金蕎麥有效成分及含量變化研究

唐宇+賈洪鋒+孫俊秀+鐘志惠+邵繼榮

摘要：采用HPLC法對金蕎麥（Fagopyrum cymosum）的有效成分進行了分析。結果表明，金蕎麥含有蘆丁、槲皮素和表兒茶素等有效成分，但不同器官的含量差異較大。蘆丁含量以花、葉較高，種子居中，莖和根狀莖很低。槲皮素含量則以種子最高，花其次，葉、莖和根狀莖較低；表兒茶素含量以根狀莖最高，花和種子的含量甚微，莖和葉中未見有表兒茶素成分。金蕎麥葉中的蘆丁含量以及根狀莖中的表兒茶素含量在開花結實期達最高峰，以后逐漸降低。

關鍵詞：金蕎麥（Fagopyrum cymosum）；蘆丁；槲皮素；表兒茶素；HPLC

中圖分類號：TS201.2；O657.7+2 文獻標識碼：A 文章編號：0439-8114（2014）03-0672-04

金蕎麥（Fagopyrum cymosum）屬蓼科（Polygonaceae）蕎麥屬（Fagopyrum Mill.），為多年生野生蕎麥種之一，廣泛分布于中國南部各省，是一種營養豐富并具有重要藥用價值的資源植物。金蕎麥的根狀莖作為重要的傳統中藥材，主治肺膿瘍、痢疾、麻疹肺炎及風濕痛等病癥。現代藥理研究表明，金蕎麥的根狀莖活性提取物（植物次生代謝產物）具有顯著的抗癌、抑制腫瘤細胞肺侵襲和轉移，以及消炎抗菌等重要作用[1-4]。近年來，許多學者對其根狀莖的主要有效成分進行了研究，表明其主要成分為表兒茶素一類的原花色素的縮合性單寧化合物[5-8]。為進一步開發野生金蕎麥，對金蕎麥的全株有效成分及其不同生育期含量的動態變化進行研究，以期為金蕎麥藥材的質量控制以及合理利用其資源提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

2012年5月23日將采自四川省涼山州普格縣五道箐鄉的野生金蕎麥種子播種于成都市龍泉驛區試驗地，播種10 d后取第一次樣，以后每隔30 d取樣，按植株不同器官置于80 ℃烘箱恒溫干燥后，用粉碎機粉碎后測定其有效成分。

1.2 儀器與試劑

1.2.1 試劑 表兒茶素標準品（中國藥品生物制品鑒定所，純度98%）；蘆丁標準品（中國藥品生物制品鑒定所，純度90.5%）；槲皮素標準品（中國食品藥品檢定研究院，純度96.5%）。甲醇、乙腈（色譜級），磷酸（分析級），均購自國藥集團上海試劑公司。

1.2.2 儀器 普析通用L9型高效液相色譜儀，配有可變波長紫外檢測器和Pgrandsil-STC-C18色譜柱（150 mm×4.6 mm，5 μm）；AUW220D電子天平（日本島津公司），KQ-5200E超聲波清洗器（常州諾基儀器有限公司）。

1.3 試驗方法

1.3.1 表兒茶素的測定 表兒茶素的測定參照何美珊等[9]的方法。精密稱取經研細的金蕎麥樣品1.000 0 g，放入100 mL三角瓶中，加入50 mL 50%乙醇溶液，靜置過夜，回流提取1 h，待冷卻后過濾，定容至50 mL，待測。

色譜分析條件：色譜柱，Pgrandsil-STC-C18 （150 mm×4.6 mm，5 μm）；流動相，乙腈-0.01 mol/L磷酸溶液（體積比為8∶92）；流速，1.0 mL/min；柱溫，35.0 ℃；檢測波長，280 nm；進樣量，20 μL。

1.3.2 蘆丁和槲皮素的測定 蘆丁和槲皮素的測定參照張麗靜等[10]和方玲芬[11]的方法。精密稱取經研細的金蕎麥樣品1.300 0 g，放入100 mL三角瓶中，加入40 mL甲醇，用保鮮膜封口，超聲提取60 min，過濾后定容至50 mL，經0.45 μm濾膜過濾后進行分析。色譜分析條件：色譜柱，Pgrandsil-STC-C18 （150 mm×4.6 mm，5 μm）；流動相，甲醇-0.4%磷酸溶液（體積比為1∶1）；流速，1.0 mL/min；柱溫，30.0 ℃；檢測波長，360 nm；進樣量，10 μL。

