郭 立
丹參提取物中酚酸類含量的快速檢測方法分析
郭 立
目的對丹參提取物中酚酸類含量的快速檢測方法進行分析探討,為今后的藥學研究工作提供可靠的參考依據。方法將丹酚酸B作為對照,經分光光度法在482nm處對丹參提取物中的酚酸類物質的含量進行測定。結果經統計,所建立的方法中,丹酚酸B在0.0782~1.0166mg內存在良好的線性關系,r=0.9997,回收率為100.93%,RSD為0.79%。丹參提取物中酚酸類物質的含量為19.58%。結論經分光光度法對丹參提取物中酚酸類含量進行測定時具有操作簡單、迅速、結果準確可靠,在丹參中總酚酸含量測定中可發揮重要作用,值得關注。
丹參提取物;丹酚酸;分光光度法;檢測
隨著現代藥理研究的不斷發展與完善,人們對丹參有效成分的研究逐漸深入,曾有文獻報道,丹參提取物中酚酸類成分可產生良好的縮小心肌梗死范圍的效果[1]。本文對丹參提取物中酚酸類含量的快速檢測方法進行分析探討,采取分光光度法,以丹酚酸B作為對照展開丹參提取物中酚酸類成分進行了檢測,現匯報如下。
1.1 實驗儀器 所用儀器包括UV-1601紫外-可見分光光度計、BUG25-12 超聲波清洗機、數顯恒溫水浴鍋、AEG-45SM 電子天平、BP121S 電子天平。
1.2 試藥 所需試藥包括丹參藥材提取物,丹酚酸B對照品,所需試劑均為分析純。
2.1 溶液制備
2.1.1 對照品溶液的制備 精稱1.6mg丹酚酸B對照品,將其放置在10ml的容量瓶中,經濃度為75%的甲醇進行溶解,而后定容至刻度,所得溶液為每1ml中含有0.16mg丹酚酸B對照品。
2.1.2 供試品溶液制備 精稱0.02g丹參提取物粉末,經沸水溶解,而后冷卻至室溫,在 25ml的容量瓶中定容,搖勻后備用[2]。
2.2 線性關系考察 精密移取上述配制好的對照品溶液0.5、1.0、2.0、4.0、6.0、6.5ml,放置于25ml容量瓶中,分別按照順序加入濃度為5%的NaNO23ml、濃度為10%的Al(NO3)30.5ml以及15ml的NaOH試液。經水定容,搖勻后放置5min,而后在482nm的波長下對各溶液的吸光度進行檢測。將丹酚酸B濃度作為橫坐標,吸光度作為縱坐標,展開線性回歸。最終得到回歸方程為:Y=0.8121X+ 0.0325,r=0.9997。證實丹酚酸 B濃度在0.0782~1.0166mg內存在良好的線性關系。
2.3 精密度實驗 精密吸取2.1項配制的丹酚酸B對照品溶液5ml,放置于25ml的容量瓶中,以2.2所示顯色條件進行供試品溶液制備,并在482nm波長下展開吸光度檢測,連續測定6次,計算RSD值,結果發現,本次實驗的RSD值為0.008%,證實儀器具有良好的精密度。
2.4 穩定性實驗 精稱丹參提取物粉末0.02g,以2.1所示條件配制成供試品溶液,取 5ml,以 2.2所示顯色條件進行溶液配制,而后分別在0.0、0.5、1.0、1.5、3.0、4.0、8.0、12.0、24.0h后在482nm條件下進行吸光度測定。結果發現,該組樣品在24h內酚酸含量平均為19.541%,RSD值為3.24%;在12h內丹酚酸含量平均值為19.721%,RSD值為1.65%。證實樣品供試品溶液在顯色12h內穩定性良好。
2.5 重現性實驗 精密稱定丹參提取物粉末0.025g,共5份,將其按照2.1所示條件配制成供試品溶液,取供試品 5ml,經 2.2所示條件進行顯色后在 482nm波長下對吸光度進行檢測。經統計發現。5份樣品中丹酚酸的含量平均為19.421%,RSD為1.19%,證實該實驗具有良好的重現性。
2.6 加樣回收實驗 精密稱定6份已知含量的丹參提取物,分別加入已知含量的對照品,而后經 2.1所示條件制成供試品溶液,移取5ml后以2.2所示條件進行顯色,而后經482nm波長下展開吸光度測定,計算加樣回收率,結果詳見表1。
2.7 樣品含量測定 取3批丹參提取物樣品,經2.1所示條件配制成供試品,取5ml,經2.2所示條件顯色后在482nm波長下對吸光度進行檢測,計算樣品中丹酚酸含量。結果發現,3批次樣品中丹酚酸含量分別為19.981%、19.523%、19.521%,平均值為19.675%。

表1 加樣回收實驗結果統計
中藥材丹參為唇形科植物丹參的干燥塊莖,主要功效為活血祛瘀、清心除煩、通經止痛、涼血消癰等,在胸痹心痛、癥瘕積聚、脘腹脅痛、熱痹疼痛、月經不調、心煩不眠、痛經經閉以及瘡瘍腫痛等癥狀中具有良好的治療效果[3]。現代藥理研究表明,丹參中酚酸類有效成分在疾病治療中發揮了重要作用,本次實驗中,經分光光度法對丹參提取物中酚酸類成分進行測定,結果發現,本次試驗所選擇的條件具有良好的精密度、重現性,線性關系理想,樣品在12h內具有良好穩定性,在今后的藥學研究中值得關注與推廣。
[1] 程忠洲,屈英格,李華,等.光度法研究姜黃素與鐵(Ⅲ)的絡合反應[J].西北大學學報(自然科學版),2010,40(04):627-630.
[2] 鄧瑞,張靜,羅維早,等.RRLC-UV同時測定川白芷中6種香豆素類成分的含量[J].中國中藥雜志,2010,17(23):3184-3187.
[3] 王偉,李焱,謝曉梅,等.高效液相色譜法同時測定丹參中4種酚酸類成分的含量[J].安徽醫藥,2010,14(11):1276-1278.
R927.1
A
1673-5846(2014)02-0025-02
吉林省集安益盛藥業,吉林通化 134200