復方甲硝唑凝膠體外釋放度考察

王正軍　呂明

[摘 要] 目的：研究復方甲硝唑凝膠的體外釋放規律，建立其體外藥物釋放度分析方法。方法：采用體外溶出度試驗以甲硝唑為含量測定指標，分析復方甲硝唑凝膠中甲硝唑的累積溶出度。結果：復方甲硝唑凝膠30min釋藥累積溶出量為28.7%，其釋放過程符合對數正態分布模型。結論：該方法簡便、科學合理，可作為凝膠劑體外釋藥規律研究。

[關鍵詞] 復方甲硝唑凝膠；甲硝唑；體外釋放度；高效液相色譜

中圖分類號：R984 文獻標識碼：B 文章編號：2095-5200（2014）03-078-02

[Abstract] Objective：Study in vitro release rate of Compound Metronidazole Gel， establish the method of determination in vitro release rate. Method：With Metronidazole as the standard， the in vitro release test applied to determine the accumulated dissolution rate of Metronidazole in Compound Metronidazole Gel. Result：The accumulated dissolution rate of the Compound Metronidazole Gel was over 28.7% in 30min， Metronidazole could be sustained released over 12 hours. The released rate of Compound Metronidazole Gel was best consistent with log-normal distribution equation. Conclusion：The method is simple， reasonable. It is suitable for determination of Compound Metronidazole Gel in vitro release.

[Key words] Compound Metronidazole Gel；Metronidazole；Release in vitro；HPLC

復方甲硝唑凝膠（Compound Metronidazole Gel）是我院在復方甲硝唑栓基礎上根據患者用藥需求研發一種制劑[1]。傳統栓劑易受體溫影響且無法持續恒定釋藥，栓劑融化后基質呈液狀流出，造成對患者皮膚和衣物的污染。復方甲硝唑凝膠是由醋酸氯己定（chlorxidine acetate）、甲硝唑（2-甲基-5-硝基咪唑-1-乙醇）、克霉唑（三苯甲咪唑）與卡波姆（丙烯酸鍵合烯丙基蔗糖或季戊四醇丙醚的高分子聚合物）等基質輔料經凝膠制備工藝制成的白色半透明固體水溶性凝膠，主要用于陰道霉菌感染。臨床用藥證實該凝膠能使藥物在人體部位的持續時間更長，能持續穩定釋放藥物，生物利用度優于陰道栓[2]。本研究在前期研究基礎上，采用高效液相色譜法，對本制劑進行了藥物體外釋放度的考察，擬進一步研究其釋藥規律。

1 儀器與試藥

U3000高效液相色譜儀（DAD紫外檢測器，自動進樣器，戴安公司）；DV215CD 型電子分析天平（OHAUS公司）；ZRS-8G型智能藥物溶出儀（天津大學無線電廠）；SK5200H超聲波清洗器（上海科導超聲儀器有限公司）；PHS-3C型精密pH計（上海雷磁）；甲硝唑對照品（中國食品藥品檢定研究院，批號：0191 9804）；復方甲硝唑凝膠（自制，規格：5g/支，標示量10.0mg·g-1）；復方甲硝唑栓（自制，規格：5g/支，標示量10.0mg·g-1）；水為雙蒸水；其他試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 色譜條件[3，4]

色譜柱：LUNA C18色譜柱（4.6mm×150mm，5?m）；流動相：乙腈-三乙胺-水（70：0.5：30）；流速0.8mL·min-1；柱溫：30℃；檢測波長261nm；進樣量10?L。甲硝唑色譜峰理論塔板數不小于2500，分離度良好。

2.2 對照品溶液的制備

精密稱取經減壓干燥至恒重的甲硝唑對照品適量，用流動相稀釋并溶解，制成每1mL含甲硝唑1.86mg的溶液。

2.3 線性關系考察

精密吸取對照品溶液1、2、4、6、8、10mL，分別置10mL量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻。按2.1色譜條件測定，其色譜圖如圖1所示。以甲硝唑濃度C為橫坐標，甲硝唑色譜峰面積A為縱坐標，進行線性回歸，得回歸方程：A=60.383C+2.1779，r=0.9998，表明甲硝唑在0.186～1.860mg·mL-1濃度范圍內線性關系良好。