1.3.3 表兒茶素標準溶液的配制及標準曲線 精密稱取0.020 0 g表兒茶素標樣，用乙腈-水（1∶9，V/V）定容至50 mL，作為標準貯備液（表兒茶素400 μg/mL）。以標準貯備液為母液，以乙腈-水（1∶9，V/V）為溶劑，配制表兒茶素梯度稀釋標準溶液，濃度分別為5、10、20、40、80、120、160 μg/mL，以峰面積為縱坐標，對照品濃度（μg/mL）為橫坐標繪制標準曲線，得其回歸方程為y=6 071.8x-17 9950，表兒茶素在此范圍內線性關系良好，相關系數為0.999 6。

1.3.4 蘆丁和槲皮素混合標準溶液的配制及標準曲線 精密稱取0.005 3 g蘆丁、0.005 1 g槲皮素，用甲醇定容至50 mL，作為標準貯備液（蘆丁106 μg/mL，槲皮素102 μg/mL）。以標準貯備液為母液，以甲醇為溶劑，配制蘆丁和槲皮素混合梯度稀釋標準溶液，蘆丁濃度分別為5.3、10.6、21.2、31.8、42.4、53.0 μg/mL，槲皮素濃度分別為5.1、10.2、20.4、30.6、40.8、51.0 μg/mL），以峰面積為縱坐標，對照品濃度為橫坐標繪制標準曲線。

蘆丁的回歸方程為y=74 374x-184 393，蘆丁在5.3～53.0 μg/mL內線性關系良好，相關系數為 0.999 7；槲皮素的回歸方程為y=128 445x-339 760，槲皮素在 5.1～51.0 μg/mL內線性關系良好，相關系數為 0.999 2。

2 結果與分析

2.1 金蕎麥不同器官中表兒茶素含量

表兒茶素標準品色譜圖見圖1。金蕎麥開花結實期（播種后100 d，下同）植株各器官中表兒茶素的測定結果見圖2。分析結果見圖3。從結果可看出，在金蕎麥植株中的表兒茶素含量主要集中在根狀莖部分，表兒茶素的含量達0.88 mg/g，花及種子部分含量很低，葉和莖中則完全沒有。

2.2 金蕎麥不同器官中的蘆丁含量

蘆丁的HPLC測定結果見圖4、圖5。分析結果見圖6。測定結果表明，金蕎麥全植株中均含有蘆丁成分，但器官不同，蘆丁含量差別很大。金蕎麥花中的蘆丁含量最高，達12.5 mg/g，其次為葉，蘆丁含量為9.96 mg/g，種子中的蘆丁含量不及花和葉，僅為3.18 mg/g，而莖和根狀莖蘆丁含量則非常低，不及花中含量的1/10。

2.3 金蕎麥不同器官中的槲皮素含量

槲皮素的HPLC測定結果見圖4，分析結果見圖7。從測定結果看，金蕎麥全株均含有槲皮素，但不同器官其含量有較大差別。種子中的槲皮素含量最高，為0.25 mg/g，其次是花，為0.15 mg/g，葉中的含量低于花，僅為0.12 mg/g，莖和根狀莖中的槲皮素含量最低，二者的含量均為0.10 mg/g。

2.4 金蕎麥葉中蘆丁含量的變化

金蕎麥葉中含有較高的蘆丁成分，為此我們對不同時期葉中蘆丁含量的變化進行了考察，其結果見圖8。從圖中可看出，在金蕎麥萌發時，子葉中的蘆丁含量僅1 mg/g左右，發芽后葉中的蘆丁含量急劇增加，發芽10 d后葉中的蘆丁含量就達到了較高的濃度，隨著生育期的增加，葉中的蘆丁含量逐步增加，至開花結實期（播種100 d后）達到最大值（9.96 mg/g），此后又逐漸下降。

