超聲波提取在中藥湯劑煎煮中的應用研究

李清霞趙君穎

（1 新野縣城郊鄉衛生院，河南 新野 473000；2 河南省中醫院，河南 鄭州 450002）

超聲波提取在中藥湯劑煎煮中的應用研究

李清霞1趙君穎2

（1 新野縣城郊鄉衛生院，河南 新野 473000；2 河南省中醫院，河南 鄭州 450002）

目的 考察超聲波提取在中藥湯劑煎煮中的應用。方法 對比超聲波提取、煎煮法同時使用與單獨煎煮對湯劑各項指標的影響。結果 超聲波提取、煎煮法同時使用可以使湯劑一些指標得到提高。結論 超聲波提取有可能在中藥湯劑中進行推廣應用。

超聲波；提取；湯劑

中藥煎煮過程是對中藥成分進行提取、合煎時對各種成分相互反應進行催化的過程，同時也是一個消毒的過程，但煎煮過程對中藥成分提取效果較差、能耗大，工作環境惡劣，一次煎煮有效成分難以全部溶出。超聲波提取是一種物理破碎過程，利用超聲波輻射壓強產生的強烈空化效應，以及機械效應、熱效應促進提取的過程，所需設備簡單、操作方便、提取效率高、成本低廉。如果中藥煎藥機設備在保證常規煎煮的基礎上利用超聲提取促進中藥有效成分溶出，將有效提高中藥的利用率。超聲波提取在中藥湯劑中進行研究，可以擴大超聲提取法的應用。

黃連解毒湯源自《外臺秘要》，是清熱解毒的常用方劑。處方為黃連9 g、黃芩6 g、黃柏6 g、梔子9 g，其中黃連為君藥。本研究對比超聲波提取、煎煮法同時使用和單獨煎煮對黃連解毒湯湯劑的性狀色澤、密度、浸出物、君藥黃連中4種生物堿的含量影響，以考察超聲波提取在中藥湯劑中的應用。

1 儀器、試劑與藥材

1.1 儀器

LC—2010A高效液相色譜儀（CLASS—VP數據處理系統，二極管陣列檢測器，日本島津）；BS 210S電子天平（北京賽多利斯天平有限公司）；METTLERAE240型十萬分之一電子天平（瑞士）；DHG-9076A型電熱恒溫鼓風干燥箱(上海精宏實驗設備有限公司)；KQ-500DV型數控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；DZKW-4電子恒溫不銹鋼水浴鍋（上海東星建材試驗設備有限公司）； SHZ-D（Ⅲ）循環水式真空泵（鞏義市英峪予華儀器廠）；SZ-93自動雙重純水蒸餾器（上海亞榮生化儀器廠）。

1.2 試劑與試藥

鹽酸小檗堿標準品（中國藥品生物制品檢定所，批號110713-200911）；甲醇(色譜純，天津市四友精細化學品有限公司，批號110901)；磷酸二氫鉀（分析純，廣州化學試劑廠，批號21100621）；十二烷基硫酸鈉（化學純，天津永大化學試劑有限公司，批號20100914）；乙腈（Dikmapure，DIKMA TECHNOLOGIES INC，LOT. NO.74112）

2 方法與結果

2.1 樣品的制備

2.1.1 煎煮樣品的制備：稱取黃連解毒湯復方的四種飲片黃連9 g，黃芩6 g，黃柏6 g，梔子9 g，置砂鍋中，加蒸餾水500 mL，浸泡30 min；煎煮30 min，趁熱用4層紗布過濾至燒杯中，冷卻至室溫，吸取1 mL用甲醇定容至5 mL容量瓶中，搖勻，即得供試品溶液。

2.1.2 超聲波提取、煎煮法同時使用樣品的制備：打開超聲波清洗器，設定功率為500 W，溫度為80 ℃；稱取黃連解毒湯復方的四種飲片黃連9 g，黃芩6 g，黃柏6 g，梔子9 g，置大燒杯中，加蒸餾水500 mL，浸泡30 min；加熱煮沸后開始超聲提取30 min，提取后趁熱用4層紗布過濾至燒杯中，冷卻至室溫，吸取1 mL用甲醇定容至5 mL容量瓶中，搖勻，即得供試品溶液。

2.1.3 對照品溶液的制備：精密稱取鹽酸小檗堿對照1.20 mg，用色譜甲醇定容至10 mL容量瓶中，搖勻。

2.2 樣品指標評價

分別制備3個煎煮樣品，3個超聲波提取、煎煮法同時使用樣品，然后分別對性狀色澤、密度、浸出物、君藥黃連中4種生物堿的含量進行對比研究。

2.2.1 性狀、色澤、味道鑒別：煎煮樣品和超聲波提取、煎煮法同時使用樣品均為黃棕色溶液。放置一段時間后有細小微粒出現并附著于容器壁，液體呈土黃色混懸液，沉淀顯棕褐色，口服味極苦。

