直腸癌組織中CD133的表達及其臨床意義※

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直腸癌組織中CD133的表達及其臨床意義※

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目的直腸癌位于直腸內，是人類常見的消化道惡性腫瘤之一。癌干細胞理論的提出，使人們對腫瘤發生發展有了一個全新的認識。根據癌干細胞的理論，直腸癌組織內存在的少量癌干細胞，最終導致了腫瘤治療后的復發和轉移。通過癌干細胞的表面標記物，可幫助確定癌干細胞，并且研究標記物在直腸癌與正常直腸組織表達的不同，以及它的表達與不同臨床病理特點之間的關系。在本實驗中，對直腸癌患者組織標本中的癌干細胞標記物CD133進行研究。方法采用免疫組織化學法檢測 CD133蛋白表達與直腸癌臨床病理參數之間的關系，及它在癌組織和正常直腸組織中表達的不同特點。結果與正常直腸組織相比，直腸癌組織中CD133蛋白表達水平明顯升高。它的表達還與腫瘤Duke’s分期和TNM分期有明顯的相關性。臨床分期越高，腫瘤組織表達的CD133染色率越高。而且相對于無淋巴結轉移組，在有淋巴結轉移的樣本組，CD133的表達率明顯升高。結論人直腸癌中，癌干細胞標記物CD133可對患者的臨床病理特點做出評估，說明它在腫瘤的形成過程中起到一定的作用。

CD133；直腸癌；癌干細胞；干細胞；免疫組織化學

直腸癌位于直腸內，是人類常見的消化道惡性腫瘤之一。因其位于盆腔內，位置低，手術操作難度大，術后局部復發風險大，患者預后較差，而且與結腸癌相比，直腸癌的預后更差[1]。在我國直腸癌還具有著低位直腸癌發病率高、青年人所占比例高的特點[2]。最近癌干細胞的理論提出，認為腫瘤是一小部分存在腫瘤細胞中的癌干細胞（Cancer stem cell,CSC）導致的。無論手術還是化療，均無法徹底消滅這些少量的癌干細胞。在癌干細胞表面，有一些特殊表達的標記物，通過這些標記物，可把癌干細胞篩選出來。CD133就是癌干細胞的標記物之一。CD133（也稱為Prominin-1或AC133）是一個具有865個氨基酸的5跨膜糖蛋白，總分子量為120kDa。通過CD133單克隆抗體，人們在腦瘤[3]、胰腺癌[4]、肺癌[5]、結腸癌[6]組織中分離出癌干細胞。通過把CD133+結腸癌細胞亞群在體外移植到裸鼠身上，可形成與原代同樣理化性質的腫瘤[7]。在本實驗中，筆者通過對直腸癌患者組織中CD133表達進行研究，以此來探討它與腫瘤病理特征之間的關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 原發性直腸癌的組織標本取自2005年1月至2007年1月在牡丹江醫學院附屬紅旗醫院手術的病例。術前，所有患者未接受過如放療或化療任何類型的治療。40例標本中，有10例高分化，15例中分化，15例低分化腺癌。正常黏膜標本從距離直腸腫瘤至少有5cm遠處獲得。所有腫瘤的組織學和腫瘤臨床分期均由病理學專家完成。

1.2 評定標準 鏡下隨機選擇3～7區，查找染色細胞數（×200高倍視野）。出現20%以上的CD133染色的為陽性結果。由兩位病理專家分別獨立的對CD133染色結果進行評估。

1.3 統計學分析 采用SPSS 19.0軟件對所有數據進行分析。用χ2檢驗對CD133染色率與臨床病理參數之間的關系進行評估，以P＜0.05具有統計學意義。

2 結果

2.1 病例特點 40例患者中，男占50.0%（20/40），女占50.0%（20/40），平均年齡59.3歲（范圍35～69歲），男女比例為1:1。18例在60歲以上（45.0%），22例60歲以下（55.0%）。所有患者的診斷均為直腸腺癌，10例為高分化（25.0%），15例為中度分化（37.5%），15例為低分化（37.5%）。17例為Duke’s A＋B期（42.5%），23例在Duke’s C＋D期（57.5%）。同樣TNMⅠ＋Ⅱ期有17例（42.5%），TNMⅢ＋Ⅳ期有23例（57.5%）。有淋巴結轉移為21例（52.5%），無轉移的為19例（47.5%）（表1）。

