PTEN和survivin基因在視網膜母細胞瘤組織中的表達及臨床意義

黃海東，李莉洋，郭 穎，趙 興，康景佳,管 迪

PTEN和survivin基因在視網膜母細胞瘤組織中的表達及臨床意義

黃海東，李莉洋，郭 穎，趙 興，康景佳,管 迪

目的探討PTEN及survivin基因在視網膜母細胞瘤組織中的表達及臨床意義。方法選擇30例視網膜母細胞瘤組織為觀察組，30例正常視網膜組織為對照組，應用免疫組織化學方法檢測兩組切片中PTEN、survivin基因的表達，比較兩組PTEN和survivin表達差異。結果觀察組PTEN總陽性表達率為53.3%，對照組PTEN總陽性表達率為100.0%，兩組差異有統計學意義(P<0.05)；觀察組survivin總陽性表達率為60.0%，對照組survivin總陽性表達率為0.0%，兩組差異有統計學意義(P<0.05)。結論PTEN基因陽性表達降低與survivin基因陽性表達升高，是視網膜母細胞瘤的發病機制之一。

PTEN基因；survivin基因；視網膜母細胞瘤；表達

PTEN是一種抑癌基因，具有雙特異性磷酸酶活性，在細胞遷移、阻滯細胞周期及細胞凋亡過程中具有重要意義，在很多惡性腫瘤中PTEN基因均存在改變。survivin基因是凋亡抑制蛋白的家族成員，在正常組織中不表達或者低表達，而在很多惡性腫瘤組織中出現高表達[1，2]。目前，視網膜母細胞瘤的發病機制尚未明確[3]，本研究于2012-02至2013-02選取我院存檔的視網膜母細胞瘤病理標本，分析PTEN、survivin基因在視網膜母細胞瘤組織中的表達，探討視網膜母細胞瘤發生及發展的病理機制，為臨床診治及判斷預后提供依據。

1 材料與方法

1.1 材料 30例視網膜母細胞瘤(觀察組)選自我院近10年來存檔的病理標本，其中男17例，女13例，年齡10個月～4歲，平均(2.3±1.5)歲。另外取正常視網膜組織30例為對照組(為同期非眼部疾病死亡的嬰幼兒視網膜標本，取組織切片之前均經監護人簽字同意)，其中男16例，女14例，年齡1～5歲，平均(2.5±1.7)歲。兩組視網膜切片基本資料具有可比性，本研究經過醫院倫理委員會審核批準。

1.2 試劑及方法 選用兔抗人survivin及PTEN多克隆抗體；DAB(二氨基聯苯胺)顯色試劑盒(博士德生物工程有限公司，武漢)；試劑盒(SAl022型)。采用免疫組織化學(SABC)方法檢測切片組織中PTEN和survivin，根據試劑盒說明書進行相關操作；比較兩組PTEN和survivin表達情況。

1.3 評價標準 PTEN陽性染色標準：切片組織細胞質及細胞膜內可見棕褐色的顆粒；survivin陽性染色標準：分別定位于細胞膜、細胞核及細胞質，染成棕黃色。表達強度根據陽性細胞的比例及陽性物質染色的深淺進行評價。在每張切片上隨機選擇高倍視野(×400)5個，每個視野的腫瘤細胞為100個，5個視野即500個細胞，如陽性細胞比例≤5%則記為0分； 6%～24%記為1分；25%～49%記為2分；50%～74%記為3分；≥75%者記為4分。同時根據染色物質顏色計分，棕褐色為3分，棕黃色為2分，淡黃色為1分，無染色為0分。表達強度為強陽性：上述兩項計分之和為6～7分；陽性：4～5分；弱陽性：2～3分。

1.4 統計學處理 運用SPSS16.0統計學軟件，采用秩和檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 兩組PTEN基因表達情況比較 觀察組PTEN基因總陽性表達率為53.3%，顯著低于對照組100.0%，差異有統計學意義(P<0.05，表1)。PTEN表達陽性病理圖見圖1。

表1 兩組視網膜組織切片PTEN基因表達情況比較 (n;%)

圖1 PTEN基因表達陽性組織切片(SABC，×400)

2.2 兩組survivin基因表達情況比較 觀察組survivin基因總陽性表達率為60.0%，顯著高于對照組，差異有統計學意義(P<0.05，表2)。survivin表達陽性病理圖見圖2。

表2 兩組視網膜組織切片survivin基因表達情況比較 (n;%)

圖2 survivin基因表達組織切片(SABC，×400)

