胱抑素C及D二聚體與冠心病病變程度相關性研究

李 峰，趙延恕

(中南大學湘雅二醫院心血管內科，湖南 長沙 410011)

胱抑素C及D二聚體與冠心病病變程度相關性研究

李 峰，趙延恕

(中南大學湘雅二醫院心血管內科，湖南 長沙 410011)

目的觀察不同病變程度的冠心病患者血漿胱抑素C(Cyst C)和D-二聚體(DD)水平，探討Cyst C及DD水平對冠狀動脈狹窄病變程度的臨床預測價值。方法選取2013年9月至2014年2月我院老干科收治的冠心病患者74例。根據冠脈造影結果將其分為單支病變組24例、雙支病變組28例和三支病變組22例。根據冠狀動脈Gensini評分結果將其分為輕度狹窄組25例、中度狹窄組20例和重度狹窄組29例。同時選擇疑似冠心病患者22例為對照組。用ELISA法分別檢測各組受試者血漿中的Cyst C和DD濃度，并應用Pearson進行相關分析。結果單支病變組、雙支病變組和三支病變組患者的血漿Csyt C和DD水平均高于對照組(P＜0.05)。三支病變組的血漿Cyst C和DD濃度分別為(1.31±0.28)mg/L和(303.46±41.15)μg/L，均高于雙支病變組和單支病變組(P＜0.05)；雙支病變組的血漿Cyst C和DD濃度分別為(1.14±0.22)mg/L和(248.63±31.78)μg/L，均高于單支病變組的(0.93±0.17)mg/L和(215.92±32.86)μg/L(P＜0.05)。輕度狹窄組、中度狹窄組和重度狹窄組患者的血漿Csyt C和DD水平均高于對照組(P＜0.05)。重度狹窄組的血漿Cyst C和DD濃度分別為(1.35±0.23)mg/L和(293.50±39.24)μg/L，均高于中度狹窄組和輕度狹窄組(P＜0.05)；中度狹窄組的血漿Cyst C和DD濃度分別為(1.09±0.27)mg/L和(261.12±40.31)μg/L，均高于輕度狹窄組的(0.94±0.16)mg/L和(211.59±35.46)μg/L(P＜0.05)。患者的血漿Cyst C和DD水平均與冠脈Gensini積分呈正相關(r=0.514，0.476，P＜0.01)，血漿Cyst C與DD水平呈顯著性正相關(r=0.743，P＜0.01)。結論冠心病患者血漿Cyst C和DD水平明顯升高，隨著病變支數的增加及狹窄病變程度而逐漸升高，且與冠狀動脈Gensini評分具有正相關性。聯合檢測血漿Cyst C及DD水平可初步預測冠狀動脈狹窄病變程度。

胱抑素C；D-二聚體；冠心病；Gensini評分

冠狀動脈粥樣硬化性心臟病(簡稱“冠心病”)是心血管系統疾病中常見疾病，隨著冠心病機制的深入研究，發現胱抑素C(Cystatin C，Cyst C)和D-二聚體(D-dimer，DD)與心血管系統疾病有密切的聯系，被認為是冠心病的新的危險因素，對冠心病患者的早發現、早診斷、早治療，減少并發癥、改善預后及降低死亡率具有重要的臨床意義[1-2]。本研究旨在分析不同病變程度的冠心病患者血漿Cyst C和DD水平及其相關性，探討Cyst C及DD水平對冠狀動脈狹窄病變程度的臨床預測價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取中南大學湘雅二醫院心內科2013年9月至2014年2月住院行冠脈造影(CAG)檢查的患者74例，均符合Braunwald心臟病學(第9版)制定的診斷標準，并經CAG證實至少有一支冠狀動脈(左主干、左前降支、左回旋支、右冠狀動脈)及其主要分支動脈血管內徑狹窄≥50%。74例患者中男性42例，女性32例，年齡平均(61.13±9.64)歲。根據其主要冠狀動脈病變累及支數分為單支病變組(24例)、雙支病變組(28例)及三支病變組(22例)。根據美國心臟病協會(AHA)所規定的改良Gensini積分系統對每支病變血管狹窄程度進行定量分析并評分。按Gensini積分情況(積分＜30分、30～90分、＞90分)將冠心病患者分為三組，即輕度狹窄組(25例)、中度狹窄組(20例)、重度狹窄組(29例)。選取22例疑似冠心病患者為對照組，CAG檢查證實冠狀動脈＜50%的狹窄。男性10例，女性12例。排除肺源性心臟病、風濕性心臟病等除冠心病外的其他心血管病；嚴重肝腎功能不全者；妊娠、哺乳期婦女及合并有急慢感染病史、惡性腫瘤等；近6個月有手術等。所有受試者均簽署知情同意書，并經醫院倫理委員會批準。

