測定注射用頭孢哌酮鈉中頭孢哌酮含量的高效液相色譜法

柯紅玲

摘要：

目的：對高效液相色譜法測定注射用頭孢哌酮鈉中頭孢哌酮含量的結果進行分析探討，為今后的藥學研究工作提供可靠的參考依據。方法： 選用十八烷基硅烷鍵合硅膠作為填充劑，流動相為水：乙腈：1N醋酸：三乙胺冰醋酸溶液（876：120：2.8：1.2），檢測波長為254nm，進樣量為10ul。結果： 線性關系考察結果顯示，頭孢哌酮的濃度在80-320ug/ml的范圍內線性關系良好，r=0.9999；加樣回收實驗證實平均回收率為99.87%；RSD值為0.05%。結論： 經高效液相色譜法對注射用頭孢哌酮鈉中頭孢哌酮含量進行測定的方法準確可靠，具有較強的專屬性，在注射液質控中可發揮重要作用。

關鍵詞：高效液相色譜法；注射用頭孢哌酮鈉；頭孢哌酮 ；含量測定

【中圖分類號】

R453 【文獻標識碼】B 【文章編號】1002-3763（2014）05-0071-01

目前臨床上應用的注射用頭孢哌酮鈉屬于第三代頭孢菌素類抗生素，其主要作用機制為通過對細菌細胞壁合成進行機制而實現殺菌的效果。相對于第一代、第二代頭孢菌素具有更強的殺菌效果，且屬于光譜抗菌藥物，在臨床上的應用較為廣泛。《中國藥典》2010版中規定采取高效液相色譜法對注射用頭孢哌酮鈉進行質量控制^[1]。本次實驗中采取高效液相色譜法對主要用頭孢哌酮鈉中的頭孢哌酮含量進行了測定，現匯報結果如下。

1 實驗儀器與材料

1.1 實驗儀器：

所用儀器為我實驗室現有的安捷倫高效液相色譜儀，以及相配套的高壓輸送泵、紫外檢測器以及色譜工作站。實驗中還會用到電子天平。

1.2 實驗材料：

所用試劑包括：注射用頭孢哌酮鈉，頭孢哌酮鈉對照品，乙腈、1N醋酸、三乙胺冰醋酸均為色譜純，實驗用水。

2 方法與結果

2.1 色譜條件：

所用色譜柱為十八烷基硅烷鍵合硅膠填充柱，流動相為水：乙腈：1N醋酸：三乙胺冰醋酸溶液（876：120：2.8：1.2），流速為2.0ml/min，檢測波長為254nm，進樣量為10ul，柱溫為40℃。

2.2 溶液制備

2.2.1 對照品溶液制備：

精稱16mg頭孢哌酮對照品，放置在100ml的容量瓶中，經流動相溶解并定容至刻度，搖勻備用。

2.2.2 供試品溶液制備：

取注射用頭孢哌酮鈉10支，將其混勻后精密稱取1034mg，放置在1000ml的容量瓶中，經水溶解后定容至刻度，精密量取該溶液16ml，在100ml的容量瓶中經流動相溶解并定容至刻度，搖勻后備用。

2.3 系統適用性實驗

2.3.1 精密度實驗：

取2.2.1配制的對照品10ul，連續6次進樣檢測，記錄色譜圖，計算頭孢哌酮主峰面積的RSD值，結果得RSD值為0.052%，精密度良好。

2.3.2 線性關系考察：

精稱32.15mg的對照品，經流動相溶解后定容至100ml容量瓶中，搖勻后，精取2.5、3.75、5、7.5、10ml，放置在10ml的容量瓶中，經流動相稀釋定容，而后分別取10ul進樣檢測，記錄色譜圖，以樣品濃度作為橫坐標，峰面積作為縱坐標做回歸方程，本次實驗中，頭孢哌酮濃度在80-320ug/ml的范圍內線性關系良好，回歸方程為：Y=6.938X×10-5+1.441×10-4，r=0.9999。

2.3.3 加樣回收實驗：

在已知濃度的樣品中加入一定量的頭孢哌酮對照品，在2.1所示色譜條件下進樣檢測，計算回收率。本次加樣回收實驗中，頭孢哌酮的平均回收率為99.87%，RSD值為0.05%。

2.4 不同批次樣品測定：

取3個批次的注射用頭孢哌酮鈉各10支，按照2.2.2所示條件配制成供試品溶液，10ul進樣檢測，經計算發現，3個批次的注射用頭孢哌酮鈉中頭孢哌酮的百分含量分別為100.9%、101.1%、100.9%，均符合標準，屬于合格品。

3 討論

目前對于藥品質量控制工作而言，高效液相色譜法發揮了重要的作用，對流動相、色譜柱進行合理的選擇，并嚴格篩選出色譜條件后，可為藥品質量控制工作提供可靠的參考依據^[2]。本次實驗中，出于對高效液相色譜法測定注射用頭孢哌酮鈉中頭孢哌酮含量的結果進行分析探討的目的，經以下色譜條件（所用色譜柱為十八烷基硅烷鍵合硅膠填充柱，流動相為水：乙腈：1N醋酸：三乙胺冰醋酸溶液（876：120：2.8：1.2），流速為2.0ml/min，檢測波長為254nm，進樣量為10ul，柱溫為40℃）對注射用頭孢哌酮鈉中的頭孢哌酮含量進行了測定，通過一系列的系統性實驗證實，該色譜條件在測定頭孢哌酮含量時具有良好的系統適用性，精密度良好，回收率高，且在一定濃度范圍內線性關系較為理想^[3]。樣品測定結果顯示，頭孢哌酮含量較高，符合標準，均為合格品^[4]。

綜上所述，上述高效液相色譜條件適合對注射用頭孢哌酮鈉中頭孢哌酮含量進行測定，結果準確可靠，對于注射液質量控制工作而言意義重大，值得關注。

參考文獻

[1] 李毅，柳世萍.HPLC測定注射用頭孢哌酮鈉、舒巴坦鈉的含量[J].河北化工，2011，12（10）：342-344.

[2] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典：二部[S].北京：中國醫藥科技出版社，2010：121.

[3] 梅群，李應芬，謝桂芬，等.HPLC法測定注射用頭孢哌酮鈉有關物質的改進[J].中國藥師，2008，13（08）：672-674.

[4] 黃莉，萬江陵.HPLC法測定注射用頭孢哌酮鈉舒巴坦鈉中兩組分的含量和有關物質[J].化學與生物工程，2011，14（01）：786-787.