點地梅中總黃酮及總三萜含量的測定

摘要：分別以蘆丁及齊墩果酸為對照品，用超聲輔助提取、分光光度法測定了點地梅（Androsace umbellata）總黃酮及總三萜含量。結果表明，點地梅全草總黃酮及總三萜的相對含量分別為6.863%和8.832%， RSD分別為1.47%和1.02%；盧丁對照品在0.013 8~0.220 0 mg/mL范圍呈良好線性關系，回歸方程為y=10.27x+0.013 8，R2為0.999 9；齊墩果酸對照品在0~100 mg/mL范圍內呈良好線性關系，回歸方程為y=0.011 3x-0.017 7，R2為0.999 1。該法操作簡單、準確，相關結果可為點地梅的開發及利用提供參考依據。

關鍵詞：點地梅（Androsace umbellata）；總黃酮；總三萜；分光光度法

中圖分類號：TS201文獻標識碼：Ａ文章編號：0439－８114（２０14）08－1902-03

Determination of Total Flavonoids and Triterpenoid in Androsace umbellata

HE Ke-qun

（Chemistry and Environmental Science Department of Guizhou Minzu University， Guizhou 550025， Guiyang， China）

Abstract: The total flavonoids and total triterpenoid from Androsace umbellata were determined by spectrophotometry based on the standard curves of rutin and oleanolic acid. The results showed the percentage of total flavonoids and total triterpenoid in Androsace umbellata were 6.863% （RSD=1.47%） and 8.832% （RSD=1.02%）， respectively. There was a good linearity （R2= 0.999 9） in the range of 0.013 8~0.220 0 mg/mL for rutin with the regression equation of y=10.27x+0.013 8. When the similar linearity of oleanolic acid （R2=0.999 1） was in the range of 0~100 mg/mL （R2=0.999 1）， the regression equation was y=0.011 3x-0.017 7. This method is simple and reliable for detecting total flavonoids and total triterpenoid in Androsace umbellate. It will provides a reference for the exploitation and utilization of the Androsace umbellata.

Key words: Androsace umbellata; total flavonoids;total triterpenoid; spectrometry

點地梅（Androsace umbellata）是報春花科點地梅屬草本植物，又名天星草、頂珠草、佛頂珠、地胡椒、銅錢草、白花草、喉嚨草、百花珍珠草等，分布于我國東北、華北及秦嶺以南各省區［1，2］。點地梅以全草入藥，具有清熱解毒，消腫止痛功效；主要用于扁桃腺炎、咽喉炎、口腔炎、牙痛、急性結膜炎、跌打損傷等的治療［1，2］。根據文獻報道，點地梅含有黃酮、三萜皂苷、酚苷及揮發油等物質［2-7］。本試驗分析了點地梅全草總黃酮及總三萜含量，相關結果將為其開發和利用提供參考。

1材料與方法

1.1材料與試劑

點地梅全草，采自云南省云龍縣，標本保存于貴州民族大學化學與環境科學學院藥學教研室。

氫氧化鈉、亞硝酸鈉、硝酸鋁、無水乙醇、冰醋酸、香草醛、高氯酸均為分析純試劑，蘆丁（≥98%）及齊墩果酸（≥98%）對照品均購自貴州迪大科技有限責任公司。

1.2儀器

756PC型紫外-可見分光光度計（上海舜宇恒平科學儀器有限公司），METTLERAE240型電子分析天平（上海天平儀器廠），BGZ-30型電熱鼓風干燥箱（上海博迅實業有限公司醫療設備廠），SG3200HE型超聲清洗儀（上海冠特超聲儀器有限公司），數顯恒溫水浴鍋（常州博遠實驗分析儀器有限公司）

1.3方法

1.3.1點地梅供試液的提?。?］將自然晾干的點地梅于（60±1）℃烘干5 h，精確稱取干燥、粉碎（過40目篩）的點地梅粉末2.000 g，按1∶20的固液比（m/V）用無水乙醇，超聲提取2次，每次提取60 min，超聲頻率40 kHz，功率150 W，提取結束后，合并提取液，過濾冷卻，用無水乙醇定容至100 mL，搖勻備用。

1.3.2總黃酮的測定及重復性試驗總黃酮的測定及重復性試驗參照文獻［9］。

1.3.3總三萜標準溶液的制備及測定波長的選擇稱取65 ℃干燥至恒重的齊墩果酸20.00 mg，溶解后以無水乙醇定容至100 mL搖勻，配制200 mg/mL溶液；吸取齊墩果酸標準溶液和點地梅提取液各1.00 mL，分別置于2支10 mL比色管中，于85 ℃揮干溶劑，冷卻，加入5%（m/V）香草醛-冰醋酸0.500 mL，再分別加入高氯酸1.00 mL，搖勻，70 ℃水浴20 min，取出，在冰水浴中冷卻，用冰醋酸稀釋至刻度，搖勻，靜置5 min。以試劑空白建立基線，在400~700nm掃描波長，確定最大吸收波長［10-13］。

