｉｃｕｓ ｓｕｂｓｐ． ｐａｓｔｅｕｒｉａｎｕｓ ｃａｕｓｉｎｇ ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｓ ｉｎ ｄｕｃｋｌｉｎｇｓ ［Ｊ］． Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ， ２０１３， １６２（２－４）： ９３０－９３６．

［１１］ 張寶來．鴨源呼腸孤病毒的分離和鑒定［Ｄ］．武漢：華中農業大學，２００９．

［１２］ ＬＩＵ Ｑ Ｆ， ＺＨＡＮＧ Ｇ Ｚ， ＨＵＡＮＧ Ｙ， ｅｔ ａｌ． Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｒｅｏｖｉｒｕｓ ｃａｕｓｉｎｇ ｓｐｌｅｅｎ ｎｅｃｒｏｓｉｓ ｉｎ Ｐｅｋｉｎ ｄｕｃｋｌｉｎｇｓ ［Ｊ］． Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Mｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，２０１０，１４８（２）：２００－２０６．

［１３］ 楊旭．鴨源呼腸孤病毒熒光定量ＲＴ－ＰＣＲ方法的建立與應用［Ｄ］．武漢：華中農業大學，２０１１．

［１４］ 李爽．鴨源禽呼腸孤病毒感染雛鴨的免疫病理學研究［Ｄ］．武漢：華中農業大學，２０１０．

３討論

鴨源呼腸孤病毒主要引起雛鴨的肝脾壞死，進而引起免疫抑制，表現為對中樞免疫器官和外周免疫器官的直接損傷［１２，１４］，從而導致雛鴨機體的免疫力下降，但死亡率不高。解沒食子酸鏈球菌巴氏亞種主要引起雛鴨多臟器的炎癥和敗血癥［１０］，且死亡率較高。人工接種高毒力株解沒食子酸鏈球菌巴氏亞種ＡＬ１０１００２后，雛鴨的死亡率顯著升高，顯然當雛鴨的免疫器官受到損傷時，解沒食子酸鏈球菌巴氏亞種可以乘機侵入血液，導致多器官損傷及敗血癥，尤其是較單獨感染時腦組織的損傷更為嚴重。根據該實驗室之前對解沒食子酸鏈球菌巴氏亞的研究結果可知，其本身對免疫器官的損傷也比較嚴重，尤其是對脾臟和法氏囊的損傷，但筆者并沒有在腦血管周發現有細菌團塊及小腦浦肯野細胞的嗜酸性增強，因此，攜帶有鴨源呼腸孤病毒的雛鴨在感染解沒食子酸鏈球菌巴氏亞種后，更有助于細菌侵入機體，逃避宿主的免疫機制，近而在機體內大量增殖，對雛鴨各器官造成更加嚴重的病理損傷。

參考文獻：

［１］ ＰＯＹＡＲＴ Ｃ， ＱＵＥＳＮＥ Ｇ， ＰＡＴＲＩＣＫ Ｔ Ｃ． Ｔａｘｏｎｏｍｉｃ ｄｉｓｓｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｂｏｖｉｓ ｇｒｏｕｐ ｂｙ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｍａｎｇａｎｅｓｅ -ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ ｄｉｓｍｕｔａｓｅ ｇｅｎｅ （ｓｏｄＡ） ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ： ｒｅｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ‘Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｉｎｆａｎｔａｒｉｕｓ ｓｕｂｓｐ． ｃｏｌｉ ａｓ Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌｕｔｅｔｉｅｎｓｉｓ ｓｐ． ｎｏｖ． ａｎｄ Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｂｏｖｉｓ ｂｉｏｔｙｐｅ Ⅱ／２ ａｓ Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐａｓｔｅｕｒｉａｎｕｓ ｓｐ． ｎｏｖ［Ｊ］． Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Jｏｕｒｎａｌ ｏｆ Sｙｓｔｅｍａｔｉｃ ａｎｄ Eｖｏｌｕｔｉｏｎａｒｙ Mｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，２００２，５２（４）：１２４７－１２５５．