2.4 精密度試驗

取對照品溶液，按相同色譜條件連續測定5次，計算甲硝唑色譜峰面積RSD為1.62%，表明該方法精密度良好。

2.5 穩定性試驗

取2.6項下的供試品溶液，按同一色譜條件，在0、1、2、4、8、12h進樣測定甲硝唑色譜峰面積，結果其RSD為1.83%，表明12h內供試品溶液的穩定性良好。

2.6 體外釋放度測定

參考相關文獻[5-8]，照《中國藥典》2010年版（二部）附錄ⅩC溶出度測定法項下操作[9]，以0.1mol·L-1 HCl 250mL作為介質，溫度為37±0.5℃，轉速為60r·min-1。取復方甲硝唑凝膠6支，復方替硝唑栓6粒，投入不同燒杯，每隔一段時間吸取溶液5mL，并及時補充相同的等溫等體積空白介質溶液。微孔濾膜濾過后，作為供試品溶液，進樣10?L，測定峰面積。計算復方甲硝唑凝膠和復方甲硝唑栓各時間點甲硝唑累積釋放量，并對時間作圖，結果見圖2。endprint

根據釋放曲線，復方甲硝唑栓在1h內就已全部釋放，而復方甲硝唑凝膠1h時藥物累積溶出量約為28.7%，并且12h后仍能釋藥。將復方硝唑水凝膠體外釋放曲線按Higuchi方程和對數正態分布函數進行曲線擬合，結果見表1。復方甲硝唑凝膠藥物體外釋放符合對數正態分布模型，表明其具有良好的緩釋效果，可持續釋放藥物，符合臨床用藥需求。

Q：甲硝唑體外累積釋放量；t：甲硝唑體外釋放時間。

3 討論

3.1 由于臨床需要，復方甲硝唑凝膠中有其他藥物，在研究質量標準時，已同時測定該兩種成分。本實驗主要考察制劑的體外釋藥規律，故只以甲硝唑為指標。選用0.1mol·L-1HCl作為溶出介質，主要是考慮到女性陰道內pH值呈酸性，使模擬體外釋藥環境更貼近真實體內環境。

3.2 卡波姆是新型藥用輔料，為聚烷基蔗糖與丙烯交聯聚合物的共聚物，易溶于水，可形成酸性膠體。在pH 6-10時卡波姆凝膠粘度最大，對制劑特別是凝膠性能的改良，生物利用度的提高及藥物的緩釋等都有明顯作用。另外，泊洛沙姆（poloxamer，聚氧乙烯聚氧丙烯醚嵌段共聚物，一種新型的高分子非離子表面活性劑）也為本凝膠的重要基質，為溫度收縮型水凝膠的優良基質，當泊洛沙姆與卡波姆比例一定時，其膠凝溫度控制在37℃ 以內，在人體直腸或陰道給藥后很快發生膠凝，藥物和基質不會從腔道內遺漏出來[10]。卡波姆和泊洛沙姆無致敏性、刺激性，化學性質穩定，廣泛用于口服、外用。復方甲硝唑水凝膠栓使用后陰道局部濃度高，臨床療效較好。

參 考 文 獻

[1] 徐黎穎.高效液相色譜法測定甲硝唑片中甲硝唑含量的不確定度評定[J].首都醫藥，2013，20（12）：60-61.

[2] 盧毅，張彤，陶建生.卡波姆在藥劑學中的應用[J].中國醫藥工業雜志，2007，38（6）：457-460.

[3] 徐蓮琴，王玉華，鄭億，等.RP-HPLC法測定復方甲硝唑涂劑中甲硝唑和醋酸潑尼松的含量[J].中國藥房，2013，24（13）：1218-1219.

[4] 何心，石春偉，張闖，等.復方甲硝唑緩釋栓的制備及體外釋放度考察[J].中國藥房，2011，22（9）：834-836.

