HPLC測定頭孢呋辛酯片的含量及有關物質

李裕基 張 璇 閆小華

（深圳市康寧醫院，廣東 深圳 518020）

HPLC測定頭孢呋辛酯片的含量及有關物質

李裕基 張 璇 閆小華

（深圳市康寧醫院，廣東 深圳 518020）

目的 采用HPLC測定考察頭孢呋辛酯片含量及有關物質。方法 流動相A：0.2 mol/L磷酸二氫銨溶液，流動相B：甲醇，A∶B=62∶38，流速：1 mL/min；柱溫：28 ℃；檢測波長：278 nm；進樣量：20 μL。結果 回歸方程Y=600.4X+2.781，r=0.9999，0.048288～0.6036 μg/mL線性關系良好。結論 所用方法可用于孢呋辛酯片的測定及有關物質的檢查。

頭孢呋辛酯片；HPLC；含量；有關物質

頭孢呋辛酯（cefuroxime axetil）為英國葛蘭素（glaxo）公司研制的第二代口服頭孢菌素，具有廣譜抗菌活性，對革蘭陰性菌和陽性菌及厭氧菌有效。臨床上廣泛用于呼吸道感染、尿路感染、淋球菌型感染等的治療[1-2]。葛蘭素公司的頭孢呋辛酯片（西力欣）價格較昂貴，我們以微晶纖維素、交聯羧甲基纖維素鈉、二氧化硅、硬脂酸鎂等為輔料，采用粉末直接壓片法壓片，制得頭孢呋辛酯片。本文采用HPLC對其含量及有關物質進行測定。

1 儀器與試藥

1.1 儀器：LC-20AT高效液相色譜儀、PDA檢測器、CTO-10AS vp柱溫箱、LCsolution工作站（均為日本島津公司）；Sartorius BP 211D型電子天平（十萬分之一，德國Sartorius公司），MQ密理博超純水機。

1.2 試藥：頭孢呋辛酯片（本院研制）；甲醇為色譜純（德國默克公司），水為超純水；其他試劑為分析純。頭孢呋辛酯對照品（中國藥品生物制品檢定所）。

2 頭孢呋辛酯片制備工藝

取頭孢呋辛酯原料，加微晶纖維素、交聯羧甲基纖維素鈉、二氧化硅、硬脂酸鎂等輔料，按一定比例混合，混勻，粉末直接壓片法壓片，薄膜包衣，雙面鋁塑包裝，裝盒，遮光，密封，在陰涼處保存。

圖1 含量測定高效液相色譜圖（A空白試劑；B頭孢呋辛酯對照品；C系統適應性（高溫）；D系統適用性（紫外光照）；E供試品）

圖2 有關物質高效液相色譜圖（A空白試劑；B供試品；C對照品）

表1 頭孢呋辛酯加樣回收率實驗結果

表2 三批樣品含量結果

表3 三批樣品有關物質結果

3 含量測定

3.1 色譜條件及系統適應性試驗：色譜柱：GL Inertsil ODS-SP色譜柱（5 μm，150 mm×4.6 mm）；流動相A：0.2 mol/L磷酸二氫銨溶液，流動相B：甲醇，A∶B=62∶38，流速：1 mL/min；柱溫：28 ℃；檢測波長：278 nm；進樣量：20 μL。取對照品適量，加流動相溶解，按上述色譜條件進樣，頭孢呋辛酯B異構體的相對保留時間為10.027，頭孢呋辛酯A異構體的相對保留時間為11.010，頭孢呋辛酯A異構體峰面積占峰面積總和的0.53，理論塔板數、對稱因子均符合要求，分離度良好，空白試劑無干擾，取對照品溶液適量，分別于高溫、UV條件下放置24 h，頭孢呋辛酯A異構體、B異構體、Δ3異構體、E異構體1、E異構體2分離度良好，見圖1。

3.2 對照品溶液的制備：取頭孢呋辛酯對照品適量120.72 mg，精密稱定，置100 mL容量瓶，加甲醇10 mL振搖使溶解，用流動相稀釋至刻度，制成每1 mL中含1.2072 mg的對照品儲備液，即為S1，分別精密取1、1、2、3、4、5 mL對照品儲備液S1至25、10、10、10、10、10 mL，加流動相稀釋至刻度，制成系列對照品使用液，即為S2-S7。