［２］ ＧＡＶＩＮ Ｐ Ｊ， ＴＨＯＭＳＯＮ Ｒ Ｂ， ＳＨＯＷ Ｎ Ｈ， ｅｔ ａｌ． Ｎｅｏｎａｔａｌ ｓｅｐｓｉｓ ｃａｕｓｅｄ ｂｙ Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｂｏｖｉｓ ｖａｒｉａｎｔ （Ｂｉｏｔｙｐｅ Ⅱ／２）： ｒｅｐｏｒｔ ｏｆ ａ ｃａｓｅ ａｎｄ ｒｅｖｉｅｗ ［Ｊ］． Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Cｌｉｎｉｃａｌ Mｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，２００３，４１（７）： ３４３３－３４３５．

［３］ ＯＮＯＹＡＭＡ Ｓ， ＯＧＡＴＡ Ｒ， ＷＡＤＡ Ｍ， ｅｔ ａｌ． Ｎｅｏｎａｔａｌ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｓ ｃａｕｓｅｄ ｂｙ Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｇａｌｌｏｌｙｔｉｃｕｓ ｓｕｂｓｐ． ｐａｓｔｅｕｒｉａｎｕｓ ［Ｊ］． Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ， ２００９， ５８（９）： １２５２－１２５４．

［４］ ＮＡＧＡＭＡＴＳＵ Ｍ， ＴＡＫＡＧＩ Ｔ， ＯＨＹＡＮＡＧＩ Ｔ， ｅｔ ａｌ． Ｎｅｏｎａｔａｌ ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｓ ｃａｕｓｅｄ ｂｙ Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｇａｌｌｏｌｙｔｉｃｕｓ ｓｕｂｓｐ． ｐａｓｔｅｕｒｉａｎｕｓ［Ｊ］． Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ，２０１２，１８（２）： ２６５－２６８．

［５］ ＫＬＡＴＴＥ Ｊ Ｍ， ＣＬＡＲＲＩＤＧＥ ＩＩＩ Ｊ Ｅ， ＢＲＡＴＣＨＥＲ Ｄ， ｅｔ ａｌ． Ａ ｌｏｎｇｉｔｕｄｉｎａｌ ｃａｓｅ ｓｅｒｉｅｓ ｄｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｏｆ ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｓ ｄｕｅ ｔｏ Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｇａｌｌｏｌｙｔｉｃｕｓ ｓｕｂｓｐ． ｐａｓｔｅｕｒｉａｎｕｓ ｉｎ ｉｎｆａｎｔｓ［Ｊ］． Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Cｌｉｎｉｃａｌ Mｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，２０１２，５０（１）：５７－６０．

［６］ ＳＴＵＲＴ Ａ Ｓ， ＹＡＮＧ Ｌ， ＳＡＮＤＨＵ Ｋ， ｅｔ ａｌ． Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｇａｌｌｏｌｙｔｉｃｕｓ ｓｕｂｓｐｅｃｉｅｓ ｐａｓｔｅｕｒｉａｎｕｓ （Ｂｉｏｔｙｐｅ Ⅱ／２）， ａ ｎｅｗｌｙ ｒｅｐｏｒｔｅｄ ｃａｕｓｅ ｏｆ ａｄｕｌｔ ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｓ ［Ｊ］． Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Cｌｉｎｉｃａｌ Mｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ， ２０１０， ４８（５）： ２２４７－２２４９．

［７］ ＤＥＶＲＩＥＳＥ Ｌ Ａ， ＵＹＴＴＥＢＲＯＥＫ Ｅ， ＧＥＶＡＥＲＴ Ｄ， ｅｔ ａｌ． Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｂｏｖｉｓ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ ｉｎ ｐｉｇｅｏｎｓ［Ｊ］． Ａｖｉａｎ Ｐａｔｈｏｌ， １９９０， １９（３）： ４２９－４３４．