表 1 患者特點[n(%)]

2.2 CD133在正常直腸組織與直腸癌組織中的表達特點 與正常直腸組織相比，CD133蛋白在直腸癌組織中表達明顯提高，有統計學意義。本研究發現CD133均在直腸癌組織中的細胞質中表達。在正常直腸組織中有6例出現了CD133的表達。發現染色率均≥20%。因此，規定CD133超過20%的陽性染色細胞為陽性，其余為陰性。CD133在正常直腸組織和直腸癌組織中的表達，結果見表2、圖1。

表2 ALDH1陽性表達的直腸癌組織與正常直腸組織的關系[n(%)]

圖 1 CD133免疫組化染色在直腸癌組織和正常直腸組織中的表達（a,在直腸癌中的表達；b,在直腸癌旁組織中的表達）

3 討論

腸癌是世界上最常見的惡性腫瘤之一，其中直腸癌又因其預后差，治療困難引起研究者的重視[8]。癌干細胞理論的提出，使筆者對腫瘤的發生、發展有了全新的認識。通過癌干細胞表面的標記物，可以將癌干細胞區分出來，并進行進一步研究。

在本研究中發現與正常直腸組織相比，直腸癌組織中CD133的表達明顯升高，這與O′Brien 等的研究結果一致[9]。而且CD133的表達與患者的年齡、性別、腫瘤大小、組織學分級無關。但卻表現出與腫瘤臨床分期：TNM分期和Duke’s 分期有關。臨床分期越高，CD133的染色率就越高。同時表達也與有無淋巴結轉移有明顯的關系，淋巴結轉移陽性的患者會表現出更多的CD133染色率。

總之，CD133的表達與直腸癌患者的臨床病理特征密切相關。通過對CD133表達的研究，可以更好地了解腫瘤細胞的臨床病理特點。只有通過癌干細胞的特異標記物準確的發現這些癌干細胞，才能在未來的治療中成功的將其消滅，從而從根本上治愈腫瘤。

[1] 李景南,趙莉,苗政,等.結腸癌和直腸癌發病模式和異同分析[J].中國實用內科雜志,2010,10(30):916-918.

[2] 周飛,寧曉婷.直腸癌組織中usp22的表達及其臨床意義[J].實用醫學雜志,2011,27(18):3281-3283.

[3] Singh SK,Hawkins C,Clarke ID,et al.Identification of human brain tumor initiating cells[J]. Nature,2004,432:396-401.

[4] Hermann PC,Huber SI,Herrler T,et al.Distinct populations of cancer stem cells determine tumor growth and metastatic activity in human pancreatic cancer[J].Cell Stem Cell,2007,1:313-323.

[5] Eramo A,Lotti F,Sette G,et al. Identification and expansion of the tumorigenic lung cancer stem cell population[J].Cell Death Differ, 2008,15:504-514.

[6] Ricci-Vitiani L,Lombardi DG,Pilozzi E,et al.Identification and expansion of human colon-cancer-initiating cells[J].Nature,2007, 445:111-115.

[7] Ieta K,Tanaka F,Haraguchi N,et al.Biological and genetic characteristics of tumor-initiating cells in colon cancer[J].Ann Surg Oncol,2008,15:638-648.

[8] Center MM,Jemal A,Ward E.International trends in colorectal cancer incidence rates [J]. Cancer Epidemiol Biomarkers Prev,2009, 18(6):1688-1694.

[9] O’Brien C.A.,Pollett A.,Gallinger S.,et al. A human colon cancer cell capable of initiating tumor growth in immunodeficient mice[J]. Nature,2007,445:106-110.

R735.3＋7

A

1673-5846(2014)02-0202-02

1牡丹江醫學院基礎醫學院組胚教研室，黑龍江牡丹江 157000

2黑龍江省齊齊哈爾市第一醫院腫瘤外科，黑龍江齊齊哈爾 161000

黑龍江省科技廳基金項目（編號：D201259）

張際緋，博士研究生導師。E-mail：Zhangjifei777@Yahoo.com.cn。