綠源素與甜菜堿預防肉雞球蟲病的效果試驗

張偉武，杜愛芳

(1.浙江大學動物預防醫學研究所，浙江省動物預防醫學重點實驗室，浙江杭州310058;2.杭州市農業科學研究院)

肉雞球蟲病是危害肉雞生產的主要疫病之一，在我國因雞球蟲病引起的年損失約為10 多億元［1］。自20 世紀40年代磺胺類藥物用于防治雞球蟲病以來，已先后有40 多種藥物投入實際應用，但任何一種抗球蟲藥物長期使用都會產生抗藥性。因此，人們將目光轉向非抗生素防治研究，如中藥和疫苗［2］。近10年來，國內外相繼研制開發球蟲疫苗，如美國的Coccivac、加拿大的Immucox、英國的Paracox、捷克的Livacox［3］、中國的DLV 等，保護效果良好，但仍有某些不足之處。故目前防治雞球蟲病仍主要通過飼料中添加抗球蟲藥物進行預防。

綠源素是一種中草藥提取物和競爭排斥益生菌組成的復合飼料添加劑，筆者曾采用該產品對黃羽肉雞生產性能和免疫功能影響及雛雞接種益生菌對腸道菌群的影響等進行了研究［4-6］。為更好了解其預防雞球蟲病的效果特進行本試驗，以便為尋求解決球蟲抗藥性問題提供新途徑。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 球蟲蟲株 采自杭州富陽某肉雞場。現場采集新鮮雞糞，經實驗室分離、純化與增殖柔嫩艾美爾球蟲卵囊后備用。

1.1.2 試驗動物 1日齡AA 肉雞，浙江大學正大肉雞發展中心提供;試驗飼料為自配全價肉雞料，不含抗球蟲藥。

1.1.3 試驗藥物 杜球(含1%馬杜霉素)，批號0806004;克球(含0.5%地克珠利)，批號0806002;抗球(含6%癸氧喹酯)，批號0806001;均由浙江某動物保健品有限公司生產;鹽霉素，生產批號080616;綠源素、甜菜堿均由浙江某飼料添加劑公司提供。

1.2 試驗設計

1.2.1 柔嫩艾美爾球蟲卵囊的采集、分離、純化與增殖 采集4～6 周齡肉雞的新鮮糞便，用飽和食鹽溶液漂浮法分離卵囊，將混合卵囊孢子化后，用水洗凈重鉻酸鉀后計數，感染10～14日齡雞10 羽，每羽口服5 ×104～1 ×105個孢子化卵囊，感染后5 d 剖殺，刮取盲腸內容物收集裂殖子，再感染5 羽10～14日齡無球蟲感染雞。接種后2～3 d 剖殺，從盲腸內容物收集卵囊。經水沖洗后加入重鉻酸鉀，孢子化后備用。

1.2.2 試驗分組 試驗設10 組，即杜球組、克球組、鹽霉素組、抗球組、綠源素1 組、綠源素2 組、綠源素+甜菜堿1 組、綠源素+甜菜堿2 組、不感染不用藥組、感染不用藥組。

1.2.3 試驗方法 供試肉雞自出殼至試驗結束，均籠養在無球蟲環境下，每組12 羽(6♂、6♀)。按試驗要求分別飼喂含預防球蟲藥的飼料，柔嫩艾美爾球蟲卵囊13日齡經嗉囊接種0.5 mL(1 ×105個)。試驗期間，每日觀察糞便狀態、出血程度及雛雞表現，記錄雞只精神狀態、飲水、食欲、發病率、死亡數、糞便狀況。接種卵囊后第5～7 d，每天更換墊紙，記錄血便，按1 堆血便記1 分［7］。同時稱取每組排出的糞便量，攪勻后取樣，用麥氏蟲卵計數法計數各組糞便卵囊數(OPG)。試驗于接種卵囊后第8 d 結束，逐只稱重后剖殺，檢查盲腸病變，按Johnson and Reid 方法(1970)［8］進行盲腸病變計分。

1.3 療效判斷 計算各組存活率、相對增重率、平均病變記分、病變值及卵囊值，最后計算抗球蟲指數(ACI)。依此對藥物效果進行判定。ACI ＜120 不宜作抗球蟲藥;ACI =120～160 抗球蟲效果低;ACI=160～180 抗球蟲效果中等;ACI ＞180 抗球蟲效果高效［9］。

1.4 測定指標

存活率(%)= 組內存活雞數/組內總雞數×100;

相對增重率(%)=感染投藥組增重/不感染不投藥組增重×100;

病變值=各組平均盲腸病變計分×10;

卵囊值以各組盲腸內容物OPG，參照角田清相關表格(1986)［10］換算成卵囊值;

ACI=(存活率+相對增重率)－(病變值+卵囊值);