［８］ ＤＲＯＵＡＬ Ｒ， ＧＨＡＺＩＫＨＡＮＩＡＮ Ｇ Ｙ， ＳＨＩＶＡＰＲＡＳＡＤ Ｈ Ｌ， ｅｔ ａｌ． Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｂｏｖｉｓ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｉｎ ｔｕｒｋｅｙ ｐｏｕｌｔｓ ［Ｊ］． Ａｖｉａｎ Ｐａｔｈｏｌ， １９９７， ２６（２）： ４３３－４３９．

［９］ ＢＡＲＮＥＴＴ Ｊ， ＡＩＮＳＷＯＲＴＨ Ｈ， ＢＯＯＮ Ｊ Ｄ， ｅｔ ａｌ． Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｇａｌｌｏｌｙｔｉｃｕｓ ｓｕｂｓｐ． ｐａｓｔｅｕｒｉａｎｕｓ ｓｅｐｔｉｃａｅｍｉａ ｉｎ ｇｏｓｌｉｎｇｓ ［Ｊ］． Ｔｈｅ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｊｏｕｒｎａｌ ， ２００８， １７６（２）： ２５１－２５３．

［１０］ ＬＩ Ｍ Ｘ， ＧＵ Ｃ Ｑ， ＺＨＡＮＧ Ｗ Ｐ， ｅｔ ａｌ． Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｇａｌｌｏｌｙｔｉｃｕｓ ｓｕｂｓｐ． ｐａｓｔｅｕｒｉａｎｕｓ ｃａｕｓｉｎｇ ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｓ ｉｎ ｄｕｃｋｌｉｎｇｓ ［Ｊ］． Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ， ２０１３， １６２（２－４）： ９３０－９３６．

［１１］ 張寶來．鴨源呼腸孤病毒的分離和鑒定［Ｄ］．武漢：華中農業大學，２００９．

［１２］ ＬＩＵ Ｑ Ｆ， ＺＨＡＮＧ Ｇ Ｚ， ＨＵＡＮＧ Ｙ， ｅｔ ａｌ． Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｒｅｏｖｉｒｕｓ ｃａｕｓｉｎｇ ｓｐｌｅｅｎ ｎｅｃｒｏｓｉｓ ｉｎ Ｐｅｋｉｎ ｄｕｃｋｌｉｎｇｓ ［Ｊ］． Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Mｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，２０１０，１４８（２）：２００－２０６．

［１３］ 楊旭．鴨源呼腸孤病毒熒光定量ＲＴ－ＰＣＲ方法的建立與應用［Ｄ］．武漢：華中農業大學，２０１１．

［１４］ 李爽．鴨源禽呼腸孤病毒感染雛鴨的免疫病理學研究［Ｄ］．武漢：華中農業大學，２０１０．

３討論

鴨源呼腸孤病毒主要引起雛鴨的肝脾壞死，進而引起免疫抑制，表現為對中樞免疫器官和外周免疫器官的直接損傷［１２，１４］，從而導致雛鴨機體的免疫力下降，但死亡率不高。解沒食子酸鏈球菌巴氏亞種主要引起雛鴨多臟器的炎癥和敗血癥［１０］，且死亡率較高。人工接種高毒力株解沒食子酸鏈球菌巴氏亞種ＡＬ１０１００２后，雛鴨的死亡率顯著升高，顯然當雛鴨的免疫器官受到損傷時，解沒食子酸鏈球菌巴氏亞種可以乘機侵入血液，導致多器官損傷及敗血癥，尤其是較單獨感染時腦組織的損傷更為嚴重。根據該實驗室之前對解沒食子酸鏈球菌巴氏亞的研究結果可知，其本身對免疫器官的損傷也比較嚴重，尤其是對脾臟和法氏囊的損傷，但筆者并沒有在腦血管周發現有細菌團塊及小腦浦肯野細胞的嗜酸性增強，因此，攜帶有鴨源呼腸孤病毒的雛鴨在感染解沒食子酸鏈球菌巴氏亞種后，更有助于細菌侵入機體，逃避宿主的免疫機制，近而在機體內大量增殖，對雛鴨各器官造成更加嚴重的病理損傷。

