藥物制劑雜質研究概述

李樹賓

摘 要：目的 對藥物制劑雜質研究方法進行歸納和總結，對雜質的分析方法和標準建立做相關探討 方法 通過查閱雜質分析研究方面的文獻資料 結果 總結梳理了雜質的研究分析過程 結論 色譜條件、波長等關鍵因素的確認應合理。

關鍵詞：制劑 雜質 色譜

中圖分類號：R283 文獻標識碼：A 文章編號：1674-098X（2014）01（c）-0253-01

藥物雜質是指在藥品生產、運輸、儲存過程中產生的或引入的影響藥物純度的物質，主要包括有機雜質、無機雜質、殘留溶劑等；有機雜質主要是通過藥物本身降解、締合或藥物之間的反應產生的；無機雜質主要是原料藥制備過程中加入的一些如催化劑、無機鹽、配位體等；殘留溶劑主要是反應試劑的殘留。藥物雜質直接關系到臨床用藥的安全性，因為某些雜質過量可能會使人體產生過敏反應[1]，甚至危及病人生命，因此建立一個專屬性強、靈敏度高的的雜質分析方法并得到科學的方法學驗證是在藥品研發評價及生產過程中質量控制必不可少的有效手段。

1 雜質分析

雜質分析主要是通過高效液相色譜法（HPLC）、氣相色譜法（GC）、薄層色譜法（TLC）等分析方法進行檢測，目前較常用高效液相色譜法（HPLC），且多使用梯度洗脫。為了準確的檢出藥物中存在的雜質，在初步確定色譜條件后，首先需利用破壞性試驗確認各雜質的分離度、峰純度以及波長的選擇是否合理，在確定上述條件后，可根據ICH關于方法學的要求進行方法學驗證，并完成相關雜質的結構確認工作。

破壞性試驗：破壞性試驗是指在酸、堿、氧化、高溫、高濕、光照等相對劇烈的條件下，對藥品進行破壞，從而產生較多的降解產物，模擬貨架期內藥品降解產生雜質，以驗證在當前色譜條件下，各降解雜質峰與主峰，以及各降解雜質峰之間的分離度是否符合要求。

破壞條件：如酸破壞（0.05M鹽酸8 h）；堿破壞（0.02M氫氧化鈉溶液8 h）；氧化破壞（0.15%雙氧水1.5小時）；高溫破壞（100 ℃5個小時）；光照破壞（4500LX15 d）等，具體破壞條件的制定因藥物化學性質不同而不同，具體指標為主峰降解10%～15%，可參照峰高。

峰純度測試：在經過破壞性試驗后，降解產生較多雜質，采用高效液相色譜法進行分離時，不僅需要考慮各雜質峰之間，雜質峰與主峰之間的分離度，還應考察各峰的峰純度[2]，因為分離度不能夠說明主峰或者各雜質峰中沒有包含其他峰，峰純度測試主要采用DAD檢測器，且峰純度一般不應小于950。

波長的確定：波長的選擇時可采用DAD檢測器，樣品溶液在經過合理的破壞后，在同一色譜條件下，使用多波長掃描各破壞條件下樣品溶液，可以有效檢出已知雜質，并且檢出雜質數量較多者為最終確定波長。

方法學驗證及已知雜質的分析：在方法確認過程中，需要進行定量限、檢測限、專屬性、線性（0.05%～2倍質量標準）、范圍、精密度等項目測試[3]。

定量限：指在既定的試驗條件下，樣品中被測物可以被定量測定的最低濃度，并且結果應經過精密度和準確度的確認，指標為信噪比S/N=10∶1；

檢測限：指在既定試驗條件下，樣品中被測物能夠被檢測到的最低濃度，但不必準確定量，因此確認檢測限只是證實被分析物的含量高于或低于某個水平，指標為信噪比S/N=3∶1；

線性：選擇0.5%～2倍質量標準范圍內選擇五個濃度，用峰面積建立回歸曲線，計算相關系數，結果應符合要求；

精密度：包括重復性—同一濃度雜質對照品連續進樣6針，計算峰面積RSD值；中間精密度—通過變換時間、操作人員、檢驗儀器等因素考察檢驗結果的差異；重現性—同一樣品不同實驗室之間的檢驗數據的比較工作；

準確度：至少應涵蓋所屬范圍內濃度，最少用3個濃度，并測定9次，計算各雜質的回收率；

專屬性：通過破壞性試驗實現。

耐用性：在藥典要求范圍內，通過調整流動相比例、色譜柱品牌、柱溫、進樣體積等因素考察上述因素的微調對檢驗結果的影響程度，進一步評價檢驗方法的適用性；

穩定性：在一定溫度下，將樣品溶解一段時間后，考察各雜質含量的變化情況，為樣品檢驗時提供依據。

當雜質與主成分的相對相應因子在0.9～1.1之間時[4]，可采用主成分的自身對照法，當超出此范圍時應采用標準品對照法，雜質標準品較難采購或因成本較高時，可采用加校正因子的自身對照法。

結構確證：對正常樣品進行檢測，計算各雜質的含量，并根據藥品的最大日劑量，確定雜質的鑒別限度，當檢測值大于雜質的鑒別限度時，且為未知雜質時，需要對該雜質進行結構確認，通常采用LC-MS進行結構確認[5]。一般當最大日劑量不超過2g時，鑒定閾值為0.2%，最大日劑量超過2g時，鑒定閾值為0.1%。

2 結語

色譜條件應能保證分離各雜質及各雜質與主峰的分離度，以及各峰的峰純度；

波長的選擇應該合理，色譜分離條件的基礎上，可以全部檢出降解雜質，從而達到降解產物回收率的要求：約90%，主要方法是多波長檢測；

對已知雜質的分析應該合理，需要定量時應驗證方法的線性范圍等，雜質標準品采購較困難時，可以計算響應因子，利用自身對照法計算雜質含量；

超出鑒定閾值的雜質應做結構確證。

參考文獻

[1] 霍秀敏.抗生素高分子雜質與過敏反應[J].國家食品藥品監督管理局藥品審評中心，2005（9）.

[2] 成海平.雜質檢查分析方法建立過程中破壞性試驗的意義和存在的問題分析[J].國家食品藥品監督管理局藥品審評中心，2007（11）.

[3] 張哲峰，成海平，寧黎麗，等.CTD申報資料中雜質研究的幾個問題[J].國家食品藥品監督管理局藥品審評中心，2012（12）.

[4] 王巍，高鵬來，何紅梅，等.中華人民共和國藥典[M].中國醫藥科技出版社，2010.

[5] 于紅.雜質譜的分析[J].國家食品藥品監督管理局藥品審評中心，2007（6）.