乙型肝炎病毒的臨床檢驗(yàn)

黃顯春

（重慶市渝北區(qū)第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，重慶 401147）

乙型肝炎病毒的臨床檢驗(yàn)

黃顯春

（重慶市渝北區(qū)第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，重慶 401147）

目的討論定量檢測(cè)和定性檢測(cè)乙型肝炎病毒五項(xiàng)血清學(xué)標(biāo)志物的結(jié)果，為臨床檢驗(yàn)提供一定的理論依據(jù)。方法對(duì)從2011年8月至2013年7月到我院住院或門(mén)診就診乙型肝炎100例患者進(jìn)行乙型肝炎病毒五項(xiàng)血清學(xué)標(biāo)志物得定量與定性檢測(cè)，進(jìn)行回顧性分析。結(jié)果乙型肝炎五項(xiàng)指標(biāo)中HBsAg、HBsAb、HBeAg、HbcAb的定量檢測(cè)優(yōu)于定性檢測(cè)，但在例數(shù)上無(wú)顯著性差異（P>0.05），HBeAb的定量和定性檢測(cè)結(jié)果具有顯著性差異（P<0.01）。結(jié)論CLIA定量分析靈敏性和特異性更高，可以很好的彌補(bǔ)乙型肝炎定性檢驗(yàn)的不足，具有一定的臨床實(shí)用價(jià)值和發(fā)展前景。

乙型肝炎；乙型肝炎五項(xiàng)；定量檢測(cè)；定性檢測(cè)

乙型肝炎是由乙型肝炎病毒（HBV）引起的一種肝臟炎性病變，廣泛流行于世界各國(guó)，有文獻(xiàn)報(bào)道全球約1/2的人口生活在乙型肝炎病毒高流行區(qū)，約20億人被證實(shí)有HBV感染，3～4億人為HBV慢性感染，每年約有100萬(wàn)人死于HBV感染所致的肝衰竭、肝硬化和原發(fā)性肝細(xì)胞癌（HCC）[1-4]，其顯然已成為嚴(yán)重威脅世界人類(lèi)健康的疾病，也是當(dāng)前流行最為廣泛、危害性最為嚴(yán)重的一種疾病。乙型肝炎分急性和慢性兩種，急性患者在成年人中90%可自愈，而慢性患者則可分為慢性乙型肝炎攜帶者、慢性活動(dòng)性乙型肝炎、乙型肝炎肝硬化等。

目前乙型肝炎病毒的臨床檢驗(yàn)最常見(jiàn)的方法是進(jìn)行“乙型肝炎抗原二對(duì)半”驗(yàn)血體檢，二對(duì)半包括5項(xiàng)內(nèi)容：乙型肝炎表面抗原、乙型肝炎表面抗體、乙型肝炎e抗原、乙型肝炎e抗體、乙型肝炎核心抗體，簡(jiǎn)稱“乙型肝炎五項(xiàng)”。檢驗(yàn)方法分為可以定性的方法如酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）等，以及可以定量的方法如化學(xué)發(fā)光免疫分析法（CLIA）等。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)只能提供陽(yáng)性或陰性結(jié)果，且易出現(xiàn)假陰性，干擾臨床診斷；定量檢測(cè)乙型肝炎五項(xiàng)則能提供乙型肝炎病毒標(biāo)志物的精確含量，為臨床檢驗(yàn)提供有益指導(dǎo)，在臨床使用上具有較大的實(shí)用性[5,6]?，F(xiàn)就我院從2011年8月至2013年7月住院或門(mén)診就診的乙型肝炎患者的臨床檢驗(yàn)進(jìn)行回顧性分析，將乙型肝炎五項(xiàng)定性檢測(cè)與定量檢測(cè)的結(jié)果作對(duì)比，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：選擇從2011年8月至2013年7月到我院住院或門(mén)診就診乙型肝炎患者100例。其中男58例，女42例，年齡范圍15～68歲，平均年齡（34.7±6.4）歲。