2.5 金蕎麥根狀莖中表兒茶素的變化

表兒茶素主要在金蕎麥的根狀莖中。我們測定了不同時期金蕎麥根狀莖中表兒茶素的含量，結果見圖9。在金蕎麥發芽期和苗期，其根部并未形成根狀莖，因此，在根部沒有檢測到表兒茶素成分。播種后50 d，地下部分逐漸開成根狀莖，從圖9中可看出，隨著根狀莖的生長，其表兒茶素的濃度逐漸增加，至開花結實期（播種后100 d）達最大值（0.88 mg/g），其后逐漸下降，至地上部分枯萎時（播種后160 d），其表兒茶素含量僅為0.46 mg/g。

3 小結與討論

先前的研究表明，金蕎麥植株和果實中含有較高的總黃酮[12-14]，但總黃酮中有哪些成分尚不清楚。本試驗結果表明，金蕎麥葉、莖、花、種子中除含有蘆丁、槲皮素外，在其根狀莖、種子和花等部位還含有表兒茶素成分。表兒茶素屬黃酮中的黃烷-3-醇，具有抑制腫瘤細胞的侵襲和轉移、抑制腫瘤細胞增殖過程和顯著的抗氧化、清除自由基，抗致突變作用[15]。近年來人們通過對金蕎麥大量的研究，發現其根狀莖提取物具有抗菌、抗感染、抗癌細胞侵襲和轉移的作用，其主要成分為表兒茶素[6-8]，本次試驗也證實了這一點。除此之外，前人對金蕎麥化學成分研究主要是地下部分，地上部分的研究甚少。本次試驗發現金蕎麥的花及種子中也含有少量表兒茶素，值得進一步研究。

在栽培蕎麥種中，由于苦蕎麥營養和藥用價值高，種子中富含蘆丁、槲皮素等黃酮成分，由此被廣泛開發制成多種保健產品[16]。金蕎麥屬野生蕎麥種，為多年生宿根草本植物，植株高大，生育期長，其果實較大，千粒重可達30 g左右。果實中蛋白質、脂肪、微量元素及維生素的含量均較豐富[17]，有很高的利用價值。目前，金蕎麥主要是將其根狀莖入藥或制藥，其他部分未能很好地利用。從本研究結果看，金蕎麥全株除含有較高的蘆丁和槲皮素外，還含有苦蕎麥、甜蕎麥等栽培品種不具有的表兒茶素成分，開發利用的潛力巨大。

從金蕎麥整個生育期有效成分的變化動態來看，開花結實期是一個重要時期，在此時期中，金蕎麥地上部分的生物產量較大，而葉、花中的蘆丁和根狀莖中的表兒茶素累積達到最高峰。因此，若將金蕎麥作藥材采收時，無論是采收地上部分還是地下部分，可將結實期作為最佳采收期，若過早或過晚采收均會影響藥材的質量。

參考文獻：

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[10] 張麗靜，易新萍，李 革，等. HPLC法測定新疆貫葉連翹中蘆丁及槲皮素的含量[J]. 新疆大學學報（自然科學版），2007，24（1）：70-72.

[11] 方玲芬. HPLC法測定貴州苦蕎麥種皮中槲皮素含量[J]. 貴陽中醫學院學報，2009，31（4）：71-73.

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[14] 唐 宇，孫俊秀，彭德川，等. 野生蕎麥營養和藥用成分的研究[J]. 四川烹飪高等專科學校學報，2011（4）：28-31.

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[17] 張 政，王轉花，林汝法，等. 金蕎麥籽粒營養成分分析[J]. 營養學報，1999，21（4）：480-482.

2.2 金蕎麥不同器官中的蘆丁含量

蘆丁的HPLC測定結果見圖4、圖5。分析結果見圖6。測定結果表明，金蕎麥全植株中均含有蘆丁成分，但器官不同，蘆丁含量差別很大。金蕎麥花中的蘆丁含量最高，達12.5 mg/g，其次為葉，蘆丁含量為9.96 mg/g，種子中的蘆丁含量不及花和葉，僅為3.18 mg/g，而莖和根狀莖蘆丁含量則非常低，不及花中含量的1/10。

