真姬菇多糖超聲波輔助提取工藝及抗氧化活性研究

賀江等

摘要：為探討真姬菇多糖的提取和抗氧化活性，通過單因素試驗設計和正交設計對真姬菇多糖的超聲波輔助提取工藝進行研究，采用自由基體外清除試驗對真姬菇多糖的體外抗氧化活性進行探討。結果表明，在超聲功率為 200 W、料液比1 g ∶40 mL、提取溫度60 ℃、提取時間60 min的條件下，真姬菇多糖提取得率可達5.68%；真姬菇粗多糖對DPPH·自由基和ABTS·+自由基均表現出較好的體外清除效果，當濃度為1.0 mg/mL時，其自由基清除能力與濃度為80 μmol/L的維生素C相當。

關鍵詞：真姬菇；真菌多糖；超聲波輔助提取；抗氧化活性

中圖分類號： TS201.1 文獻標志碼： A 文章編號：1002-1302（2014）04-0232-03

收稿日期：2013-08-10

基金項目：湖南省大學生研究性學習與創新性實驗項目（編號：2012）；湖南文理學院博士啟動項目（編號：2011）；湖南省教育廳科研項目（編號：12C0828）。

作者簡介：賀江（1983—），男，江西萍鄉人，講師，主要從事食品安全與食品生物技術相關研究。E-mail：hejiang1119@163.com。我國食用菌資源豐富，許多食用菌以其獨特的營養價值和藥用功能而深受消費者喜愛。真姬菇別稱玉蕈、蟹味菇、海鮮菇等，味道鮮美，肉厚質嫩，具有獨特的蟹香味；是北溫帶地區的一種優良食用菌，于20世紀80年代從日本引入我國山西、遼寧、福建等省進行廣泛栽培。已有研究表明，從真姬菇子實體中提取的以β-1，3-D葡聚糖為代表的多糖具有抗腫瘤、提高免疫力、預防衰老、延長壽命等一系列生理活性[1-2]。目前，真姬菇大多作為高營養價值的烹飪食材供消費者享用；但從食用菌中提取多糖等活性成分，并開發出高附加值的保健食品或飲品也是食用菌資源開發與利用的一種有效途徑[3-4]。目前，真姬菇多糖提取工藝相關的研究報道較少。因此，本研究以真姬菇為研究材料，采用目前廣泛應用的超聲波輔助提取工藝[5-6]對其進行多糖提取，重點探討其提取工藝，并進一步對真姬菇多糖的體外抗氧化活性進行初步研究。本研究的開展，有望為真姬菇資源的開發與利用提供一定參考。

1材料與方法

1.1材料與試劑

真姬菇子實體（干品，產地古田縣）；濃硫酸、苯酚（5%）、無水乙醇、無水甲醇、葡萄糖、K2S2O8等均為分析純；DPPH、ABTS等均為優級純。

1.2儀器與設備

KH5200超聲波提取設備（超聲功率為200 W）、UV-1750 紫外可見分光光度計（日本島津）、電熱鼓風干燥箱、恒溫水浴鍋、旋轉蒸發儀、萬能粉碎機、電子天平、高速離心機、渦旋振蕩器以及其他常規玻璃儀器。

1.3方法

1.3.1真姬菇多糖超聲波輔助提取基本流程[5-6]將真姬菌子實體干品于60 ℃下恒溫干燥10 h后粉碎，過100目篩；準確稱取2.00 g干粉樣品，以蒸餾水為提取溶劑，按設定的一系列提取條件進行提取后，樣液4 000 r/min離心 10 min；上清液加入3倍體積95%乙醇進行沉淀，離心收集沉淀，并用無水乙醇和乙醚分別洗滌2次，即得粗多糖；將粗多糖溶于蒸餾水中并定容至20 mL，采用苯酚-硫酸法進行多糖含量的測定。

1.3.2工藝參數對真姬菇多糖超聲波輔助提取的影響在固定的超聲波功率條件下，設置一系列料液比（1 ∶10、1 ∶20、1 ∶30、1 ∶40、1 ∶50，g ∶mL）、提取溫度（30、40、50、60、70 ℃）和提取時間（15、30、45、60、75 min）對真姬菇多糖進行提取，以探索這3個因素對真姬菇多糖提取效果的影響，每個處理重復3次。