1.3.4齊墩果酸標準曲線的繪制吸取濃度200 mg/mL的齊墩果酸標準溶液0、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00 mL分別置于6支10 mL比色管中，以下操作同1.3.3“于85 ℃揮干溶劑”，以試劑空白為參比，于540 nm下測定吸光度，以吸光度為縱坐標，齊墩果酸質量濃度為橫坐標，繪制標準曲線［10-13］。

1.3.5樣品測定量取點地梅乙醇提取液1.00 mL于10 mL比色管中，以下操作同“1.3.3”，樣品液于540 nm波長下測得點地梅提取液的吸光度，代入回歸方程得點地梅的總三萜類化合物濃度，并計算干燥藥材中總三萜含量［10-13］。

1.3.6重復性試驗稱取點地梅樣品5份，按含量測定方法測定，計算平均含量。

1.3.7加標回收試驗量取點地梅提取液1.00 mL 3份，再分別精確加入齊墩果酸標準溶液（200 mg/mL）1.00 mL，測定后計算加標回收率。

2結果與分析

2.1總黃酮的測定結果

以吸光度為縱坐標，蘆丁質量濃度為橫坐標，繪制標準曲線（圖1），得方程y=10.27x+ 0.013 8，R2=0.999 9，結果表明，蘆丁在0.013 8~0.220 0 mg/mL范圍內吸光度與質量濃度呈良好線性關系。

在加顯色劑后，蘆丁標準溶液和點地梅樣品溶液顯色后在510 nm處均有較平緩的吸收峰，適于定量測定，故將測定波長選定為510 nm。5次測定的點地梅樣品中總黃酮含量為6.863%，RSD為1.47%，精密度高。

點地梅中總黃酮加標回收試驗結果見表1。由表1可知，總黃酮測定的平均加標回收率為95.1%，RSD為1.39%，表明該方法適用于點地梅樣品中總黃酮的測定。

2.2總三萜的測定結果

齊墩果酸及點地梅提取液顯色后在540 nm均有最大吸收，故以540 nm作為總三萜的測定波長。以吸光度為縱坐標，齊墩果酸質量濃度為橫坐標，繪制標準曲線（圖2），得方程y=0.011 3x-0.017 7，R2=0.999 1，齊墩果酸濃度在0~100 mg/mL范圍內吸光度與質量濃度線性關系良好。

5次測定的點地梅樣品中總三萜的平均含量為8.832%，RSD為1.02%，精密度較高。由表2可知，總三萜的平均加標回收率為92.6%，RSD為7.2%，表明該方法適用于點地梅樣品中總三萜含量的測定。

３小結

點地梅是我國西南地區少數民族的常用草藥，但迄今為止，其資源還未充分開發和利用。三萜酸類及黃酮類物質具有廣泛的生理活性，如抗腫瘤、抗菌、抗病毒、抗炎、降低膽固醇、降血糖［１４，１５］、強心、降血脂、抗氧化、提高免疫力等［１６］，分析藥用植物的總三萜酸及總黃酮含量將有助于深入開發相關藥用資源。本試驗分析了點地梅的總黃酮及總三萜含量，結果表明點地梅干燥全草總黃酮及總三萜含量分別為６．８６３％和８．８３２％，為其開發及利用提供科學參考。

參考文獻：

［１］ 云南省衛生廳．云南中草藥［Ｍ］．昆明：云南人民出版社，１９７１．

［２］ 左經會．六盤水藥用植物［Ｍ］．北京：科學出版社，２０１３．

［３］ ANＧ Ｙ，ＺＨＡＮＧ Ｄ Ｍ， ＹＥ Ｗ Ｃ， ｅｔ ａｌ． Ｔｒｉｔｅｒｐｅｎｏｉｄ ｓａｐｏｎｉｎｓ ｆｒｏｍ Ａｎｄｒｏｓａｃｅ ｕｍｂｅｌｌａｔａ ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ａｎｔｉ－ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｈｅｐａｔｏｍａ ｃｅｌｌｓ［Ｊ］． Ｐｌａｎｔａ Ｍｅｄ，２００８，７４（１０）：１２８０－１２８４．