2.3 金蕎麥不同器官中的槲皮素含量

槲皮素的HPLC測定結果見圖4，分析結果見圖7。從測定結果看，金蕎麥全株均含有槲皮素，但不同器官其含量有較大差別。種子中的槲皮素含量最高，為0.25 mg/g，其次是花，為0.15 mg/g，葉中的含量低于花，僅為0.12 mg/g，莖和根狀莖中的槲皮素含量最低，二者的含量均為0.10 mg/g。

2.4 金蕎麥葉中蘆丁含量的變化

金蕎麥葉中含有較高的蘆丁成分，為此我們對不同時期葉中蘆丁含量的變化進行了考察，其結果見圖8。從圖中可看出，在金蕎麥萌發時，子葉中的蘆丁含量僅1 mg/g左右，發芽后葉中的蘆丁含量急劇增加，發芽10 d后葉中的蘆丁含量就達到了較高的濃度，隨著生育期的增加，葉中的蘆丁含量逐步增加，至開花結實期（播種100 d后）達到最大值（9.96 mg/g），此后又逐漸下降。

2.5 金蕎麥根狀莖中表兒茶素的變化

表兒茶素主要在金蕎麥的根狀莖中。我們測定了不同時期金蕎麥根狀莖中表兒茶素的含量，結果見圖9。在金蕎麥發芽期和苗期，其根部并未形成根狀莖，因此，在根部沒有檢測到表兒茶素成分。播種后50 d，地下部分逐漸開成根狀莖，從圖9中可看出，隨著根狀莖的生長，其表兒茶素的濃度逐漸增加，至開花結實期（播種后100 d）達最大值（0.88 mg/g），其后逐漸下降，至地上部分枯萎時（播種后160 d），其表兒茶素含量僅為0.46 mg/g。

3 小結與討論

先前的研究表明，金蕎麥植株和果實中含有較高的總黃酮[12-14]，但總黃酮中有哪些成分尚不清楚。本試驗結果表明，金蕎麥葉、莖、花、種子中除含有蘆丁、槲皮素外，在其根狀莖、種子和花等部位還含有表兒茶素成分。表兒茶素屬黃酮中的黃烷-3-醇，具有抑制腫瘤細胞的侵襲和轉移、抑制腫瘤細胞增殖過程和顯著的抗氧化、清除自由基，抗致突變作用[15]。近年來人們通過對金蕎麥大量的研究，發現其根狀莖提取物具有抗菌、抗感染、抗癌細胞侵襲和轉移的作用，其主要成分為表兒茶素[6-8]，本次試驗也證實了這一點。除此之外，前人對金蕎麥化學成分研究主要是地下部分，地上部分的研究甚少。本次試驗發現金蕎麥的花及種子中也含有少量表兒茶素，值得進一步研究。

在栽培蕎麥種中，由于苦蕎麥營養和藥用價值高，種子中富含蘆丁、槲皮素等黃酮成分，由此被廣泛開發制成多種保健產品[16]。金蕎麥屬野生蕎麥種，為多年生宿根草本植物，植株高大，生育期長，其果實較大，千粒重可達30 g左右。果實中蛋白質、脂肪、微量元素及維生素的含量均較豐富[17]，有很高的利用價值。目前，金蕎麥主要是將其根狀莖入藥或制藥，其他部分未能很好地利用。從本研究結果看，金蕎麥全株除含有較高的蘆丁和槲皮素外，還含有苦蕎麥、甜蕎麥等栽培品種不具有的表兒茶素成分，開發利用的潛力巨大。

從金蕎麥整個生育期有效成分的變化動態來看，開花結實期是一個重要時期，在此時期中，金蕎麥地上部分的生物產量較大，而葉、花中的蘆丁和根狀莖中的表兒茶素累積達到最高峰。因此，若將金蕎麥作藥材采收時，無論是采收地上部分還是地下部分，可將結實期作為最佳采收期，若過早或過晚采收均會影響藥材的質量。

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[12] 唐 宇，彭德川，孫俊秀，等. 金蕎麥籽粒中總黃酮提取工藝研究[J]. 食品和發酵科技，2011，47（6）：54-57

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2.2 金蕎麥不同器官中的蘆丁含量

蘆丁的HPLC測定結果見圖4、圖5。分析結果見圖6。測定結果表明，金蕎麥全植株中均含有蘆丁成分，但器官不同，蘆丁含量差別很大。金蕎麥花中的蘆丁含量最高，達12.5 mg/g，其次為葉，蘆丁含量為9.96 mg/g，種子中的蘆丁含量不及花和葉，僅為3.18 mg/g，而莖和根狀莖蘆丁含量則非常低，不及花中含量的1/10。