參考文獻：

［１］ ＰＯＹＡＲＴ Ｃ， ＱＵＥＳＮＥ Ｇ， ＰＡＴＲＩＣＫ Ｔ Ｃ． Ｔａｘｏｎｏｍｉｃ ｄｉｓｓｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｂｏｖｉｓ ｇｒｏｕｐ ｂｙ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｍａｎｇａｎｅｓｅ -ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ ｄｉｓｍｕｔａｓｅ ｇｅｎｅ （ｓｏｄＡ） ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ： ｒｅｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ‘Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｉｎｆａｎｔａｒｉｕｓ ｓｕｂｓｐ． ｃｏｌｉ ａｓ Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌｕｔｅｔｉｅｎｓｉｓ ｓｐ． ｎｏｖ． ａｎｄ Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｂｏｖｉｓ ｂｉｏｔｙｐｅ Ⅱ／２ ａｓ Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐａｓｔｅｕｒｉａｎｕｓ ｓｐ． ｎｏｖ［Ｊ］． Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Jｏｕｒｎａｌ ｏｆ Sｙｓｔｅｍａｔｉｃ ａｎｄ Eｖｏｌｕｔｉｏｎａｒｙ Mｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，２００２，５２（４）：１２４７－１２５５．

［２］ ＧＡＶＩＮ Ｐ Ｊ， ＴＨＯＭＳＯＮ Ｒ Ｂ， ＳＨＯＷ Ｎ Ｈ， ｅｔ ａｌ． Ｎｅｏｎａｔａｌ ｓｅｐｓｉｓ ｃａｕｓｅｄ ｂｙ Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｂｏｖｉｓ ｖａｒｉａｎｔ （Ｂｉｏｔｙｐｅ Ⅱ／２）： ｒｅｐｏｒｔ ｏｆ ａ ｃａｓｅ ａｎｄ ｒｅｖｉｅｗ ［Ｊ］． Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Cｌｉｎｉｃａｌ Mｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，２００３，４１（７）： ３４３３－３４３５．

［３］ ＯＮＯＹＡＭＡ Ｓ， ＯＧＡＴＡ Ｒ， ＷＡＤＡ Ｍ， ｅｔ ａｌ． Ｎｅｏｎａｔａｌ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｓ ｃａｕｓｅｄ ｂｙ Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｇａｌｌｏｌｙｔｉｃｕｓ ｓｕｂｓｐ． ｐａｓｔｅｕｒｉａｎｕｓ ［Ｊ］． Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ， ２００９， ５８（９）： １２５２－１２５４．

［４］ ＮＡＧＡＭＡＴＳＵ Ｍ， ＴＡＫＡＧＩ Ｔ， ＯＨＹＡＮＡＧＩ Ｔ， ｅｔ ａｌ． Ｎｅｏｎａｔａｌ ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｓ ｃａｕｓｅｄ ｂｙ Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｇａｌｌｏｌｙｔｉｃｕｓ ｓｕｂｓｐ． ｐａｓｔｅｕｒｉａｎｕｓ［Ｊ］． Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ，２０１２，１８（２）： ２６５－２６８．

［５］ ＫＬＡＴＴＥ Ｊ Ｍ， ＣＬＡＲＲＩＤＧＥ ＩＩＩ Ｊ Ｅ， ＢＲＡＴＣＨＥＲ Ｄ， ｅｔ ａｌ． Ａ ｌｏｎｇｉｔｕｄｉｎａｌ ｃａｓｅ ｓｅｒｉｅｓ ｄｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｏｆ ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｓ ｄｕｅ ｔｏ Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｇａｌｌｏｌｙｔｉｃｕｓ ｓｕｂｓｐ． ｐａｓｔｅｕｒｉａｎｕｓ ｉｎ ｉｎｆａｎｔｓ［Ｊ］． Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Cｌｉｎｉｃａｌ Mｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，２０１２，５０（１）：５７－６０．

