糖化清蛋白酶法快速檢測與糖化血紅蛋白檢測的臨床比較

邱媛+沈莉+戎紅輝+李永祥+姚明

[摘要] 目的 評估糖化清蛋白檢測反映血糖水平的臨床意義。方法 采用糖化清蛋白（GA）快速檢測法與糖化血紅蛋白（HbA1c）檢測法分別檢測糖尿病與非糖尿患者血糖水平，分析二者的相關性以及糖化清蛋白快速檢測法的精確性與靈敏度。結果 糖化清蛋白快速檢測法精密度良好，且抗干擾能力較好，均符合臨床檢測的要求。GA與HbA1c、空腹血糖（FPG）、餐后2h血糖（2hBG）均呈良好的正相關性， 其回歸方程分別為Y=0.89X+0.21，Y=0.84X+0.11，Y=0.92X+0.15； r值分別為0.94、0.92、0.96（P<0.01）。 結論 GA快速檢測法可反映糖尿病患者近期整體血糖水平，具有重要臨床價值。

[關鍵詞] 糖尿病；糖基化血紅蛋白；糖化血清白蛋白

[中圖分類號] R587.1 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-9701（2014）17-0086-03

Clinical comparison of the enzymatic measurement of glycated albumin and the detection of glycated hemoglobin

QIU Yuan1 SHEN Li1 RONG Honghui1 LI Yongxiang1 YAO Ming2

1.Department of Clinical Laboratory， Maternity and Children Health Care Hospital of Jiaxing City in Zhejiang Province， Jiaxing 314015， China； 2.Department of Anesthesiology， the First Hospital of Jiaxing City in Zhejiang Province， Jiaxing 314002， China

[Abstract] Objective To investigate the clinical significance of enzymatic measurement of glycated albumin （GA）. Methods A total of 72 cases of patients with diabetes mellitus and 110 cases of healthy controls were enrolled. The levels of GA were detected by using enzymatic measurement， and the precision and linear rage of the detection kits were analyzed by the detection of samples with high and low levels of GA， and the correlation between GA and other indexes was evaluated. Results The enzymatic measurement of GA was with good precision and better anti-interference ability， and met the requirements of clinical testing. In patients group，there was fine correlation between GA and glycosylated hemoglobin A （HbAlc），fasting plasma glucose （FPG） and 2h postprandial blood glucose （2hBG） （equation of linear regression： Y=0.89X+0.21，Y=0.84X+0.11，Y=0.92X+0.15； r=0.94，0.92，0.96； P< 0.01）. Conclusion The enzymatic measurement of GA is with fine precision and anti-interference ability， could be well correlated with HbAlc.

[Key words] Diabetes mellitus；Glycosylated hemoglobin A； Glycated albumin

糖化血紅蛋白（HbA1c）是紅細胞內的血紅蛋白與血糖不可逆結合的產物，其濃度與血糖水平成正比，且其含量不受血糖短暫波動的影響。HbA1c的檢測反映了患者近8～12周的血糖控制情況，是目前臨床糖尿病療效判定和調整治療方案的金標準[1]。但是，由于血紅蛋白半衰期較長，HbA1c反映的是血糖的平均值，因此對于紅細胞更新率增加和/或血糖波動幅度較大的患者，HbA1c不能準確反映血糖的控制情況，亦不能靈敏反映血糖的波動情況[2]。與糖化血紅蛋白相比，血清清蛋白（GA）代謝半衰期為21d，因此GA反映了患者近2～3周內的平均血糖水平，對短期內血糖變化更為敏感[3]。本研究擬采用酶法快速檢測糖尿病患者GA，分析GA與常用血糖指標的相關性，評估GA酶法快速檢測在糖尿病患者中應用的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

2012年1～12月我院體檢中心體檢者血樣182例，其中正常健康者110例（對照組），年齡21～65歲；確診為糖尿病患者72例（糖尿病組），均符合1999年世界衛生組織的糖尿病診斷標準：空腹血糖（FPG）≥7.0mmol/L和/或餐后2h血糖（2hBG）≥11.1mmol/L，年齡33～65歲。所有患者肝、腎、心臟、呼吸功能正常，排除其他代謝性疾病。endprint

1.2 檢測方法

采用雅培C16000全自動生化分析儀。采用己糖激酶法檢測血糖濃度（試劑由日本積水醫療株式會社提供），采用液態酶法檢測GA濃度（試劑由日本旭化成公司提供），采用果糖基肽氧化酶法檢測HbAlc濃度（試劑由北京九強公司提供）。由全自動生化分析儀自動完成檢測過程，每次測定時均進行質控，確定試劑的精密度、線性等性能。

1.3 統計學分析

計量資料采用均數±標準差（x±s）表示，使用SPSS 13.0軟件進行統計學分析，組間比較采用t檢驗，采用person相關性分析參數間相關性，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 精密度檢測

按照美國臨床實驗標準委員會（NCCLS）的標準，分別進行批內與批間精密度檢測。采用GA含量為4.2%、11.0% 、20.2%標準品血清3份，其中一份連續測定20次以確定批內精密度；另兩份每日分上下午各測1次，連續20 d，得到批間精密。結果批內與批間CV%值分別為1.28、2.71，符合要求。

