N末端腦鈉肽前體、淋巴細胞亞群與原發性高血壓的相關性研究

徐文莉，廖長征，陳思祖

（深圳市龍崗中心醫院中心實驗室，廣東 深圳 518116）

N末端腦鈉肽前體、淋巴細胞亞群與原發性高血壓的相關性研究

徐文莉，廖長征，陳思祖

（深圳市龍崗中心醫院中心實驗室，廣東 深圳 518116）

目的探討原發性高血壓(EH)患者N末端腦鈉肽前體(NT-proBNP)及淋巴細胞亞群等指標變化情況。方法328例高血壓確診患者按照分級標準進行分組，其中EH1級組115例，EH2級組109例，EH3級組104例；以120例同期健康體檢者作為對照組。采用電化學發光免疫分析測定NT-proBNP水平和流式細胞儀分析CD3+、CD4+、CD8+、CD19+水平，組間進行比較。結果高血壓組血清中NT-proBNP、CD4+/CD8+、CD19+水平較健康對照組明顯升高（P＜0.05），其中EH3級組升高最顯著；CD3+、CD4+、CD8+細胞明顯低于正常對照組(P＜0.05)，EH3級組降低最顯著。NT-proBNP水平與CD3+、CD4+、CD8+等指標均呈顯著負相關(r=-0.951，r=-0.973，r=-0.955；P均＜0.01），與CD19+細胞（B細胞）、CD4+/CD8+呈顯著正相關(r=0.934，r=0.98；P均＜0.01)。結論EH患者的血壓的臨床分級與NT-proBNP、CD3+、CD4+、CD8+、CD19+的水平密切相關，并可能參與EH的病理生理過程。

原發性高血壓；N末端腦鈉肽前體；淋巴細胞亞群

我國人群數據監測顯示，心腦血管死亡人數占總死亡人數的40%以上，其中高血壓是首位危險因素，每年300萬心血管死亡中至少一半與高血壓有關，但其具有可控性，血壓的合理控制將大大減少心腦血管疾病的發生[1]。有研究表明原發性高血壓(Essential hypertension，EH)與神經內分泌因素有密切的聯系，而腦鈉肽(Brain natriuretic peptide，BNP)作為重要神經內分泌因子之一，已日益受到臨床工作者的關注。BNP是一種心室激素，其濃度可以反映心室的充盈壓，同時，BNP作為心臟旁分泌激素，其濃度目前已經被公認為評估心力衰竭的生物學指標，近幾年研究發現BNP與原發性高血壓有相關性[2]。近年來的研究表明，細胞免疫功能紊亂是高血壓發病機理之一，而免疫功能的紊亂可導致自身免疫反應及炎癥反應的發生，其在原發性高血壓中發生、發展中起著重要的作用[3]。本文通過對原發性高血壓患者血漿BNP水平及淋巴細胞亞群的測定，了解其在該病中的臨床價值，以便為臨床病情進展、療效觀察提供簡單可靠的臨床指標。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2011年1月至2013年5月在我院心內科門診及住院患者328例，男性170例，女性158例，年齡36～77歲，平均(56.7±10.2)歲，所有患者均符合2010年《中國高血壓防治指南》的高血壓診斷標準。根據該指南中高血壓的診斷和臨床分級標準進行分類，高血壓1級(EH1級)組115例，高血壓2級(EH2級)組109例，高血壓1級(EH3級)組104例；選擇同期來我院的健康體檢者120例作為對照組，男性58例，女性62例，年齡45～65歲，平均(54.2±11.0)歲，兩組間年齡、性別差異均無統計學意義(P＞0.05)，排除肝、腎功能異常，感染、呼吸衰竭等干擾情況。

