微波消解－石墨爐原子吸收分光光度法測(cè)定米格列醇中的鈀

邵俊平，郝貴周，吳善霞

(1.費(fèi)縣食品藥品監(jiān)督管理局，山東 臨沂 273499;2.魯南制藥集團(tuán)有限公司，山東 臨沂 276006)

米格列醇作為一種新型α－葡萄糖苷酶抑制劑，能夠有效治療各人種、各年齡段的非胰島素依賴型糖尿病。其主要功能是降低患者餐后血糖水平，減少糖尿病并發(fā)癥的產(chǎn)生，是一種安全、有效、耐受性良好的藥物，可以取代毒副作用大的同類藥物，成為非胰島素依賴型糖尿病患者的首選藥物，有廣闊的市場(chǎng)空間。本品在合成過(guò)程中用到金屬催化劑鈀炭，根據(jù)EMEA/CHMP頒布的金屬催化劑或金屬實(shí)際殘留量限度規(guī)定的指導(dǎo)文件，鈀屬于一類金屬，故需對(duì)其進(jìn)行研究并加以控制。筆者參考有關(guān)文獻(xiàn)［1，2］，采用原子吸收分光光度法測(cè)定米格列醇中鈀殘留量，為該品種建立完善的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供了科學(xué)依據(jù)。本法操作簡(jiǎn)單，結(jié)果準(zhǔn)確。

1 儀器與試藥

ZEEnit700P石墨爐原子吸收分光光度計(jì)(德國(guó)耶拿公司，配有石墨爐與火焰檢測(cè)器);微波消解爐;鈀單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液1000 μg·mL－1(國(guó)家有色金屬及電子材料分析測(cè)試中心);米格列醇(山東新時(shí)代藥業(yè)有限公司提供，批號(hào):120201、120202、120203);硝酸為優(yōu)級(jí)純，過(guò)氧化氫為優(yōu)級(jí)純，水為超純水。

2 方法

2.1 光譜參數(shù)和原子化條件 鈀空心陰極燈，檢測(cè)波長(zhǎng)247.6 nm;狹縫寬度0.5 nm;石墨爐原子化器;熱解石墨管;高純氬氣，采用石墨爐程序升溫，進(jìn)樣體積 20μL。

表1 石墨爐升溫程序

2.2 鈀標(biāo)準(zhǔn)貯備液的制備 取鈀單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液，用0.5%硝酸溶液稀釋制成每1 L含鈀200 μg的溶液，搖勻，即得。

2.3 供試品溶液的制備 取本品0.2g，置聚四氟乙烯消解罐內(nèi)，加硝酸5mL，加蓋壓緊，放置過(guò)夜后加入過(guò)氧化氫2mL，置水浴中加熱30min后，放入消解儀，進(jìn)行消解。消解完全后，取消解內(nèi)罐置電熱板上緩緩加熱至紅棕色蒸氣揮盡并近干，用0.5%硝酸溶液轉(zhuǎn)移至20mL量瓶中，并用0.5%硝酸溶液稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.4 陰性對(duì)照試驗(yàn) 按“2.3”項(xiàng)下方法，不加樣品制備空白供試液。

2.5 線性關(guān)系考察 精密量取鈀標(biāo)準(zhǔn)貯備液適量，用0.5%硝酸溶液稀釋制成含鈀0.0、20.0、40.0、80.0、100.0、120.0、140.0 μg·L－1的標(biāo)準(zhǔn)溶液。調(diào)整儀器靈敏度到最佳值，以0.5%硝酸溶液為對(duì)照，分別精密量取上述各標(biāo)準(zhǔn)溶液20μL，濃度由低至高，依次測(cè)定吸光度值A(chǔ)。以濃度C對(duì)吸光度值A(chǔ)作圖，進(jìn)行回歸分析，得回歸方程:A=0.0033950C+0.0035965，r=0.9983。結(jié)果表明鈀濃度在0.0～140.0 μg·L－1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.6 精密度試驗(yàn) 取鈀標(biāo)準(zhǔn)貯備液，用0.5%硝酸溶液稀釋制成含鈀 100.0 μg·L－1的標(biāo)準(zhǔn)溶液，依法連續(xù)測(cè)定7次，結(jié)果分別為0.34849、0.36862、0.35024、0.35792、0.36731、0.35542、0.34258，平均值為0.35580，RSD=2.72%(n=7)。結(jié)果表明本法的精密度良好。

2.7 檢出限 參考國(guó)際理論與應(yīng)用化學(xué)聯(lián)合會(huì)(IUPAC)關(guān)于光學(xué)分析檢出限的規(guī)定，采用下列方法進(jìn)行計(jì)算:首先計(jì)算出該方法的檢出限:L=k'Sb/k，式中k'為一定置信水平確定的系數(shù)，通常k'取3，Sb為空白樣品測(cè)定結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)偏差;k為校準(zhǔn)曲線的斜率。本文對(duì)空白樣品測(cè)定11次，結(jié)果分別為:0.02368、0.01948、0.01372、0.01128、0.01904、0.01804、0.02452、0.02328、0.01016、0.01780、0.01404，計(jì)算出Sb=0.00496 μg·L－1，k=0.0033950，檢出限L=4.38 μg·L－1。后用鈀標(biāo)準(zhǔn)貯備液配置成4.38 μg·L－1的標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)樣3次，結(jié)果分別為:0.02131、0.01985、0.02543，平均值為 0.02220，符合線性要求。所以最低檢出限為4.38 μg·L－1。

2.8 回收率試驗(yàn) 稱取已知鈀含量的米格列醇原料(批號(hào):120201)約0.2g，6份，置聚四氟乙烯消解罐中，分別加入 10 μg·L－1的鈀標(biāo)準(zhǔn)品溶液 0.2mL，加硝酸5mL，加蓋壓緊，放置過(guò)夜后加入過(guò)氧化氫2mL，置水浴中加熱30min后，放入消解儀，進(jìn)行消解。消解完全后，取消解內(nèi)罐置電熱板上緩緩加熱至紅棕色蒸氣揮盡并近干，用0.5%硝酸溶液轉(zhuǎn)移至20mL量瓶中，并用0.5%硝酸溶液稀釋至刻度，搖勻，依法測(cè)定吸光度值，取6次測(cè)定結(jié)果的平均值計(jì)算方法的回收率，結(jié)果見表2。結(jié)果表明:平均回收率為94.4%，RSD為3.5%。

表2 回收率試驗(yàn)結(jié)果(n=6)

2.9 樣品測(cè)定 取本品3批樣品，依法測(cè)定，結(jié)果3批樣品(批號(hào):120201，120202，120203)的鈀殘留量分別為0.67、0.56和0.56 ppm。

3 結(jié)論

米格列醇在硝酸溶液中，經(jīng)微波消解發(fā)生劇烈反應(yīng)，甚至發(fā)生爆炸危險(xiǎn)，本法在消解前，加過(guò)氧化氫破壞后，反應(yīng)溫和，測(cè)得結(jié)果精密度好，回收率較高，檢出限可滿足測(cè)定要求，線性范圍可滿足痕量殘留鈀的檢測(cè)，通過(guò)對(duì)3批米格列醇原料中鈀殘留量檢測(cè)，結(jié)果均符合要求。

［1］Committee for Medicinal Products for Human Use(CHMP).Guideline on the Specification Limits for Residues of Metal Catalysts or Metal Reagents［S］.London:European Medicines Agency，2008.

［2］國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典2010年版(二部)［S］.北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010:附錄24 －25.