1.3.3真姬菇多糖超聲波輔助提取工藝條件優化本研究在探討了料液比、提取溫度、提取時間等因素對真姬菇多糖提取效果的影響后，進一步對每個因素分別選取3個水平，采用L9（34）正交表進行正交試驗，以對真姬菇多糖超聲波輔助提取的工藝條件進行優化，正交試驗的因素和水平如表1所示。

3結論

本研究通過單因素試驗探討了料液比、提取溫度、提取時間等因素對真姬菇多糖超聲波輔助提取效果的影響，并在此基礎上采用正交設計對真姬菇多糖的超聲波輔助提取工藝進行優化。結果表明，在固定超聲功率為200 W、料液比 1 g ∶40 mL、提取溫度60 ℃、提取時間60 min的條件下，真姬菇多糖提取得率最高，可達5.68%。本研究還進一步采用自由基體外清除試驗對真姬菇粗多糖的抗氧化活性進行了初步探討。結果表明，真姬菇粗多糖對DPPH·自由基和ABTS·+自由基均表現出較好的體外清除效果，當濃度為 1.0 mg/mL 時，其自由基清除能力與濃度為80 μmol/L的維生素C相當。本研究結果可為我國真姬菇資源的開發和利用提供一定的基礎。

參考文獻：

[1]孫培龍，魏紅福，楊開，等. 真姬菇研究進展[J]. 食品科技，2005（9）：54-57.

[2]李順峰，劉興華，張麗華，等. 真姬菇子實體多糖的提取工藝優化[J]. 農業工程學報，2008，24（2）：281-284.

[3]周國英，蘭貴紅，何小燕. 食用菌多糖研究開發進展[J]. 實用預防醫學，2004，11（1）：203-204.

[4]王麗霞，杜德清. 食用菌多糖研究進展[J]. 浙江林業科技，2005，25（5）：49-53，56.

[5]羅登宏. 超聲波輔助提取金針菇多糖工藝參數優化研究[J]. 江蘇農業科學，2010（2）：316-317.

[6]史碧波，王雪波，羅曉妙. 超聲波輔助提取雞油菌多糖的研究[J]. 食品與機械，2012，28（2）：152-154，218.

[7]樊懿娜，趙婷，周葉，等. 苯酚-硫酸法測定灰樹花中多糖含量的研究[J]. 安徽農業科學，2011，39（25）：15256-15257.

[8]Faller A L K，Fialho E. Polyphenol content and antioxidant capacity in organic and conventional plant foods[J]. Journal of Food Composition and Analysis，2010，23（6）：561-568.

[9]熊建華，閔嗣璠，董開發，等. 南瓜不同部位抗氧化活性的比較[J]. 食品研究與開發，2011，32（11）：135-138.

[10]秦秀麗，李鳳林. 超聲波法提取蛹蟲草多糖的工藝研究[J]. 江蘇農業科學，2011，39（5）：378-380.endprint

摘要：為探討真姬菇多糖的提取和抗氧化活性，通過單因素試驗設計和正交設計對真姬菇多糖的超聲波輔助提取工藝進行研究，采用自由基體外清除試驗對真姬菇多糖的體外抗氧化活性進行探討。結果表明，在超聲功率為 200 W、料液比1 g ∶40 mL、提取溫度60 ℃、提取時間60 min的條件下，真姬菇多糖提取得率可達5.68%；真姬菇粗多糖對DPPH·自由基和ABTS·+自由基均表現出較好的體外清除效果，當濃度為1.0 mg/mL時，其自由基清除能力與濃度為80 μmol/L的維生素C相當。