糞便記分=(第5～7 d 血便記分數÷雞數)。

2 結果與分析

綠源素與甜菜堿配合應用預防肉雞球蟲病效果，詳見表1、表2。

表1 不同抗球蟲藥物預防肉雞球蟲病的抗球蟲指數統計表

由表1可知，各組的初始平均體重相近(最大差距僅13 g)，末重則差距達39.5 g;相對增重率以杜球組最高(102.98%)，說明其促生長作用明顯;抗球組其次(100.98%)，綠源素+甜菜堿組的相對增重率為97.92%～98.38%。存活率則以鹽霉素組最低(83.33%)，杜球組、克球組和綠源素組均為91.67%，抗球組和綠源素+甜菜堿組均為100%。抗球組的盲腸病變值和卵囊值均為0，杜球組與克球組卵囊值均為10，但杜球組的盲腸病變值則明顯低于克球組;鹽霉素組、綠源素組和綠源素+甜菜堿組的卵囊值均為20，盲腸OPG 均很高，與感染不用藥組相比則降低了70.59%～77.54%，但盲腸病變值各組差異較大，與鹽霉素組相比，綠源素組平均降低38.16%，綠源素+甜菜堿組平均降低67.11%。抗球蟲指數的綜合指標以抗球組最高，其次為杜球組，抗球蟲效果均達高效。綠源素+甜菜堿組的平均ACI 為171.95，高于克球組，達到中等有效水平，綠源素組的平均ACI 為149.06，低于綠源素+甜菜堿組的平均值，但高于鹽霉素組10.39%，其抗球蟲效果低于中等有效水平。

表2為各組糞便OPG 及血便記分。各組中僅有不感染不用藥組和抗球組未發現血便，糞便中卵囊數幾乎為零，杜球組有輕微血便出現，糞便中檢測到有少量卵囊，其余各組均有不同程度的血便，糞便OPG 均偏高，用藥組中鹽霉素組平均血便記分最高(2.50)，綠源素組次之達2.13，綠源素+甜菜堿組的平均血便記分為0.96，低于克球組32.39%，較綠源素組降低54.93%。

表2 各組的糞便OPG 及血便記分

3 小結與討論

3.1 抗藥性與藥物使用年限及使用頻率關系 本次試驗結果顯示，癸氧喹酯、馬杜霉素、地克珠利和鹽霉素的抗球蟲指數依次為200.98，182.15，161.94 和133.57，藥效高低可以反應球蟲對其產生的抗藥性程度。鹽霉素于20 世紀80年代引入我國，在杭州地區使用年限最長，但其低廉的用藥成本仍然受到眾多飼料生產廠家的歡迎，使用頻率較高，抗藥性也最嚴重。地克珠利是相對較新的高效化學合成抗球蟲藥，20 世紀90年代后期開始上市，飼料中添加量很低，一般用于穿梭、輪換用藥;馬杜霉素20 世紀90年代初開始上市，其抗球蟲效果在幾種離子載體抗生素類抗球蟲藥中最好，也是目前市場占有率最大的抗生素類抗球蟲藥;癸氧喹酯是喹啉類抗球蟲藥，最新上市，而且由于此類藥品的用藥成本較高，一般多使用于球蟲高發期和高發地區，故該藥仍然保持著較高敏感性。

3.2 綠源素預防肉雞球蟲病效果評價 綠源素是中草藥提取物與競爭排斥益生菌(CE)組成的復合飼料添加劑，能有效阻斷病原菌的定植，預防繼發感染，刺激免疫器官生長發育，提高循環抗體水平，在提高肉雞生產性能方面能取得與抗生素(金霉素)相類似的效果。綠源素是目前所發現的最強效的抗氧化劑和自由基清除劑，在食品、保健品、化妝品及醫藥領域應用廣泛;競爭排斥益生菌對預防和控制禽類沙門氏菌方面有很好的效果，目前國內外已有20 多個產品應用于養禽業［11］。試驗表明，雛雞接種益生菌能在腸道中成功定植，導致盲腸內乳酸桿菌增多、大腸桿菌明顯減少，菌群結構產生明顯變化，并表現趨益性，效果比較理想，但此類產品用于預防肉雞球蟲病在國內外未見相關報道。本次試驗結果顯示，綠源素平均ACI 為149.06，卵囊值為20，糞便、盲腸OPG 較高，平均血便記分為2.13，表明其不能有效殺滅球蟲，抗球蟲效果低于中等有效水平［12］。但與供試的4 種抗球蟲藥相比，綠源素在保證雛雞存活率方面與馬杜霉素、地克珠利相同，明顯高于甲基鹽霉素，相對增重率也優于鹽霉素，盲腸病變值明顯低于甲基鹽霉素、地克珠利，表明綠源素可較好地促進受球蟲感染雞的增重和飼料轉化率，減輕腸道病變，防止腸粘膜受損及繼發感染。

3.3 綠源素與甜菜堿配合使用效果評價 綠源素單獨用于抗球蟲效果一般。本次試驗中綠源素與甜菜堿配合使用，結果表明ACI 為171.95，其抗球蟲效果達到中等有效水平，與綠源素單獨使用相比，相對增重率、存活率和盲腸病變值均有明顯改善，平均血便記分降低54.93%。表明綠源素與甜菜堿配合使用抗球蟲效果已達到中等有效水平以上。綠源素與甜菜堿配合使用具有良好的協同作用，另有試驗結果表明，飼料中添加甜菜堿尤其是與離子載體類抗球蟲藥合用，可明顯改善感染球蟲患雞的生長性能和抵抗力，這一作用與甜菜堿獨特的生物學活性密切相關;球蟲感染時造成腸道粘膜上皮細胞崩解和腸管發炎，細胞內K+釋放使血鉀升高，進而使血鈉下降，使腸道內離子和滲透壓失去平衡［13］，從而達到抑制球蟲侵害和減輕腸道病變的目的，且有使用方便，長期使用不會產生毒副作用等優點。

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