1.2 方法：分別取5 mL患者靜脈血，立即離心分離，得到血清于-30 ℃環(huán)境下冷凍保存。ELISA法和CLIA法使用的試劑由深圳市安群生物工程有限公司生產(chǎn)。ELISA法使用550酶標(biāo)儀（美國(guó)Bio-Rad公司，美國(guó)），CLIA法使用KPS-KM化學(xué)發(fā)光免疫分析儀（石家莊康普生科技有限公司，石家莊，中國(guó)）。分別使用CLIA法和ELISA法對(duì)100例樣本進(jìn)行乙型肝炎病毒五項(xiàng)血清學(xué)標(biāo)志物的定量與定性檢測(cè)；設(shè)定乙型肝炎病毒五項(xiàng)血清學(xué)標(biāo)志物第1～5項(xiàng)的順序?yàn)椋阂倚透窝妆砻婵乖℉BsAg）、乙型肝炎表面抗體（HBsAb）、乙型肝炎e抗原（HBeAg）、乙型肝炎e抗體（HBeAb）、乙型肝炎核心抗體（HBcAb）。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：采用SPSS 15.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05認(rèn)為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

乙型肝炎五項(xiàng)指標(biāo)定性與定量檢測(cè)結(jié)果詳見(jiàn)表l。由結(jié)果可知，HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBcAb的定量檢測(cè)優(yōu)于定性檢測(cè)，但在例數(shù)上無(wú)顯著性差異（P>0.05），HBeAb的定量和定性檢測(cè)結(jié)果具有顯著性差異（P<0.01）。

3 討 論

乙型肝炎病毒五項(xiàng)血清學(xué)指標(biāo)的變化是評(píng)估乙型肝炎患者病情轉(zhuǎn)歸的重要依據(jù)，也是考察療效的指標(biāo)之一。乙型肝炎病毒五項(xiàng)標(biāo)志物檢測(cè)方法有許多，目前廣泛用于臨床的有酶聯(lián)免疫檢驗(yàn)法、免疫熒光測(cè)定技術(shù)、化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)、PCR技術(shù)等。酶聯(lián)免疫檢驗(yàn)法是一種特殊的試劑分析方法，是在免疫酶技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一種新型的免疫測(cè)定技術(shù)。因其具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、操作簡(jiǎn)便等特點(diǎn)，因此被廣泛應(yīng)用各項(xiàng)臨床檢驗(yàn)[7,8]。但是，由于ELISA對(duì)乙型肝炎五項(xiàng)血清標(biāo)志物只能定性檢測(cè)來(lái)判斷陰性陽(yáng)性測(cè)定，無(wú)法得知其真正的濃度，很容易造成漏檢。一組來(lái)自于衛(wèi)生部臨檢中心針對(duì)上百家醫(yī)院和血站實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)的質(zhì)量控制報(bào)告數(shù)據(jù)顯示，未使用室內(nèi)質(zhì)控血清實(shí)驗(yàn)室的測(cè)定總錯(cuò)誤率高達(dá)73.6%，其中弱陽(yáng)性標(biāo)本的測(cè)定錯(cuò)誤率最高，達(dá)68.8%，即便使用了室內(nèi)質(zhì)控血清，弱陽(yáng)性標(biāo)本的測(cè)定錯(cuò)誤率仍高達(dá)35.2%[9]。

化學(xué)發(fā)光免疫分析是上世紀(jì)70年代中期發(fā)展起來(lái)的一項(xiàng)超微量活性物質(zhì)檢測(cè)技術(shù)，時(shí)至今日，近年來(lái)得到了快速的發(fā)展和推廣，成為目前最先進(jìn)的標(biāo)記免疫測(cè)定技術(shù)。其原理是將發(fā)光物質(zhì)直接標(biāo)記于抗原、抗體上，經(jīng)氧化劑或催化劑激發(fā)后可快速穩(wěn)定的發(fā)光，其產(chǎn)生的光量子的強(qiáng)度與所測(cè)抗原抗體的濃度成比例，從而定量得到待檢物質(zhì)的濃度，廣泛應(yīng)用于各種抗原、抗體、激素、酶、維生素和藥物等的檢測(cè)，具有靈敏度高、特異性好、試劑低廉穩(wěn)定、操作簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn)[10-13]。運(yùn)用CLIA法對(duì)乙型肝炎五項(xiàng)進(jìn)行定量檢測(cè)，極大地彌補(bǔ)了酶聯(lián)免疫檢驗(yàn)法定性檢測(cè)的不足。