1.2 檢測方法 應用ELISA法檢測血漿Cyst C和DD水平。

1.2.1 試劑與儀器 Cyst C和DD定量測定試劑盒(上海雅吉生物科技發展公司)；日立7600-020全自動生化儀(日本日立集團)；全自動酶標儀(匯松MB530)；血管內造影導管(日本泰爾茂株式會社)。

1.2.2 主要方法和指標 取空腹靜脈血5 ml注入EDTA抗凝管，3 000 r/min離心15 min，分離血漿置于-80℃冰箱，Cyst C和DD應用雙抗體夾心法測定。Cyst C測定操作步驟:(1)標準品的稀釋與加樣、置37℃溫育30 min、洗滌、加酶：每個孔加入酶標試劑50μl，但不加入空白孔。37℃溫育30 min、洗滌、顯色：每個孔先加入顯色劑A 50μl，再加入顯色劑B 50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15 min。每個孔加入終止液50μl，450 nm波長依序測量各孔的OD值并計算。DD測定同Cyst C測定。

1.3 統計學方法 應用SPSS17.0統計軟件進行數據分析，計量資料以均數±標準差()表示，采用t檢驗；計數資料以頻數表示，采用χ2檢驗；應用Pearson分析其相關性。以P＜0.05表示差異具有統計學意義。

2 結 果

2.1 各組血漿Cyst C和DD水平比較 單支病變組、雙支病變組和三支病變組的血漿Cyst C和DD水平均高于對照組，差異具有統計學意義(P＜0.05)。三支病變組血漿Cyst C和DD的濃度高于雙支病變組和單支病變組(P＜0.05)；雙支病變組血漿Cyst C和DD的濃度均高于單支病變組，差異具有統計學意義(P＜0.05)，見表1。

表1 各組血漿Cyst C及DD水平比較()

表1 各組血漿Cyst C及DD水平比較()

注：a表示與正常對照組比較，P＜0.05；b表示與單支病變組比較，P＜0.05；c表示與雙支病變組比較，P＜0.05。

對照組(n=22)單支病變組(n=24)雙支病變組(n=28)三支病變組(n=22) 0.75±0.14 0.93±0.17a1.14±0.22ab1.31±0.28abc172.21±24.64 215.92±32.86a248.63±31.78ab303.46±41.15abc

2.2 冠脈不同Gensini積分的各組血漿Cyst C和DD水平比較 輕度狹窄組、中度狹窄組和重度狹窄組血漿的Csyt C和DD水平均高于對照組，差異具有統計學意義(P＜0.05)。重度狹窄組血漿Cyst C和DD的濃度均高于中度狹窄組和輕度狹窄組(P＜0.05)；中度狹窄組血漿Cyst C和DD的濃度均高于輕度狹窄組，差異具有統計學意義(P＜0.05)，見表2。

表2 冠脈不同Gensini積分的各組血漿Cyst C和DD水平比較()

表2 冠脈不同Gensini積分的各組血漿Cyst C和DD水平比較()

注：a表示與正常對照組比較，P＜0.05；b表示與單支病變組比較，P＜0.05；c表示與雙支病變組比較，P＜0.05。

對照組(n=22)輕度狹窄組(n=25)中度狹窄組(n=20)重度狹窄組(n=29) 0.77±0.14 0.94±0.16a1.09±0.27ab1.35±0.23abc172.21±24.64 211.59±35.46a261.12±40.31ab293.50±39.24abc

2.3 冠心病患者Cyst C和DD水平與冠脈Gensini積分的相關性 通過Pearson相關分析顯示，Cyst C水平與冠脈Gensini積分呈正相關(r=0.514，P＜0.01)，見圖1。通過Pearson相關分析顯示，DD水平與冠脈Gensini積分呈正相關(r=0.476，P＜0.01)，見圖2。