2.2.2 密度及水溶性浸出物測定：①密度測定：使用波美計對煎煮樣品和超聲波提取、煎煮法同時使用樣品測定并計算其密度。②水溶性浸出物測定：按2010年版藥典附錄水溶性浸出物測定項下規定的操作法中的冷浸出物含量測定法，分別精密量取黃連解毒湯煎煮、超聲提取樣品液20 mL，置已干燥至恒重的蒸發皿中，在水浴上蒸干后，于105 ℃干燥3 h，置干燥器中冷卻30 min，迅速精密稱定重量。以干燥品計算供試品中水溶性浸出物的含量（%），具體結果見表1。

2.4 一側多評法[1]測定樣品中表黃連堿、巴馬汀、小檗堿、小檗堿的含量

2.4.1 色譜條件：色譜條件：色譜柱：Agilent TC-C18（2）（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流動相：乙腈-0.05 mol/L磷酸二氫鉀溶液（50∶50）（每100 mL中加十二烷基硫酸鈉0.4 g，再以磷酸調節ph值為4.0）；檢測波長：345 nm；柱溫：25 ℃；流速為1 mL/min；理論塔板數以鹽酸小檗堿計＞2000。

表1 煎煮樣樣品密度及浸出物測定

表2 超聲波提取＋煎煮法樣品密度及浸出物測定

2.4.2 表樣品中小檗堿、黃連堿、巴馬汀、小檗堿色譜峰的確定和含量的測定：取對照品溶液用0.22 μm微孔濾膜過濾后進樣10 μL，色譜圖如圖1，保留時間為24.309 min，峰面積為4487980。

取煎煮樣品1，超聲波提取、煎煮法同時使用樣品1用0.22 μm微孔濾膜過濾后分別進樣10 μL色譜圖如圖2，圖3。

圖1 鹽酸小檗堿標準品HPLC

圖2 煎煮樣品HPLC

圖3 煎煮法超聲提取同時使用樣品HPLC

計算煎煮樣品1、2、3、4號色譜峰與鹽酸小檗堿對照品色譜峰的相對保留時間，根據2010版藥典中規定的相對保留時間，確定1號峰為表小檗堿，2號峰為黃連堿，3號峰為巴馬汀，4號峰為小檗堿。見表3。

表3 煎煮樣品中表小檗堿、黃連堿、巴馬汀、小檗堿色譜峰的確定

以鹽酸小檗堿對照品的峰面積為對照，計算煎煮樣品中小檗堿、表小檗堿、黃連堿、巴馬汀的含量。見表4。

表4 煎煮樣品中表小檗堿、黃連堿、巴馬汀、小檗堿含量的測定

2.4.3 樣品中表黃連堿、巴馬汀、小檗堿、表小檗堿的含量的含量測定：按照2.4.2項下方法分別確定樣品中小檗堿、黃連堿、巴馬汀、小檗堿的色譜峰，計算峰面積，測定含量。見表5。

表5 煎煮樣樣品四種生物堿含量測定

表6 超聲波提取＋煎煮法樣品含量測定

煎煮、超聲提取同時使用樣品和單獨煎煮樣品相比性狀、色澤、口感未發生明顯改變，但樣品密度大于單獨煎煮樣品，水溶性浸出物量也增大；一測多評法計算表明煎煮、超聲提取同時使用樣品中黃連堿、巴馬汀、小檗堿、表小檗堿的含量都大于單獨煎煮樣品。

3 討 論

3.1 煎煮法的主要原理是通過加熱讓水充分浸潤飲片促進飲片的成分溶出，其溶出的動力是飲片細胞內外的濃度差；超聲技術主要依靠超聲波產生的強烈振動，高的加速度，強烈的空化效應，外加超聲波的許多次級效應，如機械振蕩、乳化、擴散、擊碎、化學效應等都能加速物響散成分進入溶劑。煎煮法和超聲提取的成分溶出動力來源不同，如果兩種方法同時使用，藥效成分的提取效果將得到增加。

3.2 文獻報道[2-10]超聲提取法對多糖、皂苷、黃酮、揮發油、鞣質、維生素、萜類等成分的提取效果和水提取法相比要優于后者或和后者水平相當，并且超聲提取設備簡單，可以縮短提取時間，減少能耗，改善工作環境；超生提取還可以避免高溫對有效成分的破壞，特別適用于中藥煎煮時需要后下的飲片，可以保證藥效的同時提高提取效率。進一步研究超聲提取在中藥煎煮中的應用，有可能提高中藥湯劑的藥效，擴大超聲提取法的應用。

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Ultrasonic Extraction Applied Research in Chinese Medicine Decoction

LI Qing-xia1, ZHAO Jun-ying2
(1 Xinye Chengjiao Hospitals, Xinye 473000, China; 2 Henan Province Hospital, Zhengzhou 450002, China)

Objective To examine ultrasonic extraction in Chinese medicine decoction. Method comparison of ultrasonic extraction and decoction decoction indicators. Results Compared with the boiling method, ultrasonic extraction energy, improve the working environment better Chinese medicines extracted. Conclusion The ultrasonic extraction may promote the use of Chinese medicine decoction.

Ultrasonic; Extract; Decoction

R445.1

B

1671-8194（2014）19-0014-02