本組對(duì)100例乙型肝炎患者進(jìn)行了ELISA定性和CLIA定量的對(duì)比檢驗(yàn)，結(jié)果表明，乙型肝炎五項(xiàng)指標(biāo)中HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBcAb的定量檢測(cè)優(yōu)于定性檢測(cè)，但在例數(shù)上無(wú)顯著性差異（P>0.05），HBeAb的定量和定性檢測(cè)結(jié)果具有顯著性差異（P<0.01），表明CLIA定量分析靈敏性和特異性更高，可以很好的彌補(bǔ)乙型肝炎定性檢驗(yàn)的不足，具有一定的臨床實(shí)用價(jià)值和發(fā)展前景。

[1] 瞿良,王惠萱.乙肝血清學(xué)標(biāo)志物定量檢測(cè)及其臨床意義[J].現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2007,11(6): 88-90.

表1 乙型肝炎五項(xiàng)指標(biāo)定性與定量檢測(cè)結(jié)果（n=100）

[2] 周燕.慢性乙型肝炎重疊HAV、HEV感染的臨床特點(diǎn)及疾病轉(zhuǎn)歸探討[J].中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)生 2014,52(8): 34-35.

[3] Anupama TD,David EB.Hepatitis B and C[J].Clin Geriat Med, 2014,30(1): 149-167.

[4] 李賢龍,梅桂杰,王玲.健康體檢者乙肝血清標(biāo)志物檢出狀況分析[J].中國(guó)療養(yǎng)醫(yī)學(xué), 2014,23(1): 41-42.

[5] 王秀華.化學(xué)發(fā)光免疫分析法與酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)乙肝病毒標(biāo)志物臨床探討[J].求醫(yī)問(wèn)藥(學(xué)術(shù)版),2012,10(12): 522-523.

[6] 張繼東.化學(xué)發(fā)光免疫分析法與酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)乙肝病毒標(biāo)志物的比較[J].中國(guó)全科醫(yī)學(xué),2008,11(14): 1299.

[7] Crafford JE,Guthrie AJ.A competitive ELISA for the detection of group-specific antibody to equine encephalosis virus[J].J Virol Methods,2011,174(1/2): 60-64.

[8] 張海青,陳懷霞.兒童肺炎支原體感染酶聯(lián)免疫法檢測(cè)結(jié)果分析[J].中國(guó)衛(wèi)生產(chǎn)業(yè), 2012,9(8): 103.

[9] 魏來(lái).乙型肝炎與丙型肝炎病毒感染臨床檢測(cè)進(jìn)展[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2005,28(6): 657-659.

[10] Lee SR,Yearwood GD,Guillon GB,et al.Evaluation of a rapid, point-of-care test device for the diagnosis of hepatitis C infection [J].J Clin Virol,2010,48(1): 15-17.

[11] Park Y,Seok Y,Choi J,et al.Performance evaluation of the Vitros anti-hepatitis C virus antibody assay for use in clinical laboratories[J].Clin Biochemistry,2012,45(1-2): 175-177.

[12] 張繼東.電化學(xué)發(fā)光免疫分析法在檢測(cè)乙肝標(biāo)志物中的應(yīng)用[J].中外健康文摘?醫(yī)藥月刊,2007,4(7): 191.

[13] 梁秀云.時(shí)間分辨熒光免疫法和化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測(cè)人血清乙肝病毒表面抗原濃度的差異性分析[J].醫(yī)學(xué)信息(上旬刊), 2011,24(8): 4946-4947.

R512.6+<2 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B class="emphasis_bold">2 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B 文章編號(hào)：1671-8194（2014）36-0211-022 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B

1671-8194（2014）36-0211-02

B 文章編號(hào)：1671-8194（2014）36-0211-02