BALF腫瘤標(biāo)記物聯(lián)合檢測(cè)在肺癌診斷中的應(yīng)用

摘要：目的 探討B(tài)ALF腫瘤標(biāo)記物聯(lián)合檢測(cè)在肺癌診斷中的應(yīng)用。方法 收集我院2011年9月～2014年3月收治確診肺癌患者46例，肺部良性病變24例，所有患者均需經(jīng)過(guò)支氣管鏡活檢或（和）刷檢檢查，部分患者經(jīng)該檢查所得病理組織學(xué)和細(xì)胞學(xué)確診，經(jīng)支氣管鏡檢查未確診者，則隨后經(jīng)外胸腔鏡手術(shù)或開(kāi)胸手術(shù)或經(jīng)皮肺穿刺所得病理組織學(xué)和細(xì)胞學(xué)確診。在做常規(guī)支氣管鏡刷檢或（和）活檢的同時(shí)行病變肺段或肺葉支氣管肺泡灌洗，留取支氣管肺泡灌洗液（BALF），并于當(dāng)日空腹抽取靜脈血5 mL，兩者離心后凍存于-80℃冰箱，行腫瘤標(biāo)志物檢查。結(jié)果 肺癌組BALF及血清中的CEA均明顯高于對(duì)照組，其中，以鱗癌升高最為明顯，其次為小細(xì)胞癌，而鱗癌及小細(xì)胞癌BALF的水平高于血清水平。肺癌組BALF及血清中的NSE除在小細(xì)胞癌中有明顯升高外，在鱗癌、腺癌中的水平與對(duì)照組相比無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。而小細(xì)胞癌組BALF的NSE水平明顯高于血清。3種腫瘤標(biāo)記物聯(lián)合診斷，BALF的真陽(yáng)性率為66%，假陽(yáng)性率為20%，與病理結(jié)果的一致性最高（0.61%）。結(jié)論 CEA+NSE+CA153-BALF敏感性較高，假陽(yáng)性率較低，與病理具有高度一致性，臨床應(yīng)將其用于肺癌的早期篩查。

關(guān)鍵詞：BALF腫瘤標(biāo)記物；聯(lián)合檢測(cè)；肺癌診斷

對(duì)于肺癌高危人群的早期篩查可有效改善患者的預(yù)后及生存率。但目前導(dǎo)致肺癌發(fā)現(xiàn)較晚的原因中，最大的障礙在于缺乏有效、經(jīng)濟(jì)、可普及、特異性較高的早期診斷方法[1]。盡管現(xiàn)有觀點(diǎn)對(duì)CT在早期診斷肺癌方面的作用持肯定態(tài)度，且證實(shí)CT與胸片相比，可提早1年診斷肺癌，然而，其早期檢測(cè)作用主要體現(xiàn)于周?chē)头伟珜?duì)中央型肺癌則效果較差。而其他有創(chuàng)檢查（支氣管鏡技術(shù)）亦不適用于肺癌的早期篩查[2]。

血清學(xué)腫瘤標(biāo)記物檢測(cè)具有價(jià)廉、易行、創(chuàng)傷小、安全、可普及性等特點(diǎn)并曾被寄予厚望。然而，針對(duì)肺癌，目前臨床廣泛應(yīng)用的腫瘤標(biāo)記物特異性均較差， 某些良性疾病時(shí)腫瘤標(biāo)記物也可以升高，至今尚無(wú)理想和單項(xiàng)腫瘤標(biāo)志物用于肺癌的早期臨床診斷，其敏感性、特異性均難以達(dá)到理想水平[3]。因此，多數(shù)學(xué)者主張多指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)以提高肺癌診斷的陽(yáng)性率。有鑒于此，本研究通過(guò)收集我院2年半期間肺癌患者46例，肺部良性病變患者24例，以病理檢測(cè)為金標(biāo)準(zhǔn)，比較腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合篩查與CT對(duì)肺癌患者診斷的敏感性、假陽(yáng)性率等，以闡明腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合篩查在肺癌早期診斷中的應(yīng)用價(jià)值。

1資料與方法

1.1一般資料

1.1.1入組患者 回顧性收集我院2011年9月～2014年3月收治的確診肺癌的患者46例，肺部良性病變24例，所有患者均需經(jīng)過(guò)支氣管鏡活檢或（和）刷檢檢查，部分患者經(jīng)該檢查所得病理組織學(xué)和細(xì)胞學(xué)確診，經(jīng)支氣管鏡檢查未確診者，則隨后經(jīng)外胸腔鏡手術(shù)或開(kāi)胸手術(shù)或經(jīng)皮肺穿刺所得病理組織學(xué)和細(xì)胞學(xué)確診，所有患者均表現(xiàn)為肺內(nèi)孤立的病灶，并未發(fā)現(xiàn)肺外轉(zhuǎn)移灶。在做常規(guī)支氣管鏡病變肺段或肺葉支氣管肺泡灌洗，留取支氣管肺泡灌洗液（BALF），部分患者行支氣管肺泡灌洗后行支氣管鏡活檢或（和）刷檢檢查，并于當(dāng)日空腹抽取靜脈血5 mL，兩者離心后凍存于-80℃冰箱，行腫瘤標(biāo)志物檢查。所有患者術(shù)前均獲告知，并簽署知情同意書(shū)。本研究符合赫爾辛基宣言中關(guān)于醫(yī)學(xué)倫理方面的要求。