3 討 論

視網膜母細胞瘤在嬰幼兒期常見，是眼內的惡性腫瘤，嚴重損害患兒的視力并對生命健康產生威脅[4]。PTEN基因具有脂質磷酸酶及蛋白磷酸酶活性，是一種多功能的蛋白質，自從被報道后一直為臨床研究的熱點[5]。PTEN是一種抑癌基因，對正常細胞具有促進生長的作用，同時抑制其異常增殖、分裂及凋亡。在很多癌癥細胞中，PTEN均有著較低的表達率。因此，PTEN可以成為評價眾多惡性腫瘤預后的指標，對其作用機制進行研究有助于診斷癌癥及進行基因治療。Survivin基因具有調節細胞周期的作用，僅在胚胎組織及腫瘤組織中表達，其在癌癥細胞浸潤轉移及分化增殖中具有重要意義。另外，在內源性及外源性細胞的凋亡過程中也有survivin的參與。目前尚不能明確腫瘤分子中survivin的作用機制，但是如果survivin在腫瘤細胞中表達過度，則預示著不良的預后。臨床上通過對患者放療及化療，能夠在一定程度上控制survivin的表達。本研究結果顯示，PTEN在視網膜母細胞瘤組織中的陽性表達率為53.3%，明顯低于其在正常視網膜組織中的表達率；Survivin在視網膜母細胞瘤組織中的陽性表達率為60.0%，而在正常視網膜組織中無表達。

綜上所述，抑癌基因及致癌基因所產生的抑癌及致癌作用，并不僅僅是某個或者某幾個基因參與，均是共同作用產生的結果。PTEN和survivin在視網膜母細胞瘤組織中的異常表達是視網膜母細胞瘤的發病機制之一，明確兩種基因在視網膜母細胞瘤組織中的具體表達機制對于視網膜母細胞瘤的診治具有重要意義[6]。隨著分子生物學的發展，可以從分子基因角度對臨床上難治疾病進行診療，由于PTEN對視網膜母細胞瘤具有抑制作用，而survivin對視網膜母細胞瘤可能產生了一定的促進作用，因此應用分子靶細胞藥物激活PTNE基因同時抑制survivin基因，對于治愈視網膜母細胞瘤具有指導意義。

[1] 吳子旭,郭曉銘,姚 宏,等.PTEN和Survivin在視網膜母細胞瘤中的表達和意義[J].中國藥物與臨床,2010,10(6):1645-1647.

[2] 李 雁,張軍軍.視網膜母細胞瘤發病機制的分子生物學研究回顧與進展[J].國際眼科雜志,2010,10(4):703-705.

[3] Dimaras H,Dimba E A,Gallic B L.Challenging the global retinoblastoma survival disparity through a collaborative research effort[J].Br J Ophthalmol,2010,94(11):1415-1416.

[4] 喬麗珊,方 嚴.視網膜母細胞瘤的臨床特點和治療分析[J].臨床眼科雜志,2007,15(3):239-241.

[5] 苗麗霞,李 明,王亞峰,等.CIK細胞聯合化療治療兒童中晚期視網膜母細胞瘤的安全性及初步療效觀察[J].武警醫學,2012,23(11)：135-137.

[6] 趙水喜,曹京旭,王迎選.視網膜母細胞瘤的外照射放療[J].武警醫學,2012,23(10):768-769.

(2013-02-27收稿 2013-09-12修回)

(責任編輯 尤偉杰)

ExpressionsandclinicalsignificanceofPTENandsurvivininretinoblastomatissues

HUANG Haidong,LI Liyang,GUO Ying,ZHAO Xing,KANG Jingjia,and GUAN Di.
Department of Ophthalmology, Liaoning Provinial Corps Hospital, Chinese People’s Armed Police Forces. Shenyang 110034,China

ObjectiveTo study the expressions and clinical significance of PTEN and survivin in retinoblastoma tissues.MethodsRetinoblastoma tissue sections from 30 patients were selected as observation group, 30 healthy retinal tissue sections were selected as control group. Immunohistochemical method was used to detect the PTEN and survivin expressions， Expressions of PTEN and survivin were compared between the two groups， and their clinical significance was discussed.ResultsIn the observation group, PTEN-positive expression rate was 53.3%；in the control group，the total positive expression rate of PTEN was 100%. In the observation group，the total positive expression rate of survivin was 60%；in the control group，the total positive expression rate of survivin was 0%；the difference between the two groups was significant(P<0.05).ConclusionsIn retinoblastoma tissues, the survivin-positive expression was significantly increased and PTEN-positive expression was significantly reduced.

PTEN; survivin; retinoblastoma; expressions

黃海東，本科學歷，主治醫師，E-mail: hhd91980@sina.com

110034沈陽，武警遼寧總隊醫院眼科

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