氣相色譜法測定強力枇杷露中薄荷腦、磷酸可待因、嗎啡、鹽酸罌粟堿的含量

符映均，張莉，胡浩彬，，吳迪

1南京中醫藥大學，江蘇南京　210023；2江蘇省食品藥品監督檢驗研究院，江蘇南京　210008；3精華制藥集團股份有限公司，江蘇南通　226005

氣相色譜法測定強力枇杷露中薄荷腦、磷酸可待因、嗎啡、鹽酸罌粟堿的含量

符映均1，張莉2，胡浩彬1，2，吳迪3

1南京中醫藥大學，江蘇南京210023；2江蘇省食品藥品監督檢驗研究院，江蘇南京210008；3精華制藥集團股份有限公司，江蘇南通226005

摘要目的：建立氣相色譜法同時測定強力枇杷露中薄荷腦、磷酸可待因、嗎啡、鹽酸罌粟堿四種成分含量的方法。方法：試樣用乙酸乙酯振搖提取，色譜柱為100%二甲基聚硅氧烷固定液的毛細管柱，柱溫從100℃程序升溫至270℃，保持20 min，檢測器為FID。結果：薄荷腦、磷酸可待因、嗎啡、鹽酸罌粟堿在各自測定范圍內有良好線性關系，各成分平均回收率（n=6）在96.76%～113.34%，RSD＜6.0%。結論：本方法準確可靠，重現性好，可有效地控制強力枇杷露的質量。

關鍵詞強力枇杷露；薄荷腦；磷酸可待因；嗎啡；鹽酸罌粟堿；含量測定；氣相色譜法

強力枇杷露由枇杷葉、罌粟殼、薄荷腦、桔梗、百部、白前、桑白皮7味中藥及相關輔料制成。具有養陰斂肺、止咳袪痰之功效。現行質量標準中只有兩個鑒別項，無含量測定項[1]，不能有效地控制其質量。罌粟殼為方中臣藥[2]，現代藥理、化學研究表明，其主要有效成分是生物堿類，主要為嗎啡、可待因、罌粟堿等，具有鎮痛、鎮咳作用[3]；罌粟堿能松弛支氣管平滑肌，具有平喘作用；薄荷腦清涼止癢，使黏膜產生清涼感以減輕不適，也是有效成分之一[4]；故選擇磷酸可待因、嗎啡、鹽酸罌粟堿、薄荷腦作為含量測定的指標。強力枇杷露的成分測定研究報道很多，但同一氣相色譜條件下同時測定四種成分尚未有文獻報道。為此，本文應用氣相色譜法，同時測定強力枇杷露中薄荷腦、磷酸可待因、嗎啡、鹽酸罌粟堿的含量。

1　儀器與試藥

Agilent 6890N氣相色譜儀；EYELA旋轉蒸發儀等。

薄荷腦、磷酸可待因、嗎啡（純度97.1%）、鹽酸罌粟堿（純度99.6%），均由中國藥品生物制品檢定所提供；樣品收集7家制藥公司生產的11個批次。甲醇、乙酸乙酯均為分析純，由南京化學試劑有限公司生產。

2　方法與結果

2.1色譜條件

色譜柱為HP-1MS（30 m×0.25 mm×0.5 μm），進樣口溫度為200℃。柱溫從100℃程序升溫至270℃，速率為8℃·min-1，保持20 min。恒流模式，流速為1.5 mL·min-1，分流比為1∶1。檢測器溫度290℃，氫氣流速30 mL·min-1，空氣流速300 mL·min-1。

2.2系統適應性

在上述色譜條件下，理論板數以可待因峰計算可達80000以上，薄荷腦、磷酸可待因、嗎啡和鹽酸罌粟堿峰的分離度大于2.0。

2.3對照品溶液的制備

取薄荷腦、磷酸可待因、嗎啡、鹽酸罌粟堿對照品適量，精密稱定，加水飽和乙酸乙酯∶甲醇（4∶1）的混合溶液制成每1 mL含0.2085、0.0426、0.1723、0.0066 mg的混合對照品溶液。

2.4供試品溶液的制備

精密量取樣品15 mL，用氨試液調至pH 9～10，用乙酸乙酯萃取8次（先30 mL 2次，后15 mL 6次），合并乙酸乙酯液，常溫減壓旋轉濃縮至干，用甲醇溶解并轉移至10 mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。

2.5專屬性考察

取強力枇杷露處方組成藥材，按其配方比分別制成缺薄荷腦、缺罌粟殼陰性制劑。按“2.4”項下方法制備成陰性對照溶液，結果表明在薄荷腦、磷酸可待因、嗎啡、鹽酸罌粟堿各峰對應的保留時間處無干擾，見圖1。

圖1　專屬性試驗氣相色譜圖

2.6線性關系考察

分別精密量取濃度為2.0385、0.2035 mg·mL-1的薄荷腦、磷酸可待因混合對照品儲備液0.25、0.5、1.5、2.5、4.5、5 mL于6個10 mL量瓶中；分別精密量取濃度為1.0007、0.2051 mg·mL-1的嗎啡和鹽酸罌粟堿混合對照品儲備液0.05、0.25、0.5、1.5、3.5、4.5 mL于上述6份10 mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度。分別吸取混合標準溶液1 μL注入氣相色譜儀，按“2.1”色譜條件測定。以對照品濃度為橫坐標，峰面積值為縱坐標，繪制標準曲線。見表1。

