民族藥地桃花根皮及葉總?cè)坪繙y(cè)定

何可群　李相興

摘要：以齊墩果酸為對(duì)照品，用超聲輔助提取法、紫外分光光度法測(cè)定了地桃花根皮及葉的總?cè)坪浚Y(jié)果表明：地桃花根皮、葉中總?cè)频南鄬?duì)百分含量分別為3.682%、9.297%，精密度試驗(yàn)RSD分別為1.79%、2.08%；齊墩果酸對(duì)照品在0～100 μg/mL范圍有良好的線性關(guān)系，回歸方程為y=0.011 3x-0.017 7，相關(guān)系數(shù)r2=0.999 1。該方法操作簡(jiǎn)便、結(jié)果可靠，能為地桃花藥用價(jià)值的開發(fā)及擴(kuò)大資源利用提供科學(xué)的依據(jù)。

關(guān)鍵詞：地桃花；總?cè)疲缓浚粶y(cè)定

中圖分類號(hào)： R284.1 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A 文章編號(hào)：1002-1302（2014）03-0258-02

地桃花（Urena lobata L.）是錦葵科梵天花屬多年生亞灌木狀草本植物，別稱肖梵天花、野桃花、野棉花、土黃芪、大迷馬樁棵等[1-4]，分布于我國(guó)長(zhǎng)江以南各省區(qū)[4]。地桃花根或全株均可入藥，具有清熱解毒、祛風(fēng)利濕、益氣補(bǔ)虛、活血消腫的功效，主治感冒、風(fēng)濕痹痛、腎炎水腫、帶下、淋病、瘧疾、痢疾、乳腺炎、外傷出血等，是我國(guó)西南地區(qū)少數(shù)民族習(xí)用草藥[1-5]。目前的研究表明：地桃花的化學(xué)成分主要為氨基酸和蛋白質(zhì)、糖類、黃酮類、甾醇、鞣質(zhì)、酚類、有機(jī)酸、皂苷等[4-7]。陳勇等的研究表明地桃花水提液在體外對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、肺炎鏈球菌、銅綠假單胞菌和普通變形桿菌均有一定的抑菌活性[8]。國(guó)內(nèi)外還未見有關(guān)地桃花總?cè)茰y(cè)定的研究報(bào)道，本試驗(yàn)對(duì)地桃花根皮及葉的總?cè)坪窟M(jìn)行研究，以便為該民族藥的進(jìn)一步開發(fā)和擴(kuò)大資源利用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 材料 地桃花樣品，采自云南省云龍縣，標(biāo)本保存于貴州民族大學(xué)化學(xué)與環(huán)境科學(xué)學(xué)院藥學(xué)教研室。

1.1.2 儀器 756PC紫外-可見分光光度計(jì)（上海舜宇恒平科學(xué)儀器有限公司），METTLERAE240電子分析天平（上海天平儀器廠），BGZ-30電熱鼓風(fēng)干燥箱（上海博迅實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠），SG3200HE超聲清洗儀（上海冠特超聲儀器有限公司），數(shù)顯恒溫水浴鍋（常州博遠(yuǎn)試驗(yàn)分析儀器有限公司）。

1.1.3 試劑 無(wú)水乙醇、冰醋酸、高氯酸、香草醛均為分析純，齊墩果酸對(duì)照品購(gòu)自貴州迪大科技有限責(zé)任公司（純度≥98%，批號(hào)：84650-60-2）。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 地桃花總?cè)频奶崛》椒?將曬干的地桃花根皮及葉在電熱鼓風(fēng)干燥箱中于（60±1） ℃烘干5 h，分別精確稱取干燥、粉碎（過40目篩）的地桃花根皮、葉粉末各2.000 g，按 1 g ∶ 20 mL 的固液比用無(wú)水乙醇浸泡、超聲提取2次。提取條件：時(shí)間60 min，超聲頻率40 kHz，功率150 W。提取結(jié)束后，合并提取液，過濾，冷卻，用無(wú)水乙醇定容至100 mL，搖勻備用[9-11]。