關鍵詞：真姬菇；真菌多糖；超聲波輔助提取；抗氧化活性

中圖分類號： TS201.1 文獻標志碼： A 文章編號：1002-1302（2014）04-0232-03

收稿日期：2013-08-10

基金項目：湖南省大學生研究性學習與創新性實驗項目（編號：2012）；湖南文理學院博士啟動項目（編號：2011）；湖南省教育廳科研項目（編號：12C0828）。

作者簡介：賀江（1983—），男，江西萍鄉人，講師，主要從事食品安全與食品生物技術相關研究。E-mail：hejiang1119@163.com。我國食用菌資源豐富，許多食用菌以其獨特的營養價值和藥用功能而深受消費者喜愛。真姬菇別稱玉蕈、蟹味菇、海鮮菇等，味道鮮美，肉厚質嫩，具有獨特的蟹香味；是北溫帶地區的一種優良食用菌，于20世紀80年代從日本引入我國山西、遼寧、福建等省進行廣泛栽培。已有研究表明，從真姬菇子實體中提取的以β-1，3-D葡聚糖為代表的多糖具有抗腫瘤、提高免疫力、預防衰老、延長壽命等一系列生理活性[1-2]。目前，真姬菇大多作為高營養價值的烹飪食材供消費者享用；但從食用菌中提取多糖等活性成分，并開發出高附加值的保健食品或飲品也是食用菌資源開發與利用的一種有效途徑[3-4]。目前，真姬菇多糖提取工藝相關的研究報道較少。因此，本研究以真姬菇為研究材料，采用目前廣泛應用的超聲波輔助提取工藝[5-6]對其進行多糖提取，重點探討其提取工藝，并進一步對真姬菇多糖的體外抗氧化活性進行初步研究。本研究的開展，有望為真姬菇資源的開發與利用提供一定參考。

1材料與方法

1.1材料與試劑

真姬菇子實體（干品，產地古田縣）；濃硫酸、苯酚（5%）、無水乙醇、無水甲醇、葡萄糖、K2S2O8等均為分析純；DPPH、ABTS等均為優級純。

1.2儀器與設備

KH5200超聲波提取設備（超聲功率為200 W）、UV-1750 紫外可見分光光度計（日本島津）、電熱鼓風干燥箱、恒溫水浴鍋、旋轉蒸發儀、萬能粉碎機、電子天平、高速離心機、渦旋振蕩器以及其他常規玻璃儀器。

1.3方法

1.3.1真姬菇多糖超聲波輔助提取基本流程[5-6]將真姬菌子實體干品于60 ℃下恒溫干燥10 h后粉碎，過100目篩；準確稱取2.00 g干粉樣品，以蒸餾水為提取溶劑，按設定的一系列提取條件進行提取后，樣液4 000 r/min離心 10 min；上清液加入3倍體積95%乙醇進行沉淀，離心收集沉淀，并用無水乙醇和乙醚分別洗滌2次，即得粗多糖；將粗多糖溶于蒸餾水中并定容至20 mL，采用苯酚-硫酸法進行多糖含量的測定。

1.3.2工藝參數對真姬菇多糖超聲波輔助提取的影響在固定的超聲波功率條件下，設置一系列料液比（1 ∶10、1 ∶20、1 ∶30、1 ∶40、1 ∶50，g ∶mL）、提取溫度（30、40、50、60、70 ℃）和提取時間（15、30、45、60、75 min）對真姬菇多糖進行提取，以探索這3個因素對真姬菇多糖提取效果的影響，每個處理重復3次。

1.3.3真姬菇多糖超聲波輔助提取工藝條件優化本研究在探討了料液比、提取溫度、提取時間等因素對真姬菇多糖提取效果的影響后，進一步對每個因素分別選取3個水平，采用L9（34）正交表進行正交試驗，以對真姬菇多糖超聲波輔助提取的工藝條件進行優化，正交試驗的因素和水平如表1所示。

3結論

本研究通過單因素試驗探討了料液比、提取溫度、提取時間等因素對真姬菇多糖超聲波輔助提取效果的影響，并在此基礎上采用正交設計對真姬菇多糖的超聲波輔助提取工藝進行優化。結果表明，在固定超聲功率為200 W、料液比 1 g ∶40 mL、提取溫度60 ℃、提取時間60 min的條件下，真姬菇多糖提取得率最高，可達5.68%。本研究還進一步采用自由基體外清除試驗對真姬菇粗多糖的抗氧化活性進行了初步探討。結果表明，真姬菇粗多糖對DPPH·自由基和ABTS·+自由基均表現出較好的體外清除效果，當濃度為 1.0 mg/mL 時，其自由基清除能力與濃度為80 μmol/L的維生素C相當。本研究結果可為我國真姬菇資源的開發和利用提供一定的基礎。

參考文獻：

[1]孫培龍，魏紅福，楊開，等. 真姬菇研究進展[J]. 食品科技，2005（9）：54-57.