2.3 金蕎麥不同器官中的槲皮素含量

槲皮素的HPLC測定結果見圖4，分析結果見圖7。從測定結果看，金蕎麥全株均含有槲皮素，但不同器官其含量有較大差別。種子中的槲皮素含量最高，為0.25 mg/g，其次是花，為0.15 mg/g，葉中的含量低于花，僅為0.12 mg/g，莖和根狀莖中的槲皮素含量最低，二者的含量均為0.10 mg/g。

2.4 金蕎麥葉中蘆丁含量的變化

金蕎麥葉中含有較高的蘆丁成分，為此我們對不同時期葉中蘆丁含量的變化進行了考察，其結果見圖8。從圖中可看出，在金蕎麥萌發時，子葉中的蘆丁含量僅1 mg/g左右，發芽后葉中的蘆丁含量急劇增加，發芽10 d后葉中的蘆丁含量就達到了較高的濃度，隨著生育期的增加，葉中的蘆丁含量逐步增加，至開花結實期（播種100 d后）達到最大值（9.96 mg/g），此后又逐漸下降。

2.5 金蕎麥根狀莖中表兒茶素的變化

表兒茶素主要在金蕎麥的根狀莖中。我們測定了不同時期金蕎麥根狀莖中表兒茶素的含量，結果見圖9。在金蕎麥發芽期和苗期，其根部并未形成根狀莖，因此，在根部沒有檢測到表兒茶素成分。播種后50 d，地下部分逐漸開成根狀莖，從圖9中可看出，隨著根狀莖的生長，其表兒茶素的濃度逐漸增加，至開花結實期（播種后100 d）達最大值（0.88 mg/g），其后逐漸下降，至地上部分枯萎時（播種后160 d），其表兒茶素含量僅為0.46 mg/g。

3 小結與討論

先前的研究表明，金蕎麥植株和果實中含有較高的總黃酮[12-14]，但總黃酮中有哪些成分尚不清楚。本試驗結果表明，金蕎麥葉、莖、花、種子中除含有蘆丁、槲皮素外，在其根狀莖、種子和花等部位還含有表兒茶素成分。表兒茶素屬黃酮中的黃烷-3-醇，具有抑制腫瘤細胞的侵襲和轉移、抑制腫瘤細胞增殖過程和顯著的抗氧化、清除自由基，抗致突變作用[15]。近年來人們通過對金蕎麥大量的研究，發現其根狀莖提取物具有抗菌、抗感染、抗癌細胞侵襲和轉移的作用，其主要成分為表兒茶素[6-8]，本次試驗也證實了這一點。除此之外，前人對金蕎麥化學成分研究主要是地下部分，地上部分的研究甚少。本次試驗發現金蕎麥的花及種子中也含有少量表兒茶素，值得進一步研究。

在栽培蕎麥種中，由于苦蕎麥營養和藥用價值高，種子中富含蘆丁、槲皮素等黃酮成分，由此被廣泛開發制成多種保健產品[16]。金蕎麥屬野生蕎麥種，為多年生宿根草本植物，植株高大，生育期長，其果實較大，千粒重可達30 g左右。果實中蛋白質、脂肪、微量元素及維生素的含量均較豐富[17]，有很高的利用價值。目前，金蕎麥主要是將其根狀莖入藥或制藥，其他部分未能很好地利用。從本研究結果看，金蕎麥全株除含有較高的蘆丁和槲皮素外，還含有苦蕎麥、甜蕎麥等栽培品種不具有的表兒茶素成分，開發利用的潛力巨大。

從金蕎麥整個生育期有效成分的變化動態來看，開花結實期是一個重要時期，在此時期中，金蕎麥地上部分的生物產量較大，而葉、花中的蘆丁和根狀莖中的表兒茶素累積達到最高峰。因此，若將金蕎麥作藥材采收時，無論是采收地上部分還是地下部分，可將結實期作為最佳采收期，若過早或過晚采收均會影響藥材的質量。

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