1.2.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備及測(cè)定波長(zhǎng)的選擇[12-13] （1）標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備。精確稱取65 ℃干燥至恒重的齊墩果酸 20.00 mg，置100 mL容量瓶中，加無(wú)水乙醇適量使其溶解以無(wú)水乙醇定容、搖勻，每1 mL溶液含齊墩果酸200 μg。（2）測(cè)定波長(zhǎng)的選擇。分別精確吸取齊墩果酸標(biāo)準(zhǔn)溶液（200 μg/mL）、地桃花根皮、葉提取液各1.00 mL，分別置于3支10 mL比色管中，于85 ℃揮發(fā)干溶劑，冷卻，分別精確加入5%香草醛-冰醋酸0.500 mL，再分別加入高氯酸1.00 mL，搖勻，于70 ℃水浴中反應(yīng)20 min，取出，在冰水浴中冷卻，用冰醋酸稀釋至刻度，搖勻，靜置5 min。以試劑空白建立基線，在400～700 nm波長(zhǎng)范圍進(jìn)行波長(zhǎng)掃描，得到齊墩果酸和地桃花根皮、葉提取液顯色后的吸收光譜，以確定最大吸收波長(zhǎng)。

1.2.3 齊墩果酸標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 精確吸取質(zhì)量濃度 200 μg/mL 的齊墩果酸標(biāo)準(zhǔn)溶液0、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00 mL 分別置于6支10 mL比色管中，測(cè)定波長(zhǎng)的選擇操作同“1.2.2”節(jié)，以試劑空白為參比，于540 nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度D540 nm，以吸光度為縱坐標(biāo)、顯色液中齊墩果酸的質(zhì)量濃度C（μg/mL） 為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線[12-13]。

1.2.4 樣品測(cè)定 精確量取“1.2.1”節(jié)操作后所得地桃花根皮、葉乙醇提取液各1.00 mL，分別置于10 mL比色管中，測(cè)定波長(zhǎng)的選擇操作同“1.2.2”節(jié)，于540 nm波長(zhǎng)下測(cè)得地桃花根皮、葉提取液的吸光度D540 nm，代入回歸方程得地桃花根皮、葉的總?cè)祁惢衔镆札R墩果酸計(jì)算的質(zhì)量濃度C（μg/mL），換算為干燥藥材中總?cè)扑岬暮縖12-13]。

1.2.5 重復(fù)性試驗(yàn) 精確稱取地桃花根皮、葉樣品各5份，按含量測(cè)定方法進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算平均含量及RSD值。

1.2.6 加標(biāo)回收試驗(yàn) 精確量取地桃花根皮乙醇提取液 1.00 mL 5份，再分別精確加入齊墩果酸標(biāo)準(zhǔn)溶液（濃度為 200 μg/mL）1.00mL，按樣品含量測(cè)定方法進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算加標(biāo)回收率及RSD值。

2 結(jié)果與分析

2.1 測(cè)定波長(zhǎng)的選擇

由“1.2.2”節(jié)的試驗(yàn)結(jié)果可知齊墩果酸、地桃花根皮、葉提取液顯色后在540 nm處均有最大吸收，故以540 nm作為總?cè)频臏y(cè)定波長(zhǎng)。

2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線

于540 nm波長(zhǎng)下測(cè)定齊墩果酸標(biāo)準(zhǔn)溶液系列的吸光度D540 nm，以吸光度為縱坐標(biāo)、顯色液中齊墩果酸的質(zhì)量濃度C（μg/mL） 為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線（圖1），經(jīng)回歸處理得方程：y=0.011 3x-0.017 7，相關(guān)系數(shù)：r2=0.999 1，齊墩果酸濃度在0～100 g/mL范圍內(nèi)吸光度與質(zhì)量濃度線性關(guān)系良好。endprint

2.3 樣品總?cè)坪康臏y(cè)定

由表1可知，地桃花根皮、葉樣品中總?cè)频钠骄糠謩e為3.682%、9.297%，重復(fù)性試驗(yàn)RSD分別為1.79%和208%，精密度高。

2.4 加標(biāo)回收率

由表2可知，加標(biāo)回收率在96.29%～98.39%，RSD為0.880%，說明本試驗(yàn)所采用的方法適用于地桃花樣品中總?cè)坪康臏y(cè)定。