1.2 試驗方法

1.2.1 血壓的測定 用臺式水銀血壓計，平靜休息15 min，患者取坐位測量左上臂肱動脈血壓，連續測量3次，取其平均值。

1.2.2 NT-proBNP的測定 所有受試者均空腹采血3 ml，及時分離血清，-20℃冰箱保存，測定時室溫平衡30 min，采用電化學發光的測定，儀器和試劑為羅氏公司全自動電化學發光儀E170及其配套試劑。

1.2.3 淋巴細胞亞群的測定 熒光標記抗體CD3-FITC、CD4-PE、CD8-PE、CD19-PE、Ig-FITC和Ig-PE以及流式細胞儀Facscalibur購于美國BD公司。受試者空腹靜脈采血1 ml(EDTA抗凝)，取100 μl和10 μl單抗混合，室溫孵育20 min，加入紅細胞裂解液500 μl，震蕩混勻、避光15 min，2 h內上流式細胞儀檢測。采用Simunset自動軟件對樣品進行獲取及分析。

1.3 統計學方法 應用SPSS17.0軟件進行統計學處理，計量資料符合正態分布的采用均數±標準差()表示，采用單因素方差分析(ANOVA)及Pearson相關性分析；不符合正態分布時，可進行對數變換后組間比較采用單因素方差分析或采用Kruskal-Wills H檢驗，變量進行對數轉換，若轉換后仍不能滿足正態性，則采用Spearman秩相關性分析，以P＜0.05表示差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 不同血壓級別NT-proBNP和免疫指標的比較 高血壓患者中NT-proBNP隨著血壓級別的上升而升高，組間比較差異具有統計學意義(P＜0.05)。即隨EH患者的疾病嚴重程度而增加，高血壓組CD3+、CD4+、CD8+細胞明顯低于正常對照組，并隨血壓級別的升高而降低；CD19+、CD4+/CD8+明顯高于對照組，并隨血壓級別的升高而升高，見表1。

表1 高血壓組與正常對照組NT-proBNP及免疫指標的比較()

表1 高血壓組與正常對照組NT-proBNP及免疫指標的比較()

注：與對照組，aP=0.000，bP=0.02；與EH1級組比較，cP=0.000，dP=0.04；與EH2級組比較，eP=0.000。

組別對照組EH1級組EH2級組EH3級組F值P值CD19(%) 8.17±0.69 13.4±0.65a19.07±0.79ac25.68±0.50ace40.856 0.000例數120 115 109 104 NT-proBNP(pg/ml) 75.49±1.44 103.28±1.16a193.89±1.25ac295.72±1.75ace57.256 0.000 CD3(%) 68.27±1.10 60.04±1.11a52.35±0.79ac46.61±0.82ace27.357 0.000 CD4(%) 43.14±1.11 38.04±0.73a33.98±1.14ac26.41±0.57ace22.275 0.002 CD8(%) 36.29±0.97 28.13±0.71a22.74±0.92ac1.70±0.08ace35.268 0.000 CD4/CD8(%) 1.19±0.05 1.35±0.06ab1.50±0.08ae15.57±0.70ace17.893 0.003

2.2 NT-proBNP和免疫指標間的相關性 高血壓組血漿NT-proBNP水平與CD3+、CD4+、CD8+等指標均呈顯著負相關(r=-0.951，r=-0.973，r=-0.955；P均＜0.01)，與CD19+細胞(B細胞)、CD4+/CD8+呈顯著正相關(r=0.934，r=0.98；P均＜0.01)。

3 討論

原發性高血壓是常見的慢性病，也是心腦血管疾病最主要的危險因素，其中腦卒中、心肌梗死、心力衰竭及慢性腎臟等主要并發癥不僅僅致殘、致死率高，而且嚴重消耗醫療和社會資源，給國家和家庭造成沉重負擔。國內外的實踐證明，降低高血壓患者的血壓水平，可以明顯減少腦卒中及心臟病事件，顯著改善生存質量，有效降低疾病負擔，尋找與疾病發生有關的早期預測因素和潛在的病理機制，對于探討早期診斷和早期干預有著重要的臨床意義。