［４］ ＹＩＮ Ｚ Ｑ， ＬＩ Ｃ Ｈ， ＷＡＮＧ Ｙ， ｅｔ ａｌ． Ｔｗｏ ｎｅｗ ｐｈｅｎｏｌｉｃ ｇｌｙｃｏｓｉｄｅｓ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ａｅｒｉａｌ ｐａｒｔｓ ｏｆ Ａｎｄｒｏｓａｃｅ ｕｍｂｅｌｌａｔｅ［Ｊ］． Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｌｅｔｔｅｒｓ， 2００９，２０（７）：８３６－８３８．

［５］ 王文靜，雷軍，肖云川，等．點地梅中雙黃酮類化學成分的分離和鑒定［Ｊ］．華西藥學雜志，２０１１，２６（５）：４２０－４２３．

［６］ 雷軍，肖云川，王文靜，等．點地梅中的黃酮苷成分［Ｊ］．中國中藥雜志，２０１１，３６（１７）：２３５３－２３５７．

［７］ 黃先麗，王曉靜，賈獻慧．點地梅的揮發油成分分析［Ｊ］．食品與藥品，２００９，１１（３）：３２－３４．

［８］ 蔡亞玲，阮金蘭，蘇群，等．紫背鼠尾草中總三萜酸的含量測定［Ｊ］．中藥材，２００８，３１（５）：６９２－６９３．

［９］ 何可群，盧文蕓，李相興．貴州鼠尾草的總黃酮含量測定［Ｊ］．貴州農業科學，２０１３，４１（１）：７７－７９．

［１０］ 劉玉明，柴逸峰，婁子洋，等．分光光度法測定藍桉果實總三萜酸［Ｊ］．中國醫院藥學雜志，２００５，２５（１）：４－６．

［１１］ 袁媛，楊毅，開桂青，等．靈芝三萜提取工藝研究［Ｊ］．安徽化工，２００７，３３（４）：２７－２９．

［１２］ 張雁冰，王克讓，劉宏民．馬桑葉中總三萜酸的含量測定［Ｊ］．時珍國醫國藥，２００６，１７（４）：５２９－５３０．

［１３］ 易中宏，鄭一敏，胥秀英，等．分光光度法測定茯苓中總三萜類成分的含量［Ｊ］．時珍國醫國藥，２００５，１６（４）：８４７－８４８．

［１４］ 姚新生，吳立軍．天然藥物化學［Ｍ］．北京：人民衛生出版社，２００３.３０６．

［１５］ 譚世強，謝敬宇，郭帥，等．三萜類物質的生理活性研究進展［Ｊ］．２０１２，２８（３６）：２３－２７．

［１６］ 韓公羽，沈企華，韓紹雯．植物藥黃酮成分與生理生化活性［Ｍ］．北京：中國書籍出版社，２０１０．

在加顯色劑后，蘆丁標準溶液和點地梅樣品溶液顯色后在510 nm處均有較平緩的吸收峰，適于定量測定，故將測定波長選定為510 nm。5次測定的點地梅樣品中總黃酮含量為6.863%，RSD為1.47%，精密度高。

點地梅中總黃酮加標回收試驗結果見表1。由表1可知，總黃酮測定的平均加標回收率為95.1%，RSD為1.39%，表明該方法適用于點地梅樣品中總黃酮的測定。

2.2總三萜的測定結果

齊墩果酸及點地梅提取液顯色后在540 nm均有最大吸收，故以540 nm作為總三萜的測定波長。以吸光度為縱坐標，齊墩果酸質量濃度為橫坐標，繪制標準曲線（圖2），得方程y=0.011 3x-0.017 7，R2=0.999 1，齊墩果酸濃度在0~100 mg/mL范圍內吸光度與質量濃度線性關系良好。

5次測定的點地梅樣品中總三萜的平均含量為8.832%，RSD為1.02%，精密度較高。由表2可知，總三萜的平均加標回收率為92.6%，RSD為7.2%，表明該方法適用于點地梅樣品中總三萜含量的測定。

３小結

點地梅是我國西南地區少數民族的常用草藥，但迄今為止，其資源還未充分開發和利用。三萜酸類及黃酮類物質具有廣泛的生理活性，如抗腫瘤、抗菌、抗病毒、抗炎、降低膽固醇、降血糖［１４，１５］、強心、降血脂、抗氧化、提高免疫力等［１６］，分析藥用植物的總三萜酸及總黃酮含量將有助于深入開發相關藥用資源。本試驗分析了點地梅的總黃酮及總三萜含量，結果表明點地梅干燥全草總黃酮及總三萜含量分別為６．８６３％和８．８３２％，為其開發及利用提供科學參考。