2.2 線性測定

取GA高值標本，用稀釋液稀釋成4%、8%、12%、16%、20% 5個濃度梯度，測定GA含量，進行線性回歸分析。其回歸方程為Y=0.92X+0.23，r=0.96（X為測定值，Y為理論值），符合要求。

2.3干擾試驗

取GA濃度為11.0%的標本4份，分別加入40μL蒸餾水或等量的含8.7 mmol/L甘油三酯或8.4 mmol/L膽固醇，或824 μmol/L膽紅素的標準血清，測定GA含量以確定以上因素對GA測定結果的影響，結果顯示上述干擾因素對GA酶法快速測定結果無干擾。

2.4 糖尿病檢測指標分析

與健康對照組相比，糖尿病組患者HbA1c、GA、FPG、2hBG均明顯增高（P<0.01），見表1。

表1 兩組血糖指標對比（x±s）

注：與對照組相比具有統計學意義（*P <0.05）

2.5 相關性分析

對147例患者的相關性分析顯示，GA與HbA1c、FPG、2hBG均具有良好的正相關性，其回歸方程分別為Y=0.89X+0.21，Y=0.84X+0.11，Y=0.92X+0.15；r值分別為0.94、0.92、0.96（P均< 0.01）。

3討論

糖尿病的診斷與療效的檢測主要依賴于對血糖濃度的監測，其中糖基化蛋白質的測定是重要手段。與非糖尿病患者相比，糖尿病患者體內存在多種糖基化蛋白質。這些糖基化蛋白質中，HbA1c作為判定糖尿病患者血糖控制水平的金標準，其含量與血糖水平、并發癥的發生率密切相關[1]。而全血HbAlc水平控制在7.0 以下可有效降低糖尿病慢性并發癥如腎病、白內障、動脈硬化的發生率，表明HbAlc與糖尿病并發癥間同樣存在緊密聯系[4]。

與先前的研究結果一致，我們的結果表明，糖尿病患者HbAlc較非糖尿病患者明顯增高。但是，HbAlc是血紅蛋白與血糖間緩慢的不可逆結合的產物，其濃度主要受一段時期內血糖平均水平與紅細胞平均壽命的影響[5]。體內紅細胞的平均壽命約120 d，因此HbAlc僅反映抽血前2～3個月內血糖的平均水平[6]。但是血糖波動、進食以及運動HbAlc影響不大，因此其不能反映患者短期內血糖波動的程度。此外紅細胞的更新率增加，如貧血、溶血等情況下，其準確性亦受到影響[7]。

GA由血清清蛋白和葡萄糖以非酶促的氧化反應結合生成。與血紅蛋白不同，清蛋白的半衰期不受血紅蛋白代謝率的影響，因此檢測GA反映血糖控制水平時可以避免上述血紅細胞代謝紊亂的影響[8]。與血紅蛋白相比，血清清蛋白的半衰期較短，約為21d，因此當出現短期血糖控制水平波動時，GA的反應更為靈敏[9]。2型糖尿病患者接受胰島素治療2周后，HbAlc從10.9%降至10.0%，而GA 水平從35.6%降至25.0%[10]。提示GA 比HbAlc更能反映DM 藥物和其他因素導致的短期內血糖水平的波動情況，能迅速、靈敏、特異地評價和監控降糖藥物的療效。此外，GA 比HbA1c能更好地反映糖尿病慢性并發癥，出現此現象的原因除了與GA能更好地反映短期內血糖波動幅度外， GA本身的細胞毒性也是重要原因。研究發現血GA濃度升高使視網膜感光細胞的凋亡增加，表明高GA血癥對視網膜神經元存在直接毒性，與DM引起的視網膜病變密切相關[11]；高GA血癥導致腎小球系膜細胞增生與Ⅳ型膠原分泌增加，促進腎小球硬化，加重糖尿病性腎病的病理改變[12]。

早期GA的測定依靠高效液相色譜法，成本高、效率低不適于臨床應用。固體與液態酶法GA測定技術的開發成功，大大降低了檢測成本，提高了檢測效率，簡化了操作過程[13，14]。GA酶法快速檢測是采用糖化氨基酸氧化酶將內源性糖化氨基酸分解為葡萄糖酮醛、氨基酸、雙氧水而去除，在處理液中加入對白蛋白特異的蛋白酶將GA水解為糖化氨基酸，再次使用糖化氨基酸氧化酶將GA水解生成的糖化氨基酸水解為葡萄糖酮醛、氨基酸、過氧化氫。生成的過氧化氫與N， N-雙（4-磺丁基）-3-甲基苯胺二鈉鹽在過氧化物酶的作用下定量生成藍紫色色素，通過測定此紫藍色色素的吸光度，計算GA濃度。我們的研究結果顯示，液態酶法快速檢測GA的精密度良好，且抗干擾能力較好，能準確地區別糖尿病與非糖尿病患者。GA與HbA1c、FPG、2hBG均呈良好的正相關性[14，15]，表明酶法檢測GA簡便快速，且準確可靠。

因此，GA快速檢測法可反映糖尿病患者近期整體血糖水平，具有重要臨床價值。

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