腦鈉肽在正常人中的水平很低且非常穩定，在心室負荷過重或心臟擴大時，心肌內儲存的腦利鈉前肽即被釋放并很快分解為具有內分泌活性的BNP，從而很好地反映心室的功能狀態[4]。本文結果表明，高血壓患者的血漿NT-proBNP明顯高于對照組，并隨EH1級組、EH2級組、EH3級組的收縮壓和舒張壓的增加而增加，從而顯示高血壓患者的血漿NT-proBNP水平與EH患者的血壓升高的程度和靶器官的損害程度密切相關，能夠反映EH患者的嚴重程度。

近年來，免疫在原發性高血壓發病機制的作用越來越受到人們的重視。研究證實淋巴細胞對體內一切體液和細胞免疫反應類型及強度都有著重要的調節作用。本文研究顯示，高血壓患者CD4+細胞、CD8+細胞明顯低于對照組，而CD4+/CD8+比值明顯升高，可見CD8+細胞比CD4+細胞下降更顯著，免疫功能的失衡可能導致B細胞功能的增強，進而分泌抗體增強，導致抗原-抗體復合物的形成，激活補體引起血管內皮損傷，參與高血壓的發生和發展[5]。研究結果顯示B細胞數量明顯高于對照組，與上述的推測相吻合。已有文獻報道，外周血IgG、C3與原發性高血壓的嚴重程度密切相關[6]。

炎癥在高血壓的發生、發展以及對靶器官的損害中起著重要作用，而高血壓通過其血流動力學刺激又可促進炎性反應。越來越多的證據表明以炎癥細胞浸潤為特征的血管炎癥時高血壓進展的重要機制[7-8]，其特征是淋巴細胞和單核細胞在內皮下的聚集，造成免疫功能的紊亂，產生和釋放多種活性因子，激活心肌的細胞外基質形成細胞，引起膠原形成及代謝異常，并可導致心肌實質細胞的變性、壞死或亞細胞結構變化等，從而引起一系列病理生理變化，導致心功能的改變，從而引起NT-proBNP分泌的增加，這與本研究的試驗結果一致。可見高血壓患者存在免疫調節紊亂，在降壓的過程中應重視患者體內的免疫調節功能，以有效的降低血壓及防治靶器官的損害。

綜上所述，NT-proBNP代表高血壓對機體的負荷，淋巴細胞可作為高血壓患者體內免疫狀態的一種客觀指標，聯合檢測可以對疾病病情的發展提供有效的依據。

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Relationship between N-terminal pro-brain natriuretic peptide,lymphocyte subpopulation and essentialhypertension.

XU Wen-li,LIAO Chang-zheng,CHEN Si-zu.Central Laboratory Shenzhen Longgang Center Hospital, Shenzhen 518116,Guangdong,CHINA

ObjectiveTo study the change of N-terminal pro-brain natriuretic peptide and lymphocyte subpopulation in essential hypertensive patients.MethodsTotally 328 hypertensive patients were divided into three groups according to the standard of classification:grade 1 hypertensive(115 patients),grade 2 hypertensive(109 patients)and grade 3 hypertensive(104 patients).As the same time 120 normal controls were enrolled as control group. CD3+、CD4+、CD8+、CD19+level and serum NT-proBNP concentration were measured by flow cytometry and electrochemiluminescence immunoassay(ECLIA).ResultsNT-ptoBNP,CD4/CD8and CD19+levels in 328 patients with EH were significantly higher than those in the controls(P＜0.05)and they were increased with the increases of blood pressure,but CD3+,CD4+and CD8+levels were significantly lower(P＜0.05)than the control and they were decreased with the increases of blood pressure.NT-proBNP level was negatively correlated with CD3+,CD4+and CD8+(r=-0.951,r=-0.973,r=-0.955;P＜0.01),and was positively correlated withand(r=0.934,r=0.98;P＜0.01).ConclusionNT-proBNP,were closely correlated with EH stage and probably involved in the pathophysiological process of EH.

Essential hypertension;N-terminal pro-brain natriuretic peptide(NT-proBNP);Lymphocyte subpopulation

R544.1

A

1003—6350（2014）23—3486—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2014.23.1362

2013-10-12)

徐文莉。E-mail：gzsd123@163.com