HPLC法測定天王補心丸丹參中丹參素鈉的含量

孫 雪

HPLC法測定天王補心丸丹參中丹參素鈉的含量

孫 雪

目的測定天王補心丸丹參中丹參素鈉的含量。方法用HPLC法定量測定天王補心丸中丹參的含量。結果丹參素鈉的線性范圍為12.8μg·mL-1～128.0μg·mL-1（r=0.9991，n=5）；平均回收率為94.6%。結論該方法準確可靠，可用于天王補心丸丹參中丹參素鈉的含量測定。

HPLC法；天王補心丸；丹參素鈉

天王補心丸的檢驗方法現收載于《中國藥典》2010年版二部[1]，由丹參等十六味中藥組成，其中丹參作為主藥，但該版藥典未對丹參進行定量檢測，本實驗采用HPLC法測定天王補心丸丹參中丹參素鈉的含量。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 Agilent1100高效液相色譜儀；BP110S電子天平。

1.2 試藥 甲醇為色譜純，水為純化水，其它試劑為分析純；丹參素鈉對照品（批號：11085-201205，中國藥品生物制品檢定所）；天王補心丸（赤峰丹龍藥業有限公司，批準文號：國藥準字 Z15021315，生產批號：20120908）。

2 含量測定

2.1 色譜條件[2]C18 200mm×4.65μm；以甲醇-1%冰醋酸（20:80）為流動相；檢測波長為281nm；檢測器：Agilent1100 DAD檢測器；工作站型號：G2170AA G2180AA；柱溫35℃。進樣量：10μl；流速：1.0ml/min，見圖1。

圖1 王補心丸HPLC色譜圖（a.對照品；b.樣品；c陰性對照）

2.2 對照品溶液的制備 精密稱定丹參素鈉對照品適量，加甲醇配成每1ml含丹參素64μg，即得。

2.3 供試品溶液的制備 取本品大蜜丸1.1g，置錐形瓶中，加50%甲醇加熱回流5h，放冷，過濾，至20ml的量瓶中，加 50%甲醇至刻度，進樣前就0.45μm濾過。

2.4 陰性對照溶液的制備 按處方比例制成陰性對照品，同供試品的制備方法制成陰性對照溶液。

2.5 線性關系的考查 精密稱定丹參素鈉對照品0.01288g，置100ml容量瓶中，加50%甲醇溶解至刻度，搖勻，做為貯備溶液，分別吸取1、2、3、5、10ml，置10ml容量瓶中，分別加甲醇稀釋至刻度，搖勻。按上述色譜條件測定，得回歸方程：Y=1.45 ×104X－9.955×103，r=0.9991。結果表明，丹參素鈉在12.8μg·mL-1～128.0μg·mL-1范圍內具有良好的線性關系。

2.6 精密度試驗 精密吸取上述對照溶液10μl，連續進樣5次，記錄峰面積，RSD為0.75%（n=5）。結果表明儀器具有良好的精密度。

2.7 重復性試驗 取供試品（批號：101102），照2.1方法配制5份供試液，按上述條件測定，每丸含丹參按丹參素鈉計，大蜜丸為0.560mg，RSD為0.45%（n=5）。結果表明重復性良好。

2.8 穩定性試驗 精密吸取同一批供試品溶液各10μl，分別在0、3、6、9、12、18h測定峰面積值的變化，結果RSD為0.8%。

2.9 加樣回收率試驗 精密稱取已知丹參素鈉含量的天王補心丸（批號：120507）6份，每份稱重約為 0.55g，分別精密加入丹參素鈉對照品溶液（0.28mg/ml）1.0ml，照2.3制備待測溶液，按2.1測定，結果平均回收率為94.6%，RSD為1.9%。測定結果見表1。

表1 天王補心丸中丹參素鈉加樣回收試驗結果

3 討論

3.1 用紫外分光光度計進行掃描，結果在281nm處該溶液的吸收度最高，將測定波長選定在281nm 波長處，此波長對紫外吸收靈敏。

3.2 在進行含量測定時選用三種流動相進行比較：甲醇-水-冰醋酸（8:91:1）、以甲醇-1%冰醋酸（20:80）、甲醇-1%冰醋酸（12:88），實驗證明采用以甲醇-1%冰醋酸（20:80）作為流動相能得到最佳的分離效果，分離度好，保留時間合適，無拖尾現象。

3.3 供試品溶液的制備用分別加熱回流2h、3h、5h、6h，結果回流5h、6h有效成份提取更加完全，但是回流5h、6h結果無差別，因此選擇用回流5h。實驗結果表明所用此方法能更有效地測定天王補心丸丹參中丹參素鈉的含量。

[1] 中華人民共和國藥典委員會.中華人民共和國藥典[S].一部.北京:中國醫藥科技出版社,2010:70,97,313,372.

[2] 傅黎春,李桃英,彭棟梁.HPLC法測定丹棗口服液中丹參素及原兒茶醛的含量[J].中國藥師,2009,12(1):72-73.

R927.2

A

1673-5846(2014)02-0035-02

衡水市食品藥品檢驗所，河北衡水 053000

孫雪（1973-），女，本科，副主任藥師。