圖1 冠心病患者DD與Gensini積分相關性散點圖

圖2 冠心病患者Cyst C與Gensini積分相關性散點圖

2.4 血漿Cyst C水平與DD水平的相關性分析 經線性相關分析冠心病患者血漿Cyst C水平與DD水平呈顯著性正相關(r=0.743，P＜0.01)。

3 討論

Cyst C是半胱氨酸蛋白酶抑制劑超家族成員之一，無組織特異性，幾乎來源于機體所有有核細胞中，可持續、恒定地表達。有研究表明，Cyst C參與調控細胞內外蛋白質的分解，可引起細胞外基質和內彈性膜的降解增多，侵入內膜的單核巨噬細胞和血管平滑肌增多，并可影響脂質代謝，導致動脈粥樣硬化的發生。Cyst C還可影響中性粒細胞的遷移，參與炎癥反應，參與血管壁、細胞外基質生成和降解的平衡過程[3-4]。本次研究結果可見，冠心病患者不同病變冠脈支數組Cyst C濃度明顯高于對照組，且隨著病變冠脈支數增加，Cyst C逐漸升高。冠心病患者按照冠脈狹窄程度分組具有相同的趨勢。提示在冠心病患者中血漿Cyst C濃度明顯升高。經Pearson相關分析發現，Cyst C水平與冠脈Gensini積分呈正相關關系(P＜0.01)，表明Cyst C水平與冠脈病變的狹窄嚴重程度相關，Cyst C與冠心病的發生、發展過程有密切聯系。主要由于Cyst C作為一種半胱氨酸蛋白酶抑制劑，可直接影響動脈粥樣硬化的生成、發展以及破裂。在該過程中，炎癥反應和血管壁的重塑是形成動脈粥樣硬化的基礎，炎癥細胞釋放炎癥因子促進內皮細胞表達過多的組織蛋白酶，壞死組織也從溶酶體中釋放出大量的組織蛋白酶，機體代償性升高Cyst C濃度，維持促組織蛋白溶解和抗組織蛋白溶解的平衡。Cyst C還參與炎癥的調節過程，具有增強中性粒細胞的趨化和吞噬能力，促進動脈粥樣斑塊的進展[5-6]。Cyst C參與了心血管疾病的病理過程，可作為評估冠心病患者冠狀動脈病變程度的一項生化指標。

DD是在凝血酶及凝血因子XIII的共同作用下形成的交聯纖維蛋白，經纖維溶解酶降解后的終產物之一。DD由交聯蛋白D區的α、β、γ組成，其相對分子質量為184 000～202 000 kD，與E片段形成穩定的DD/E片段。DD既可以反映機體的纖維溶解活動，并且又可以反映機體的凝血功能。近年來研究表明，冠狀動脈病變的發生、發展過程與血栓的形成和纖維功能亢進相關。機體體內有血栓病變且繼發纖維功能亢進時，血液中的DD水平升高，血漿中的DD濃度升高被認為是新鮮血栓形成和體內血液高凝狀態的一種體現[7-8]。本次研究結果中，冠心病患者血漿DD水平明顯高于對照組，并隨著病變范圍的增大和程度的加重而升高，且與冠心病呈正相關。冠狀動脈內皮細胞受損，膠原暴露，內源性凝血途徑或(和)外源性凝血途徑啟動，生成的凝血酶水解纖維蛋白原形成纖維蛋白單體，纖維蛋白單體聚合形成纖維蛋白多聚體。同時，也繼發性引起纖維溶解系統功能的亢進，也就直接導致了血漿中DD濃度的升高[9-10]。本次研究也證實冠心病組血漿Cyst C水平與DD水平呈顯著性正相關，因此，聯合檢測血漿Cyst C及DD水平可初步預測冠狀動脈狹窄病變程度。本次研究還需要進一步增加樣本量研究血漿中Cyst C及DD水平與冠心病的關系，血漿Cyst C和DD雖然與冠心病有著密切的聯系，但Cyst C及DD水平是作為冠心病的致病因子還是冠心病發生的一種伴隨現象，還需進一步研究。

綜上所述，冠心病患者血漿Cyst C和DD水平明顯升高，隨著病變支數的增加及狹窄病變程度而逐漸升高，且與冠狀動脈Gensini評分具有正相關性。聯合檢測血漿Cyst C及DD水平可初步預測冠狀動脈狹窄病變程度。

[1]Cakar MA,Gunduz H,Varim C,et al.Correlation between D-dimer levels and coronary artery reperfusion in acute myocardial infarction patients after thrombolytic treatment[J].Blood Coagul Fibrinolysis,2013,24(6):608-612.

[2]楊友新,劉 麗,覃 明.胱抑素C、超敏C反應蛋白與血尿酸在急性冠脈綜合征中的變化探討[J].海南醫學,2011,22(14):98-99. [3]包海林.81例冠心病患者血清胱抑素C檢測分析[J].檢驗醫學與臨床,2010,7(24):2725-2726.