2.7精密度試驗

表1　線性關系試驗結果（n=6）

精密吸取同一混合對照品溶液（薄荷腦、磷酸可待因、嗎啡和鹽酸罌粟堿濃度分別為0.3058、0.0305、0.0500、0.0103 mg·mL-1）1.0 μL進樣，連續進樣6針。按峰面積進行計算，結果薄荷腦、磷酸可待因、嗎啡、鹽酸罌粟堿的RSD分別1.40%、1.31%、1.82%、1.51%。

2.8重復性試驗

按“2.4”平行制備同批樣品6份，進樣1 μL，按“2.1”方法進行測定，記錄各成分色譜峰的峰面積，計算含量。結果薄荷腦、磷酸可待因、嗎啡、鹽酸罌粟堿含量的平均值（n=6）分別為0.1928、0.0182、0.0931、0.0033 mg·mL-1，RSD分別為1.27%、1.93%、1.52%、0.99%。

2.9穩定性試驗

取同一供試品溶液，置室溫下放置，分別在0、2、4、8、12 h進樣，測定各成分的含量，計算薄荷腦、磷酸可待因、嗎啡、鹽酸罌粟堿濃度的RSD分別為1.74%、1.54%、0.52%、1.45%。

2.10加樣回收率試驗

精密量取已測知薄荷腦、磷酸可待因、嗎啡、鹽酸罌粟堿含量的樣品6份，每份7.5 mL，分別精密加入一定量的4種成分的對照品溶液，按“2.4”項下供試品溶液制備方法制備，測定含量，計算回收率，結果見表2。

表2　加樣回收率結果

2.11樣品測定

取7家制藥公司11批次樣品按“2.4”項下制備供試品溶液，含量測定結果見表3。

3　小結與討論

3.1本實驗考查了乙酸乙酯、氯仿、丙酮等溶劑的萃取效率，結果表明乙酸乙酯的萃取率高于氯仿，并且乙酸乙酯分層快、乳化現象較少。丙酮萃取液中雜質峰干擾多，故選用乙酸乙酯萃取。

3.2實驗探索了樣品經氧化鋁吸附劑、C18固相小柱、PCX固相小柱的處理。由于強力枇杷露樣品太稠，使用氧化鋁吸附劑不易洗脫。另外兩種固相小柱凈化后供試品溶液均檢測不出罌粟堿。

3.3實驗考察了萃取液經減壓旋轉蒸干、常溫蒸干、水浴蒸干處理后4種目標成分的含量，結果表明減壓旋轉濃縮處理后的目標成分含量高于其他兩種處理方式。

3.4通過氣相色譜法對7家制藥公司共11批次的強力枇杷露中薄荷腦、磷酸可待因、嗎啡、鹽酸罌粟堿四種成分進行含量測定，所得結果中，廠家5、6、7的薄荷腦含量均高于理論值，薄荷腦理論含量應為0.15 mg·mL-1，可能因薄荷腦易揮發而加大了投料量。所測結果經spss軟件分析后，少數批次樣品中薄荷腦、磷酸可待因、嗎啡、鹽酸罌粟堿四種成分含量的P值小于0.05，存在較大差異。因此提高強力枇杷露的質量標準意義重大。

表3　樣品測定結果

參考文獻

[1] 中華人民共和國衛生部藥品標準[S].中藥成方制劑（第二冊），1990，272.

[2] 周建衡，曾建偉.HPLC法測定強力枇杷露（煎膏劑）中嗎啡的含量[J].中醫藥導報，2008，14（9）：71-2.

[3] 郭磊.鎮咳藥物的研究進展[J].國外醫藥-合成藥生化藥制劑分冊，2000，21（1）：9-12.

[4] 汪劍飛.GC色譜法測定強力枇杷露中薄荷腦的含量[J].北方藥學，2012，9（12）：1-2.

中圖分類號R927.2

文獻標志碼A

文章編號1673-7806（2014）05-416-03

作者簡介符映均，男，碩士生E-mail:woshifuj1987@163.com

收稿日期2014-05-22修回日期2014-06-02

Determination of Menthol,Codeine Phosphate,Morphine,Papaverine Hydrochloride in Qiangli Pipa Syrup by Gas Chromatography

FU Ying-jun1,ZHANG Li2*,HU Hao-bin1,2,WU Di3
1Nanjing University of Chinese Medicine,Nanjing 210023;2Jiangsu Institute for Food&Drug Control,Nanjing 210008;3JingHua Pharmaceutical Group CO.,LTD.,Nantong 226005

ABSTRACTObjective：To establish a GC method for the determination of menthol,codeine phosphate, morphine,papaverine hydrochloride in Qiangli Pipa syrup.Methods：The syrup was extracted by ethyl acetate and determined by gas chromatography with a flame ionization detector.The compounds were separated on an Agilent HP-1MS capillary column by using temperature programming.Results：The menthol,codeine phosphate,morphine,papaverine hydrochloride showed a good linear relationship, respectively,in their own detecting ranges.The average recoveries were between 96.76%and 113.34%，with RSD＜6.0%.Conc lusions：This method is accurate and suitable for the determination of menthol,codeine phosphate,morphine,papaverine hydrochloride in Qianli Pipa syrup.

KEY WORDSQianlipipa syrup;Menthol;Codeine phosphate;Morphine;Papaverine hydrochloride;Gas Chromatography