[2]李順峰，劉興華，張麗華，等. 真姬菇子實體多糖的提取工藝優化[J]. 農業工程學報，2008，24（2）：281-284.

[3]周國英，蘭貴紅，何小燕. 食用菌多糖研究開發進展[J]. 實用預防醫學，2004，11（1）：203-204.

[4]王麗霞，杜德清. 食用菌多糖研究進展[J]. 浙江林業科技，2005，25（5）：49-53，56.

[5]羅登宏. 超聲波輔助提取金針菇多糖工藝參數優化研究[J]. 江蘇農業科學，2010（2）：316-317.

[6]史碧波，王雪波，羅曉妙. 超聲波輔助提取雞油菌多糖的研究[J]. 食品與機械，2012，28（2）：152-154，218.

[7]樊懿娜，趙婷，周葉，等. 苯酚-硫酸法測定灰樹花中多糖含量的研究[J]. 安徽農業科學，2011，39（25）：15256-15257.

[8]Faller A L K，Fialho E. Polyphenol content and antioxidant capacity in organic and conventional plant foods[J]. Journal of Food Composition and Analysis，2010，23（6）：561-568.

[9]熊建華，閔嗣璠，董開發，等. 南瓜不同部位抗氧化活性的比較[J]. 食品研究與開發，2011，32（11）：135-138.

[10]秦秀麗，李鳳林. 超聲波法提取蛹蟲草多糖的工藝研究[J]. 江蘇農業科學，2011，39（5）：378-380.endprint

摘要：為探討真姬菇多糖的提取和抗氧化活性，通過單因素試驗設計和正交設計對真姬菇多糖的超聲波輔助提取工藝進行研究，采用自由基體外清除試驗對真姬菇多糖的體外抗氧化活性進行探討。結果表明，在超聲功率為 200 W、料液比1 g ∶40 mL、提取溫度60 ℃、提取時間60 min的條件下，真姬菇多糖提取得率可達5.68%；真姬菇粗多糖對DPPH·自由基和ABTS·+自由基均表現出較好的體外清除效果，當濃度為1.0 mg/mL時，其自由基清除能力與濃度為80 μmol/L的維生素C相當。

關鍵詞：真姬菇；真菌多糖；超聲波輔助提取；抗氧化活性

中圖分類號： TS201.1 文獻標志碼： A 文章編號：1002-1302（2014）04-0232-03

收稿日期：2013-08-10

基金項目：湖南省大學生研究性學習與創新性實驗項目（編號：2012）；湖南文理學院博士啟動項目（編號：2011）；湖南省教育廳科研項目（編號：12C0828）。

作者簡介：賀江（1983—），男，江西萍鄉人，講師，主要從事食品安全與食品生物技術相關研究。E-mail：hejiang1119@163.com。我國食用菌資源豐富，許多食用菌以其獨特的營養價值和藥用功能而深受消費者喜愛。真姬菇別稱玉蕈、蟹味菇、海鮮菇等，味道鮮美，肉厚質嫩，具有獨特的蟹香味；是北溫帶地區的一種優良食用菌，于20世紀80年代從日本引入我國山西、遼寧、福建等省進行廣泛栽培。已有研究表明，從真姬菇子實體中提取的以β-1，3-D葡聚糖為代表的多糖具有抗腫瘤、提高免疫力、預防衰老、延長壽命等一系列生理活性[1-2]。目前，真姬菇大多作為高營養價值的烹飪食材供消費者享用；但從食用菌中提取多糖等活性成分，并開發出高附加值的保健食品或飲品也是食用菌資源開發與利用的一種有效途徑[3-4]。目前，真姬菇多糖提取工藝相關的研究報道較少。因此，本研究以真姬菇為研究材料，采用目前廣泛應用的超聲波輔助提取工藝[5-6]對其進行多糖提取，重點探討其提取工藝，并進一步對真姬菇多糖的體外抗氧化活性進行初步研究。本研究的開展，有望為真姬菇資源的開發與利用提供一定參考。

1材料與方法

1.1材料與試劑

真姬菇子實體（干品，產地古田縣）；濃硫酸、苯酚（5%）、無水乙醇、無水甲醇、葡萄糖、K2S2O8等均為分析純；DPPH、ABTS等均為優級純。

1.2儀器與設備

KH5200超聲波提取設備（超聲功率為200 W）、UV-1750 紫外可見分光光度計（日本島津）、電熱鼓風干燥箱、恒溫水浴鍋、旋轉蒸發儀、萬能粉碎機、電子天平、高速離心機、渦旋振蕩器以及其他常規玻璃儀器。