[4]DandanaA1,Gammoudi I,ChalghoumA,et al.Clinical utility of serum cystatin C in predicting coronary artery disease in patients without chronic kidney disease[J].J Clin Lab Anal,2014,28(3): 191-197.

[5]郭瑞霞,張 曉,朱記法,等.血清胱抑素C水平與冠心病嚴重程度的關系[J].實用醫學雜志,2011,27(24):4432-4434.

[6]Doganer YC,Aydogan U,Aydogdu A,et al.Relationship of cystatin C with coronary artery disease and its severity[J].Coron Artery Dis,2013,24(2):119-126.

[7]林 毅.冠心病患者血漿D-二聚體水平測定的臨床意義[J].臨床醫學,2010,30(10):29-30.

[8]Akgul O,Uyarel H.D-dimer:a novel predictive marker for cardiovascular disease[J].Int J Cardiol,2013,168(5):4930-4931.

[9]張露遠,張 炎,周金芳,等.不同溶栓效果患者纖維蛋白原及D-二聚體的動態變化研究[J].海南醫學,2014,25(2):203-205.

[10]Cosmi B,Legnani C,Tosetto A,et al.Comorbidities,alone and in combination with D-dimer,as risk factors for recurrence after a first episode of unprovoked venous thromboembolism in the extended follow-up of the PROLONG study[J].Thromb Haemost,2010,103 (6):1152-1160.

Correlation of cystatin C and D-dimer with the lesion extent of coronary heart disease.

I Feng,ZHAO Yan-shu.

Department of Cardiovascular Internal Medicine,Second Xiangya Hospital of Central South University,Changsha 410011,Hunan,CHINA

ObjectiveTo observe the plasmatic cystatin C(Cys C)and D-dimer(DD)level of coronary heart disease(CHD)patients with different lesion extent,and to explore the clinical predictive value of Cys C and DD on CHD lesions.MethodsSeventy-four CHD patients in the department of old cadre between September 2013 and February 2014 were selected.According to the result of coronary angiography,they were divided into One-vessel lesion group(24 cases),Two-vessel lesion group(28 cases)and Three-vessel lesion group(22 cases).According to the Gensini score,they were divided into mild stenosis group(25 cases),moderate stenosis group(20 cases)and severe stenosis group(29 cases).22 CHD suspected cases were enrolled as the control group.The plasmatic Cys C and DD levels were measured by ELISA,and their correlation was analyzed by Pearson.ResultsThe plasmatic Cys C and DD of each CHD group(One-vessel lesion group,Two-vessel lesion group and Three-vessel lesion group)were higher than those of the control group(P＜0.05).The plasmatic Cys C and DD concentrations of Three-vessel lesion group were(1.31±0.28)mg/L and(303.46±41.15)μg/L,both higher than those of the Two-vessel lesion group and One-vessel lesion group(P＜0.05).The plasmatic Cys C and DD concentrations of Two-vessel lesion group were (1.14±0.22)mg/L and(248.63±31.78)μg/L,higher than those of One-vessel lesion group[(0.93±0.17)mg/L and (215.92±32.86)μg/L],P＜0.05.The plasmatic Cys C and DD of mild stenosis group,moderate stenosis group,moderate stenosis group were higher than those of the control group(P＜0.05).The plasmatic Cys C and DD concentration of severe stenosis group were(1.35±0.23)mg/L and(293.50±39.24)μg/L,higher than those of the moderate stenosis group and mild stenosis group(P＜0.05).The plasmatic Cys C and DD concentration of moderate stenosis group were (1.09±0.27)mg/L and(261.12±40.31)μg/L,higher than those of the mild stenosis group[(0.94±0.16)mg/L and (211.59±35.46)μg/L],P＜0.05.Patients'average plasmatic Cys C and DD level were positively correlated with coronary Gensini score(r=0.514,0.476,P＜0.01).And the Cys C level was positively correlated with the DD level(r=0.743,P＜0.01).ConclusionThe plasmatic Cys C and DD level in CHD patients increased significantly,they could increase gradually with the increase of lesion vessel and stenosis and they were positively correlated between the Gensini score of coronary artery.Combined detection of plasmatic Cys C and DD levels could predict the lesion extent of coronary artery stenosis.

Cystatin C;D-dimer;Coronary heart disease;Gensini score

R541.4

A

1003—6350（2014）24—3655—04

10.3969/j.issn.1003-6350.2014.24.1424L

2014-06-30)

趙延恕。E-mail：474121494@qq.com