破壁靈芝孢子粉膠囊對(duì)化學(xué)性肝損傷有輔助保護(hù)功能的研究

摘要：目的 研究破壁靈芝孢子粉膠囊對(duì)酒精性肝損傷是否有輔助保護(hù)功能。方法 選用健康雌性大鼠 連續(xù)30d灌胃后，除陰性對(duì)照組外各組再經(jīng)口灌胃給予50%乙醇，然后取肝臟檢查肝勻漿中的丙二醛（MDA）、還原型谷胱甘肽（GSH）和甘油三酯（TG）的含量；并對(duì)肝臟進(jìn)行組織病理學(xué)檢查，同時(shí)觀察對(duì)動(dòng)物體重和肝重及肝體比的的影響。結(jié)果 在酒精性肝損傷模型成立的條件下，該受試物對(duì)動(dòng)物體重、肝重、肝體比均無(wú)明顯影響（P>0.05）；能顯著降低中、高劑量組大鼠肝勻漿中的過(guò)氧化脂質(zhì)降解產(chǎn)物丙二醛含量（P<0.05）以及升高中、高劑量組大鼠肝勻漿中還原型谷胱甘肽的含量（P<0.05）；組織病理學(xué)檢查結(jié)果（P<0.01）為陽(yáng)性。結(jié)論 破壁靈芝孢子粉膠囊對(duì)酒精性肝損傷有輔助保護(hù)功能。

關(guān)鍵詞：破壁靈芝孢子粉膠囊；肝損傷

酒精是一種肝毒劑，容易引起酒精性肝損傷，導(dǎo)致酒精性肝病[1]。由酒精所致的肝損傷近年來(lái)在我國(guó)呈上升趨勢(shì)，如何有效防治酒精性肝病成為全社會(huì)關(guān)注的問(wèn)題。靈芝又名瑞草，靈芝草。屬藥、食兩用真菌，世界各地均有分布，其子實(shí)體孢子粉，菌絲體均可入藥，有文獻(xiàn)報(bào)道：靈芝孢子粉具有增強(qiáng)免疫力，延緩衰老之功效[2]，現(xiàn)代藥理研究表明，靈芝孢子粉可減低CCL4引起的血清ACT水平的升高，從而提示靈芝孢子粉對(duì)化學(xué)性肝損傷有一定保護(hù)作用。而本實(shí)驗(yàn)也為再次驗(yàn)證該受檢樣品是否對(duì)酒精性肝損傷有保護(hù)作用。

1資料與方法

1.1一般資料 由北京海德潤(rùn)制藥有限公司生產(chǎn)、江西仙客來(lái)生物科技有限公司提供的仙客來(lái)牌破壁靈芝孢子粉膠囊，膠囊內(nèi)容物為紅褐色。人體每日推薦量為2800mg/60kg·BW，試驗(yàn)時(shí)用蒸餾水作溶劑配制成所需濃度的受試物溶液。

1.2動(dòng)物及飼料 試驗(yàn)動(dòng)物：由成都達(dá)碩生物科技有限公司提供的雌性SD大鼠50只，體重180～220g ，生產(chǎn)許可證號(hào)為SCXK（川）2008-24.SPF級(jí)。動(dòng)物飼料由四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院.四川省人民醫(yī)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所提供，生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK（川）2010-001。

1.3方法 將雌性SD大鼠隨機(jī)分為5組，每組10只，試驗(yàn)設(shè)233mg/kg.BW、700mg/kg.BW、1400mg/kg.BW三個(gè)劑量組，分別稱取5.83g、17.5g、35.0g受試物，依次加蒸餾水至250ml混勻備用，冰箱保存，用完再配。另設(shè)蒸餾水對(duì)照組和50%乙醇模型對(duì)照組。采用酒精肝損傷模型法，三個(gè)劑量組給予不同劑量的受試物，陰性對(duì)照組和模型對(duì)照組給予蒸餾水，按10ml/kg. BW經(jīng)口灌胃1次/d，連續(xù)給予30d，稱體重2次/w，以此調(diào)整給藥量。試驗(yàn)結(jié)束時(shí)將模型對(duì)照組和三個(gè)劑量組一次經(jīng)口灌胃給予50%無(wú)水乙醇，劑量為14ml/kg. BW，陰性對(duì)照組給予同體積的蒸餾水，禁食16h后處死動(dòng)物取肝臟稱重，計(jì)算臟體比，并用肝臟進(jìn)行生化指標(biāo)檢測(cè)及組織病理學(xué)檢查。