［６］ ＳＴＵＲＴ Ａ Ｓ， ＹＡＮＧ Ｌ， ＳＡＮＤＨＵ Ｋ， ｅｔ ａｌ． Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｇａｌｌｏｌｙｔｉｃｕｓ ｓｕｂｓｐｅｃｉｅｓ ｐａｓｔｅｕｒｉａｎｕｓ （Ｂｉｏｔｙｐｅ Ⅱ／２）， ａ ｎｅｗｌｙ ｒｅｐｏｒｔｅｄ ｃａｕｓｅ ｏｆ ａｄｕｌｔ ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｓ ［Ｊ］． Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Cｌｉｎｉｃａｌ Mｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ， ２０１０， ４８（５）： ２２４７－２２４９．

［７］ ＤＥＶＲＩＥＳＥ Ｌ Ａ， ＵＹＴＴＥＢＲＯＥＫ Ｅ， ＧＥＶＡＥＲＴ Ｄ， ｅｔ ａｌ． Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｂｏｖｉｓ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ ｉｎ ｐｉｇｅｏｎｓ［Ｊ］． Ａｖｉａｎ Ｐａｔｈｏｌ， １９９０， １９（３）： ４２９－４３４．

［８］ ＤＲＯＵＡＬ Ｒ， ＧＨＡＺＩＫＨＡＮＩＡＮ Ｇ Ｙ， ＳＨＩＶＡＰＲＡＳＡＤ Ｈ Ｌ， ｅｔ ａｌ． Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｂｏｖｉｓ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｉｎ ｔｕｒｋｅｙ ｐｏｕｌｔｓ ［Ｊ］． Ａｖｉａｎ Ｐａｔｈｏｌ， １９９７， ２６（２）： ４３３－４３９．

［９］ ＢＡＲＮＥＴＴ Ｊ， ＡＩＮＳＷＯＲＴＨ Ｈ， ＢＯＯＮ Ｊ Ｄ， ｅｔ ａｌ． Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｇａｌｌｏｌｙｔｉｃｕｓ ｓｕｂｓｐ． ｐａｓｔｅｕｒｉａｎｕｓ ｓｅｐｔｉｃａｅｍｉａ ｉｎ ｇｏｓｌｉｎｇｓ ［Ｊ］． Ｔｈｅ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｊｏｕｒｎａｌ ， ２００８， １７６（２）： ２５１－２５３．

［１０］ ＬＩ Ｍ Ｘ， ＧＵ Ｃ Ｑ， ＺＨＡＮＧ Ｗ Ｐ， ｅｔ ａｌ． Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｇａｌｌｏｌｙｔｉｃｕｓ ｓｕｂｓｐ． ｐａｓｔｅｕｒｉａｎｕｓ ｃａｕｓｉｎｇ ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｓ ｉｎ ｄｕｃｋｌｉｎｇｓ ［Ｊ］． Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ， ２０１３， １６２（２－４）： ９３０－９３６．

［１１］ 張寶來．鴨源呼腸孤病毒的分離和鑒定［Ｄ］．武漢：華中農業大學，２００９．

［１２］ ＬＩＵ Ｑ Ｆ， ＺＨＡＮＧ Ｇ Ｚ， ＨＵＡＮＧ Ｙ， ｅｔ ａｌ． Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｒｅｏｖｉｒｕｓ ｃａｕｓｉｎｇ ｓｐｌｅｅｎ ｎｅｃｒｏｓｉｓ ｉｎ Ｐｅｋｉｎ ｄｕｃｋｌｉｎｇｓ ［Ｊ］． Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Mｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，２０１０，１４８（２）：２００－２０６．

［１３］ 楊旭．鴨源呼腸孤病毒熒光定量ＲＴ－ＰＣＲ方法的建立與應用［Ｄ］．武漢：華中農業大學，２０１１．

［１４］ 李爽．鴨源禽呼腸孤病毒感染雛鴨的免疫病理學研究［Ｄ］．武漢：華中農業大學，２０１０．