參考文獻：

［１］ 云南省衛生廳．云南中草藥［Ｍ］．昆明：云南人民出版社，１９７１．

［２］ 左經會．六盤水藥用植物［Ｍ］．北京：科學出版社，２０１３．

［３］ ANＧ Ｙ，ＺＨＡＮＧ Ｄ Ｍ， ＹＥ Ｗ Ｃ， ｅｔ ａｌ． Ｔｒｉｔｅｒｐｅｎｏｉｄ ｓａｐｏｎｉｎｓ ｆｒｏｍ Ａｎｄｒｏｓａｃｅ ｕｍｂｅｌｌａｔａ ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ａｎｔｉ－ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｈｅｐａｔｏｍａ ｃｅｌｌｓ［Ｊ］． Ｐｌａｎｔａ Ｍｅｄ，２００８，７４（１０）：１２８０－１２８４．

［４］ ＹＩＮ Ｚ Ｑ， ＬＩ Ｃ Ｈ， ＷＡＮＧ Ｙ， ｅｔ ａｌ． Ｔｗｏ ｎｅｗ ｐｈｅｎｏｌｉｃ ｇｌｙｃｏｓｉｄｅｓ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ａｅｒｉａｌ ｐａｒｔｓ ｏｆ Ａｎｄｒｏｓａｃｅ ｕｍｂｅｌｌａｔｅ［Ｊ］． Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｌｅｔｔｅｒｓ， 2００９，２０（７）：８３６－８３８．

［５］ 王文靜，雷軍，肖云川，等．點地梅中雙黃酮類化學成分的分離和鑒定［Ｊ］．華西藥學雜志，２０１１，２６（５）：４２０－４２３．

［６］ 雷軍，肖云川，王文靜，等．點地梅中的黃酮苷成分［Ｊ］．中國中藥雜志，２０１１，３６（１７）：２３５３－２３５７．

［７］ 黃先麗，王曉靜，賈獻慧．點地梅的揮發油成分分析［Ｊ］．食品與藥品，２００９，１１（３）：３２－３４．

［８］ 蔡亞玲，阮金蘭，蘇群，等．紫背鼠尾草中總三萜酸的含量測定［Ｊ］．中藥材，２００８，３１（５）：６９２－６９３．

［９］ 何可群，盧文蕓，李相興．貴州鼠尾草的總黃酮含量測定［Ｊ］．貴州農業科學，２０１３，４１（１）：７７－７９．

［１０］ 劉玉明，柴逸峰，婁子洋，等．分光光度法測定藍桉果實總三萜酸［Ｊ］．中國醫院藥學雜志，２００５，２５（１）：４－６．

［１１］ 袁媛，楊毅，開桂青，等．靈芝三萜提取工藝研究［Ｊ］．安徽化工，２００７，３３（４）：２７－２９．

［１２］ 張雁冰，王克讓，劉宏民．馬桑葉中總三萜酸的含量測定［Ｊ］．時珍國醫國藥，２００６，１７（４）：５２９－５３０．

［１３］ 易中宏，鄭一敏，胥秀英，等．分光光度法測定茯苓中總三萜類成分的含量［Ｊ］．時珍國醫國藥，２００５，１６（４）：８４７－８４８．

［１４］ 姚新生，吳立軍．天然藥物化學［Ｍ］．北京：人民衛生出版社，２００３.３０６．

［１５］ 譚世強，謝敬宇，郭帥，等．三萜類物質的生理活性研究進展［Ｊ］．２０１２，２８（３６）：２３－２７．

［１６］ 韓公羽，沈企華，韓紹雯．植物藥黃酮成分與生理生化活性［Ｍ］．北京：中國書籍出版社，２０１０．

在加顯色劑后，蘆丁標準溶液和點地梅樣品溶液顯色后在510 nm處均有較平緩的吸收峰，適于定量測定，故將測定波長選定為510 nm。5次測定的點地梅樣品中總黃酮含量為6.863%，RSD為1.47%，精密度高。

點地梅中總黃酮加標回收試驗結果見表1。由表1可知，總黃酮測定的平均加標回收率為95.1%，RSD為1.39%，表明該方法適用于點地梅樣品中總黃酮的測定。

2.2總三萜的測定結果

齊墩果酸及點地梅提取液顯色后在540 nm均有最大吸收，故以540 nm作為總三萜的測定波長。以吸光度為縱坐標，齊墩果酸質量濃度為橫坐標，繪制標準曲線（圖2），得方程y=0.011 3x-0.017 7，R2=0.999 1，齊墩果酸濃度在0~100 mg/mL范圍內吸光度與質量濃度線性關系良好。