1.4肝組織病理學(xué)檢查 從動(dòng)物肝左葉中部做橫切面取材、切片、染色、鏡下觀察脂滴在肝臟中的分布、范圍和面積。每例動(dòng)物肝組織用40倍物鏡連續(xù)觀察組織切片，根據(jù)根據(jù)陽(yáng)性細(xì)胞多少和分布的范圍，按0、1、2、3、4分進(jìn)行評(píng)分。將所得分?jǐn)?shù)的平均值作為該例肝組織的脂肪染色評(píng)分。

1.5數(shù)據(jù)處理 數(shù)據(jù)資料均采用SPSS 11.0軟件進(jìn)行分析。如P<于0.05，則用Dunnett法進(jìn)行兩兩比較；若方差不齊，則進(jìn)行數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換，仍不齊，改用秩和檢驗(yàn)，如P<0.05，則用Dunnett，s T3法進(jìn)行兩兩比較。數(shù)據(jù)比較采用T檢驗(yàn)。

1.6評(píng)定標(biāo)準(zhǔn) 肝臟MDA ，TG，GSH3項(xiàng)指標(biāo)陽(yáng)性；或MDA，TG，GSH任意兩項(xiàng)指標(biāo)陽(yáng)性和肝臟組織病理學(xué)診斷結(jié)果陽(yáng)性，均可判定受檢樣品對(duì)酒精性肝損傷具有輔助保護(hù)功能。

2結(jié)果

2.1破壁靈芝孢子粉膠囊對(duì)大鼠體重、肝重、肝體比與模型對(duì)照組比較，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

2.2模型對(duì)照組大鼠肝勻漿中的MDA、TG含量較陰性對(duì)照組顯著升高（P<0.01），GSH含量顯著降低（P<0.01），表明該模型是成功的，實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)可靠。三個(gè)劑量組的MDA、 GSH 、TG含量與模型對(duì)照組比較，可見(jiàn)中、高劑量組的MDA顯著降低，GSH顯著升高（P<0.05）有顯著性差異，而三個(gè)劑量組的TG無(wú)顯著性差異（P>0.05）。

2.3 模型對(duì)照組大鼠的肝細(xì)胞脂肪染色評(píng)分較陰性對(duì)照組顯著升高（P<0.01），三個(gè)劑量組大鼠的肝細(xì)胞脂肪染色評(píng)分與模型對(duì)照組比較，中、高劑量組降低有顯著性差異（P<0.01），見(jiàn)表1。

3討論

靈芝作為一種有名的中藥，在國(guó)內(nèi)外已有較多的研究，但對(duì)于靈芝孢子粉的研究還停留在初級(jí)階段。本文采用的是大鼠酒精灌胃建立肝損傷動(dòng)物模型，研究了破壁靈芝孢子粉膠囊對(duì)酒精性肝損傷的保護(hù)作用。其對(duì)酒精性肝損保護(hù)作用的機(jī)理可能是：①抗脂質(zhì)過(guò)氧化，皂甙、黃酮、VitC、VitE具有很強(qiáng)的清除自由基能力，從而防止氧自由基對(duì)肝細(xì)胞膜及亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)的脂質(zhì)過(guò)氧化損傷，保護(hù)肝細(xì)胞膜完整性；②改善肝臟微循環(huán)，皂甙能解除血液的濃、粘、聚、凝狀態(tài)，改善肝臟微循環(huán)，增加血流量，促進(jìn)毒物排出，從而減輕肝損傷。同時(shí)靈芝孢子粉中含有豐富的微量元素鈷（Co）、硒（Se）、鉻 （Cr）與人類的健康與疾病的防治有密切的關(guān)系[3，4]。本實(shí)驗(yàn)的確證實(shí)該破壁靈芝孢子粉膠囊對(duì)酒精性肝損傷有輔助保護(hù)功能。其確切的護(hù)肝的功效成分及作用機(jī)理還有待進(jìn)一步研究。主要原因是孢子粉收集較為困難，另外對(duì)孢子的破壁技術(shù)還不夠成熟。為進(jìn)一步深入研究，應(yīng)當(dāng)加快開(kāi)展更有效的靈芝孢子收集方法的研究，加強(qiáng)對(duì)破壁方法的研究，同時(shí)深入探討靈芝孢子粉的藥理藥效機(jī)制，完善其藥用價(jià)值。

參考文獻(xiàn)：

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編輯/孫杰