1.3方法

1.3.1真姬菇多糖超聲波輔助提取基本流程[5-6]將真姬菌子實體干品于60 ℃下恒溫干燥10 h后粉碎，過100目篩；準確稱取2.00 g干粉樣品，以蒸餾水為提取溶劑，按設定的一系列提取條件進行提取后，樣液4 000 r/min離心 10 min；上清液加入3倍體積95%乙醇進行沉淀，離心收集沉淀，并用無水乙醇和乙醚分別洗滌2次，即得粗多糖；將粗多糖溶于蒸餾水中并定容至20 mL，采用苯酚-硫酸法進行多糖含量的測定。

1.3.2工藝參數對真姬菇多糖超聲波輔助提取的影響在固定的超聲波功率條件下，設置一系列料液比（1 ∶10、1 ∶20、1 ∶30、1 ∶40、1 ∶50，g ∶mL）、提取溫度（30、40、50、60、70 ℃）和提取時間（15、30、45、60、75 min）對真姬菇多糖進行提取，以探索這3個因素對真姬菇多糖提取效果的影響，每個處理重復3次。

1.3.3真姬菇多糖超聲波輔助提取工藝條件優化本研究在探討了料液比、提取溫度、提取時間等因素對真姬菇多糖提取效果的影響后，進一步對每個因素分別選取3個水平，采用L9（34）正交表進行正交試驗，以對真姬菇多糖超聲波輔助提取的工藝條件進行優化，正交試驗的因素和水平如表1所示。

3結論

本研究通過單因素試驗探討了料液比、提取溫度、提取時間等因素對真姬菇多糖超聲波輔助提取效果的影響，并在此基礎上采用正交設計對真姬菇多糖的超聲波輔助提取工藝進行優化。結果表明，在固定超聲功率為200 W、料液比 1 g ∶40 mL、提取溫度60 ℃、提取時間60 min的條件下，真姬菇多糖提取得率最高，可達5.68%。本研究還進一步采用自由基體外清除試驗對真姬菇粗多糖的抗氧化活性進行了初步探討。結果表明，真姬菇粗多糖對DPPH·自由基和ABTS·+自由基均表現出較好的體外清除效果，當濃度為 1.0 mg/mL 時，其自由基清除能力與濃度為80 μmol/L的維生素C相當。本研究結果可為我國真姬菇資源的開發和利用提供一定的基礎。

參考文獻：

[1]孫培龍，魏紅福，楊開，等. 真姬菇研究進展[J]. 食品科技，2005（9）：54-57.

[2]李順峰，劉興華，張麗華，等. 真姬菇子實體多糖的提取工藝優化[J]. 農業工程學報，2008，24（2）：281-284.

[3]周國英，蘭貴紅，何小燕. 食用菌多糖研究開發進展[J]. 實用預防醫學，2004，11（1）：203-204.

[4]王麗霞，杜德清. 食用菌多糖研究進展[J]. 浙江林業科技，2005，25（5）：49-53，56.

[5]羅登宏. 超聲波輔助提取金針菇多糖工藝參數優化研究[J]. 江蘇農業科學，2010（2）：316-317.

[6]史碧波，王雪波，羅曉妙. 超聲波輔助提取雞油菌多糖的研究[J]. 食品與機械，2012，28（2）：152-154，218.

[7]樊懿娜，趙婷，周葉，等. 苯酚-硫酸法測定灰樹花中多糖含量的研究[J]. 安徽農業科學，2011，39（25）：15256-15257.

[8]Faller A L K，Fialho E. Polyphenol content and antioxidant capacity in organic and conventional plant foods[J]. Journal of Food Composition and Analysis，2010，23（6）：561-568.

[9]熊建華，閔嗣璠，董開發，等. 南瓜不同部位抗氧化活性的比較[J]. 食品研究與開發，2011，32（11）：135-138.

[10]秦秀麗，李鳳林. 超聲波法提取蛹蟲草多糖的工藝研究[J]. 江蘇農業科學，2011，39（5）：378-380.endprint