5次測定的點地梅樣品中總三萜的平均含量為8.832%，RSD為1.02%，精密度較高。由表2可知，總三萜的平均加標回收率為92.6%，RSD為7.2%，表明該方法適用于點地梅樣品中總三萜含量的測定。

３小結

點地梅是我國西南地區少數民族的常用草藥，但迄今為止，其資源還未充分開發和利用。三萜酸類及黃酮類物質具有廣泛的生理活性，如抗腫瘤、抗菌、抗病毒、抗炎、降低膽固醇、降血糖［１４，１５］、強心、降血脂、抗氧化、提高免疫力等［１６］，分析藥用植物的總三萜酸及總黃酮含量將有助于深入開發相關藥用資源。本試驗分析了點地梅的總黃酮及總三萜含量，結果表明點地梅干燥全草總黃酮及總三萜含量分別為６．８６３％和８．８３２％，為其開發及利用提供科學參考。

參考文獻：

［１］ 云南省衛生廳．云南中草藥［Ｍ］．昆明：云南人民出版社，１９７１．

［２］ 左經會．六盤水藥用植物［Ｍ］．北京：科學出版社，２０１３．

［３］ ANＧ Ｙ，ＺＨＡＮＧ Ｄ Ｍ， ＹＥ Ｗ Ｃ， ｅｔ ａｌ． Ｔｒｉｔｅｒｐｅｎｏｉｄ ｓａｐｏｎｉｎｓ ｆｒｏｍ Ａｎｄｒｏｓａｃｅ ｕｍｂｅｌｌａｔａ ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ａｎｔｉ－ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｈｅｐａｔｏｍａ ｃｅｌｌｓ［Ｊ］． Ｐｌａｎｔａ Ｍｅｄ，２００８，７４（１０）：１２８０－１２８４．

［４］ ＹＩＮ Ｚ Ｑ， ＬＩ Ｃ Ｈ， ＷＡＮＧ Ｙ， ｅｔ ａｌ． Ｔｗｏ ｎｅｗ ｐｈｅｎｏｌｉｃ ｇｌｙｃｏｓｉｄｅｓ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ａｅｒｉａｌ ｐａｒｔｓ ｏｆ Ａｎｄｒｏｓａｃｅ ｕｍｂｅｌｌａｔｅ［Ｊ］． Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｌｅｔｔｅｒｓ， 2００９，２０（７）：８３６－８３８．

［５］ 王文靜，雷軍，肖云川，等．點地梅中雙黃酮類化學成分的分離和鑒定［Ｊ］．華西藥學雜志，２０１１，２６（５）：４２０－４２３．

［６］ 雷軍，肖云川，王文靜，等．點地梅中的黃酮苷成分［Ｊ］．中國中藥雜志，２０１１，３６（１７）：２３５３－２３５７．

［７］ 黃先麗，王曉靜，賈獻慧．點地梅的揮發油成分分析［Ｊ］．食品與藥品，２００９，１１（３）：３２－３４．

［８］ 蔡亞玲，阮金蘭，蘇群，等．紫背鼠尾草中總三萜酸的含量測定［Ｊ］．中藥材，２００８，３１（５）：６９２－６９３．

［９］ 何可群，盧文蕓，李相興．貴州鼠尾草的總黃酮含量測定［Ｊ］．貴州農業科學，２０１３，４１（１）：７７－７９．

［１０］ 劉玉明，柴逸峰，婁子洋，等．分光光度法測定藍桉果實總三萜酸［Ｊ］．中國醫院藥學雜志，２００５，２５（１）：４－６．

［１１］ 袁媛，楊毅，開桂青，等．靈芝三萜提取工藝研究［Ｊ］．安徽化工，２００７，３３（４）：２７－２９．

［１２］ 張雁冰，王克讓，劉宏民．馬桑葉中總三萜酸的含量測定［Ｊ］．時珍國醫國藥，２００６，１７（４）：５２９－５３０．

［１３］ 易中宏，鄭一敏，胥秀英，等．分光光度法測定茯苓中總三萜類成分的含量［Ｊ］．時珍國醫國藥，２００５，１６（４）：８４７－８４８．

［１４］ 姚新生，吳立軍．天然藥物化學［Ｍ］．北京：人民衛生出版社，２００３.３０６．

［１５］ 譚世強，謝敬宇，郭帥，等．三萜類物質的生理活性研究進展［Ｊ］．２０１２，２８（３６）：２３－２７．

［１６］ 韓公羽，沈企華，韓紹雯．植物藥黃酮成分與生理生化活性［Ｍ］．北京：中國書籍出版社，２０１０．