[5] 唐素芳.藥品溶出度測定中的影響因素分析[J].天津藥學，2009，21（1）：72-74.

[6] 謝沐風.溶出曲線相似性的評價方法[J].中國醫藥工業雜志，2009，40（4）：308-311.

[7] 柯玲玲，游娟娟，唐直婕，等.阿霉素凝膠體外釋放度的測定[J].光譜實驗室，2013，30（3）：1519-1522.

[8] 顧玲玲，李俊麗，劉小平，等.烏頭堿溫敏凝膠的制備及其體外評價[J].中國醫藥導報，2012，9（34）：115-117.

[9] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（二部部）[S].北京：化學工業出版社，2010：附錄75

[10] 周巧云，張朝暉，潘俊芳，等.泊洛沙姆為載體的疏水性藥物新劑型研究進展[J].中國現代應用藥學，2011，28（4）：315-319.endprint

根據釋放曲線，復方甲硝唑栓在1h內就已全部釋放，而復方甲硝唑凝膠1h時藥物累積溶出量約為28.7%，并且12h后仍能釋藥。將復方硝唑水凝膠體外釋放曲線按Higuchi方程和對數正態分布函數進行曲線擬合，結果見表1。復方甲硝唑凝膠藥物體外釋放符合對數正態分布模型，表明其具有良好的緩釋效果，可持續釋放藥物，符合臨床用藥需求。

Q：甲硝唑體外累積釋放量；t：甲硝唑體外釋放時間。

3 討論

3.1 由于臨床需要，復方甲硝唑凝膠中有其他藥物，在研究質量標準時，已同時測定該兩種成分。本實驗主要考察制劑的體外釋藥規律，故只以甲硝唑為指標。選用0.1mol·L-1HCl作為溶出介質，主要是考慮到女性陰道內pH值呈酸性，使模擬體外釋藥環境更貼近真實體內環境。

3.2 卡波姆是新型藥用輔料，為聚烷基蔗糖與丙烯交聯聚合物的共聚物，易溶于水，可形成酸性膠體。在pH 6-10時卡波姆凝膠粘度最大，對制劑特別是凝膠性能的改良，生物利用度的提高及藥物的緩釋等都有明顯作用。另外，泊洛沙姆（poloxamer，聚氧乙烯聚氧丙烯醚嵌段共聚物，一種新型的高分子非離子表面活性劑）也為本凝膠的重要基質，為溫度收縮型水凝膠的優良基質，當泊洛沙姆與卡波姆比例一定時，其膠凝溫度控制在37℃ 以內，在人體直腸或陰道給藥后很快發生膠凝，藥物和基質不會從腔道內遺漏出來[10]。卡波姆和泊洛沙姆無致敏性、刺激性，化學性質穩定，廣泛用于口服、外用。復方甲硝唑水凝膠栓使用后陰道局部濃度高，臨床療效較好。

參 考 文 獻

[1] 徐黎穎.高效液相色譜法測定甲硝唑片中甲硝唑含量的不確定度評定[J].首都醫藥，2013，20（12）：60-61.

[2] 盧毅，張彤，陶建生.卡波姆在藥劑學中的應用[J].中國醫藥工業雜志，2007，38（6）：457-460.

[3] 徐蓮琴，王玉華，鄭億，等.RP-HPLC法測定復方甲硝唑涂劑中甲硝唑和醋酸潑尼松的含量[J].中國藥房，2013，24（13）：1218-1219.

[4] 何心，石春偉，張闖，等.復方甲硝唑緩釋栓的制備及體外釋放度考察[J].中國藥房，2011，22（9）：834-836.

[5] 唐素芳.藥品溶出度測定中的影響因素分析[J].天津藥學，2009，21（1）：72-74.

[6] 謝沐風.溶出曲線相似性的評價方法[J].中國醫藥工業雜志，2009，40（4）：308-311.

[7] 柯玲玲，游娟娟，唐直婕，等.阿霉素凝膠體外釋放度的測定[J].光譜實驗室，2013，30（3）：1519-1522.

