復(fù)方黃連素片的溶出度試驗(yàn)

秦春怡

（河北省唐山市中醫(yī)醫(yī)院，河北 唐山 063000）

復(fù)方黃連素片是由白芍、木香、鹽酸小檗堿等組方的堿性抗菌類中藥[1]。本研究中運(yùn)用高效液相色譜（HPLC）法對(duì)復(fù)方黃連素片進(jìn)行溶出度檢測，測定其所含鹽酸小檗堿量，從而有效建立溶出度檢查項(xiàng)目，為復(fù)方黃連素片的質(zhì)量控制提供參考。

1 儀器與試藥

SPD-6AV型紫外檢測器；LC-6A型高效液相色譜儀（日本島津公司）；ZRS-8型智能溶出試驗(yàn)儀（天津大學(xué)無線電廠）。鹽酸小檗堿（中國藥品生物制品檢定所，批號(hào)為110724-200922）；復(fù)方黃連素片（江西新贛江藥業(yè)有限公司，批號(hào)為080727，081218，090214）；純化水、乙腈和其他試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2．1 溶出方法選擇

參考2005年版《中國藥典（二部）》[2]附錄中的溶出度測定法——籃法。選取復(fù)方黃連素片6片，分別放于6個(gè)轉(zhuǎn)籃中。以人工配置的0．1 mol／L鹽酸溶液1 000 mL作為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為120 r／min，溫度為 37 ℃ ，依法操作。

2．2 溶液制備

選取25 mg鹽酸小檗堿對(duì)照品，精密稱定，置250 mL燒杯中，加入約150 mL沸水使其溶解。待溶液稍微變冷后，加入3 mL稀鹽酸，攪勻，放冷，并移至250 mL容量瓶中，加水至刻度，搖勻，精密量取2 mL溶液，單獨(dú)置25 mL的容量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，即得 8．00 μg ／mL 的鹽酸小檗堿[3]，作為對(duì)照品溶液。選取20片復(fù)方黃連素片，去除糖衣，精密稱定質(zhì)量，研細(xì)，并取出1片的質(zhì)量置250 mL燒杯中。加入約150 mL沸水溶解，待溶液稍冷后，加入3 mL稀鹽酸，攪勻，放冷，并移至250 mL容量瓶中，加水至刻度。以 4 000 r／min的速率離心，精密取上清液 2 mL，置25 mL容量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液。選取不含鹽酸小檗堿的陰性復(fù)方黃連素片樣品，按供試品溶液制備方法制備陰性對(duì)照品溶液。

2．3 色譜條件

色譜柱：Lichrospher ODS 柱（250 mm ×4．6 mm，5 μm）；流動(dòng)相：0．033 mol／L 的乙腈 - 磷酸二氫鉀溶液（40 ∶60）；檢測波長：265 nm；進(jìn)樣量：10 μL；鹽酸小檗堿的理論板數(shù)不低于3 000。

2．4 線性關(guān)系考察

通過精密儀器稱取鹽酸小檗堿對(duì)照品10．76 mg，將其放置在250 mL的燒杯中，加入約150 mL的沸水使其溶解，稍微放冷后將3 mL的稀鹽酸加入，攪勻放冷后將其移植250 mL的容量杯中，加水到刻度并搖勻，便得到對(duì)照品的貯備液。

2．5 溶出度測定

溶出方式確定：選取1 000 mL經(jīng)過脫氣的0．1 mol／L鹽酸溶液，放置溫度為 36．5～37．5 ℃ ，以 120 r／min 的速率離心。然后選取 6片復(fù)方黃連素片，照 2．1項(xiàng)下方法操作，在 45 min時(shí)取10 mL溶出液進(jìn)行過濾，精密量取2 mL置10 mL容量瓶中，加入0．1 mol／L鹽酸溶液至刻度，搖勻后用濾膜過濾，按擬訂方法進(jìn)行各樣品的溶出量測定。

空白輔料干擾試驗(yàn)：選取空白輔料片6片，按2．1項(xiàng)下方法操作。按照處方比例，將空白輔料置100 mL容量瓶中，加入流動(dòng)相稀釋至刻度，按擬訂色譜條件測定。試驗(yàn)結(jié)果表明，空白輔料對(duì)試驗(yàn)無干擾。

回收率試驗(yàn)：分別精密選取8，10，12 mg鹽酸小檗堿對(duì)照品，置100 mL容量瓶中。按處方量加入輔料，并用流動(dòng)相稀釋至刻度，配置成濃度分別為80%，100%，120%的樣品溶液。按擬訂色譜條件測定，計(jì)算回收率。結(jié)果見表1。

表1 回收率試驗(yàn)結(jié)果（n＝6）

樣品溶出度測定：取出3批樣品，每批為6片復(fù)方黃連素片，分別計(jì)算每批樣品的平均溶出度和每片樣品的溶出量。結(jié)果批號(hào)分別為 080727，081218，090214的 3批樣品的平均溶出量為92．9% ，98．4% ，91．8% 。3 批樣品測定的結(jié)果大致一致，且 3 批樣品在45 min時(shí)的溶出度均超過標(biāo)示量的90%，見圖1。

圖1 3批樣品溶出曲線圖

2．6 樣品含量測定

選取對(duì)照品溶液和供試品溶液各10 μL，按擬訂色譜條件測定，按外標(biāo)法計(jì)算樣品含量，結(jié)果見表2。

3 討論

黃連素為一種重要的生物堿，可從三顆針、黃連等中提取，抑菌效果較顯著，常用的鹽酸黃連素又叫鹽酸小檗堿，對(duì)多種細(xì)菌如痢疾桿菌、結(jié)核桿菌、肺炎球菌、傷寒桿菌及白喉?xiàng)U菌等都有抑制作用，對(duì)痢疾桿菌作用最強(qiáng)，常用來治療細(xì)菌性胃腸炎、痢疾等消化道疾病，不良反應(yīng)較小[4]。但黃連素也可使患者胃酸增多、便秘，大量應(yīng)用后偶有惡心、嘔吐、皮疹及發(fā)熱，甚至可能導(dǎo)致橫紋肌溶解癥及乳酸中毒癥，服黃連素也可能會(huì)導(dǎo)致B族維生素吸收障礙，出現(xiàn)周圍神經(jīng)炎。

表2 樣品含量測定結(jié)果

本試驗(yàn)中主要選取復(fù)方黃連素片和鹽酸小檗堿片為樣品，采用HPLC法測定鹽酸小檗堿的溶出度。選取1 000 mL純化水為溶劑，在溶劑中加入少量鹽酸，有助于供試品的過濾。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，該方法簡便、可靠，可為復(fù)方黃連素片的質(zhì)量控制提供有效參考。

[1]喬德水，林 彬，梅 麗．不同廠家格列美脲片的溶出行為比較[J]．中國藥業(yè)，2010，19(10):221-222．

[2]張根長．硫糖鋁聯(lián)用黃連素治療慢性頑固性胃炎94例[J]．中國藥業(yè)，2012，21(4):378-379．

[3]李興德，田 靜，周國勇．兩種伊曲康唑膠囊溶出度的比較[J]．中國藥業(yè)，2011，20(11):77-78．

[4]謝元超，鞏麗萍，徐曉潔，等．自身對(duì)照法測定復(fù)方黃連素片溶出度[J]．藥物分析雜志，2012，32(8):175-176．