3 結(jié)論

地桃花是我國(guó)西南地區(qū)白族、納西族、侗族等多個(gè)少數(shù)民族民間草藥，目前其資源還未得到有效的開發(fā)利用。本試驗(yàn)首次對(duì)地桃花根皮、葉的總?cè)坪窟M(jìn)行研究，結(jié)果表明地桃花干燥根皮、葉總?cè)坪糠謩e為3.682%、9.297%，為該民族藥的藥用價(jià)值開發(fā)及擴(kuò)大資源利用提供了一定的科學(xué)依據(jù)。

參考文獻(xiàn)：

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[6]賈 陸，畢躍峰，敬林林，等. 地桃花化學(xué)成分研究[J]. 中國(guó)藥學(xué)雜志，2010，45（14）：1054-1056.

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[8]陳 勇，謝 臻，韋 韜，等. 地桃花水提物的體外抗菌試驗(yàn)研究[J]. 亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥，2011，7（10）：29-30.

[9]劉玉明，柴逸峰，婁子洋，等. 分光光度法測(cè)定藍(lán)桉果實(shí)總?cè)扑醄J]. 中國(guó)醫(yī)院藥學(xué)雜志，2005，25（1）：4-6.

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[11]張雁冰，王克讓，劉宏民. 馬桑葉中總?cè)扑岬暮繙y(cè)定[J]. 時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2006，17（4）：529-530.

[12]蔡亞玲，阮金蘭，蘇 群，等. 紫背鼠尾草中總?cè)扑岬暮繙y(cè)定[J]. 中藥材，2008，31（5）：692-693.

[13]易中宏，鄭一敏，胥秀英，等. 分光光度法測(cè)定茯苓中總?cè)祁惓煞值暮縖J]. 時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2005，16（9）：847-848.endprint

2.3 樣品總?cè)坪康臏y(cè)定

由表1可知，地桃花根皮、葉樣品中總?cè)频钠骄糠謩e為3.682%、9.297%，重復(fù)性試驗(yàn)RSD分別為1.79%和208%，精密度高。

2.4 加標(biāo)回收率

由表2可知，加標(biāo)回收率在96.29%～98.39%，RSD為0.880%，說明本試驗(yàn)所采用的方法適用于地桃花樣品中總?cè)坪康臏y(cè)定。

3 結(jié)論

地桃花是我國(guó)西南地區(qū)白族、納西族、侗族等多個(gè)少數(shù)民族民間草藥，目前其資源還未得到有效的開發(fā)利用。本試驗(yàn)首次對(duì)地桃花根皮、葉的總?cè)坪窟M(jìn)行研究，結(jié)果表明地桃花干燥根皮、葉總?cè)坪糠謩e為3.682%、9.297%，為該民族藥的藥用價(jià)值開發(fā)及擴(kuò)大資源利用提供了一定的科學(xué)依據(jù)。

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2.3 樣品總?cè)坪康臏y(cè)定

由表1可知，地桃花根皮、葉樣品中總?cè)频钠骄糠謩e為3.682%、9.297%，重復(fù)性試驗(yàn)RSD分別為1.79%和208%，精密度高。

2.4 加標(biāo)回收率

由表2可知，加標(biāo)回收率在96.29%～98.39%，RSD為0.880%，說明本試驗(yàn)所采用的方法適用于地桃花樣品中總?cè)坪康臏y(cè)定。

3 結(jié)論

地桃花是我國(guó)西南地區(qū)白族、納西族、侗族等多個(gè)少數(shù)民族民間草藥，目前其資源還未得到有效的開發(fā)利用。本試驗(yàn)首次對(duì)地桃花根皮、葉的總?cè)坪窟M(jìn)行研究，結(jié)果表明地桃花干燥根皮、葉總?cè)坪糠謩e為3.682%、9.297%，為該民族藥的藥用價(jià)值開發(fā)及擴(kuò)大資源利用提供了一定的科學(xué)依據(jù)。

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