[8] 顧玲玲，李俊麗，劉小平，等.烏頭堿溫敏凝膠的制備及其體外評價[J].中國醫藥導報，2012，9（34）：115-117.

[9] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（二部部）[S].北京：化學工業出版社，2010：附錄75

[10] 周巧云，張朝暉，潘俊芳，等.泊洛沙姆為載體的疏水性藥物新劑型研究進展[J].中國現代應用藥學，2011，28（4）：315-319.endprint

根據釋放曲線，復方甲硝唑栓在1h內就已全部釋放，而復方甲硝唑凝膠1h時藥物累積溶出量約為28.7%，并且12h后仍能釋藥。將復方硝唑水凝膠體外釋放曲線按Higuchi方程和對數正態分布函數進行曲線擬合，結果見表1。復方甲硝唑凝膠藥物體外釋放符合對數正態分布模型，表明其具有良好的緩釋效果，可持續釋放藥物，符合臨床用藥需求。

Q：甲硝唑體外累積釋放量；t：甲硝唑體外釋放時間。

3 討論

3.1 由于臨床需要，復方甲硝唑凝膠中有其他藥物，在研究質量標準時，已同時測定該兩種成分。本實驗主要考察制劑的體外釋藥規律，故只以甲硝唑為指標。選用0.1mol·L-1HCl作為溶出介質，主要是考慮到女性陰道內pH值呈酸性，使模擬體外釋藥環境更貼近真實體內環境。

3.2 卡波姆是新型藥用輔料，為聚烷基蔗糖與丙烯交聯聚合物的共聚物，易溶于水，可形成酸性膠體。在pH 6-10時卡波姆凝膠粘度最大，對制劑特別是凝膠性能的改良，生物利用度的提高及藥物的緩釋等都有明顯作用。另外，泊洛沙姆（poloxamer，聚氧乙烯聚氧丙烯醚嵌段共聚物，一種新型的高分子非離子表面活性劑）也為本凝膠的重要基質，為溫度收縮型水凝膠的優良基質，當泊洛沙姆與卡波姆比例一定時，其膠凝溫度控制在37℃ 以內，在人體直腸或陰道給藥后很快發生膠凝，藥物和基質不會從腔道內遺漏出來[10]。卡波姆和泊洛沙姆無致敏性、刺激性，化學性質穩定，廣泛用于口服、外用。復方甲硝唑水凝膠栓使用后陰道局部濃度高，臨床療效較好。

參 考 文 獻

[1] 徐黎穎.高效液相色譜法測定甲硝唑片中甲硝唑含量的不確定度評定[J].首都醫藥，2013，20（12）：60-61.

[2] 盧毅，張彤，陶建生.卡波姆在藥劑學中的應用[J].中國醫藥工業雜志，2007，38（6）：457-460.

[3] 徐蓮琴，王玉華，鄭億，等.RP-HPLC法測定復方甲硝唑涂劑中甲硝唑和醋酸潑尼松的含量[J].中國藥房，2013，24（13）：1218-1219.

[4] 何心，石春偉，張闖，等.復方甲硝唑緩釋栓的制備及體外釋放度考察[J].中國藥房，2011，22（9）：834-836.

[5] 唐素芳.藥品溶出度測定中的影響因素分析[J].天津藥學，2009，21（1）：72-74.

[6] 謝沐風.溶出曲線相似性的評價方法[J].中國醫藥工業雜志，2009，40（4）：308-311.

[7] 柯玲玲，游娟娟，唐直婕，等.阿霉素凝膠體外釋放度的測定[J].光譜實驗室，2013，30（3）：1519-1522.

[8] 顧玲玲，李俊麗，劉小平，等.烏頭堿溫敏凝膠的制備及其體外評價[J].中國醫藥導報，2012，9（34）：115-117.

[9] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（二部部）[S].北京：化學工業出版社，2010：附錄75

[10] 周巧云，張朝暉，潘俊芳，等.泊洛沙姆為載體的疏水性藥物新劑型研究進展[J].中國現代應用藥學，2011，28（4）：315-319.endprint