3.3 供試品溶液的制備：取頭孢呋辛酯片10片，研細，混合均勻，精密稱取適量（相當于頭孢呋辛酯12.5 mg），置10 mL容量瓶中，加甲醇1 mL振搖使溶解，用流動相稀釋至刻度，精密取濾液5 mL，加流動相稀釋至 25 mL，搖勻，溶液過0.45 μm微孔濾膜，取續濾液即為供試品溶液。

3.4 線形范圍考察：以樣品濃度為橫坐標，以峰面積為縱坐標，得回歸方程Y=600.4X+2.781，r=0.9999。表明頭孢呋辛酯在0.048288～0.6036 μg/mL呈良好線性關系。

3.5 精密度試驗：取頭孢呋辛酯對照品溶液S2，按上述色譜條件，連續進樣6次，測得頭孢呋辛酯 A異構體和B異構體的峰面積。計算RSD（%），結果頭孢呋辛酯 A異構體RSD為0.74%，頭孢呋辛酯B異構體RSD為0.76%。

3.6 穩定性試驗：取供試品溶液，按上述色譜條件，分別在第0、1、2、4 h進樣，測定頭孢呋辛酯峰面積，RSD為1.02%。

3.7 加樣回收率試驗：取已知含量的供試品適量（相當于頭孢呋辛酯6.25 mg），共9份，置10 mL容量瓶，分別加對照品儲備液（含頭孢呋辛酯1.2072 mg/mL）4、5、6 mL各3份，按供試品溶液制備方法制備樣品溶液，按上述色譜條件進樣，測定峰面積，計算頭孢呋辛酯含量，平均回收率95.91%，RSD為1.23%，見表1。

3.8 含量測定：取本品3批，按上述方法測定頭孢呋辛酯含量，結果見表2。

4 有關物質

4.1 色譜條件及系統適應性試驗：色譜條件同含量測定3.1。取對照品適量，加流動相溶解，按上述色譜條件進樣，頭孢呋辛酯A異構體、B異構體、Δ3異構體、E異構體1、E異構體2分離度良好，空白試劑無干擾，見圖2。

4.2 供試品溶液的制備：取頭孢呋辛酯片細粉，精密稱取適量（相當于頭孢呋辛酯50 mg），置100 mL容量瓶中，加甲醇10 mL振搖使溶解，用流動相稀釋至刻度，搖勻，即為供試品溶液。

4.3 對照品溶液的制備：精密取供試品溶液1 mL，至100 mL容量瓶，加流動相至刻度，搖勻，即為對照品溶液。

4.4 有關物質測定：取本品3批，按上述方法測定有關物質，結果見表3。

5 討論與結論

高效液相色譜法測定含量及有關物質試驗的液相條件下，頭孢呋辛酯A異構體、B異構體、Δ3異構體、E異構體1、E異構體2分離度良好，頭孢呋辛酯A異構體、B異構體理論塔板數、對稱因子均符合要求，且空白試劑無干擾，表明方法可行、可滿足試驗要求。

[1] 沈佐蓮,呂光.頭孢呋辛酯治療下呼吸道感染45例[J].中國藥業, 2006,15(20):50-51.

[2] 董宗祈,黃開偉,袁雄偉,等.下呼吸道感染的細菌病原學及其耐藥情況分析[J].武漢醫學雜志,1996,20(2):66.

Determination of Cefuroxime Axetil Tablets and its Related Substances by HPLC

LI Yu-ji, ZHANG Xuan, YAN Xiao-hua
(Kangning Hospital, Shenzhen 518020, China)

Objective To establish a method for determination of cefuroxime axetil and its related substances. Methods The analysis was performed by HPLC, a mobile phase of 0.2 mol/L dihydrogen phosphate amine solution -methanol （62∶38） with a flow rate at 1mL/min. The UV detective wavelength was 278 nm. Results The calibration curves showed good linear response ranged from 0.048288 to 0.6036 μg/mL for cefuroxime axetil tablets and its related substances .Conclusion The method is simple, accurate, specific, and can be used for quality control of cefuroxime axetil and examination of its related substances.

Cefuroxime axetil; HPLC; Content determination; Related substance

R927.2

B

1671-8194（2014）19-0017-02