1.1.2臨床資料 70例患者中，46例經(jīng)組織病理學(xué)確診為肺癌，其中男26例，女20例，非小細(xì)胞肺癌35例（鱗狀細(xì)胞癌5例，腺癌29例，未分化大細(xì)胞癌1例），小細(xì)胞肺癌11例；肺部良性病變24例，男14例，女10例，其中，結(jié)核球13例，炎性假瘤7例，錯(cuò)構(gòu)瘤2例，硬化性血管瘤1例，囊腫1例。肺癌組中位年齡56歲（40～81歲），肺部良性病變組中位年齡50歲（33～78歲）。

1.2方法 將支氣管肺泡灌洗液及靜脈血以離心機(jī)離心后分別取適量封存好編號(hào)后再存放于-80℃冰箱。分別以腫瘤標(biāo)志物芯片檢測(cè)出患者的BALF及血清中腫瘤標(biāo)志物NSE、CEA、CA153的濃度。

1.3判定標(biāo)準(zhǔn) 聯(lián)合檢測(cè)陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)：聯(lián)合檢測(cè)組合中任一指標(biāo)超過(guò)正常值高限即為陽(yáng)性，均為陰性定為陰性。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 列出真（a）、假（b）陽(yáng)性例數(shù)、真（c）、假（d）陰性例數(shù)，按真陽(yáng)性率=a/（a+c）、假陽(yáng)性率=b/（b+d）的公式計(jì)算的靈敏度（真陽(yáng)性率）、假陽(yáng)性率。以組織病理學(xué)為金標(biāo)準(zhǔn)，采用kappa一致性檢驗(yàn)評(píng)估結(jié)果與病理結(jié)果的一致性。Kappa≥0.75兩者一致性較好；0.75>Kappa≥0.4兩者一致性一般；Kappa<0.4兩者一致性較差。統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件為SPSS 13.0。

2結(jié)果

2.1肺癌組與對(duì)照組血清、BALF中NSE、CEA、CA153的含量對(duì)比 分組因素對(duì)血清、BALF中NSE、CEA、CA153的影響具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。肺癌組BALF及血清中的CEA均明顯高于對(duì)照組，其中，以鱗癌升高最為明顯，其次為小細(xì)胞癌，而鱗癌及小細(xì)胞癌BALF的水平高于血清水平。肺癌組BALF及血清中的NSE除在小細(xì)胞癌中有明顯升高外，在鱗癌、腺癌中的水平與對(duì)照組相比無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。而小細(xì)胞癌組BALF的NSE水平明顯高于血清。相同的趨勢(shì)可見(jiàn)于CA153，見(jiàn)表1。

2.2腫瘤標(biāo)記物與病理一致性結(jié)果分析 70例患者中，46例由病理確診，24例為非肺癌患者。CEA-BALF中，32例患者陽(yáng)性，其中，18例與病理符合，14例與病理不符合；而剩余38例CEA-BALF陰性的患者中，10例與病理符合，28例與病理不符合。因此，其真陽(yáng)性率為39%，假陽(yáng)性率為58%，按照此類(lèi)描述，CEA-血清真陽(yáng)性率為43%，假陽(yáng)性率為42%。其中，NSE-BALF與CEA+NSE+CA153-BALF真陽(yáng)性率最高，達(dá)65%，但NSE-BAL假陽(yáng)性率亦較高，為58%，而3種腫瘤標(biāo)記物聯(lián)合診斷，BALF的假陽(yáng)性率僅為20%，與病理結(jié)果的一致性最高（0.75%），見(jiàn)表2。

3討論

CEA是一種細(xì)胞膜表面的糖蛋白，在胚胎組織及不同的腫瘤組織中存在，用CEA作為腫瘤標(biāo)志物的研究已有20 多年的歷史，有研究發(fā)現(xiàn)肺腺癌細(xì)胞能直接產(chǎn)生CEA[4]腫瘤標(biāo)記物正常情況下血中無(wú)表達(dá)或僅有少量存在，而腫瘤存在時(shí)， 可在血中出現(xiàn)或含量明顯增高。CEA是在胚胎期表達(dá)，正常成年人不表達(dá)，伴隨腫瘤發(fā)生又重新表達(dá)的抗原。最早在結(jié)腸癌患者血清中發(fā)現(xiàn)CEA，除在胚胎性腫瘤組織外，在成人胃腸、肺、乳腺等癌組織中均有表達(dá)。目前CEA多與其他腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)，對(duì)判斷腫瘤的發(fā)生以及提高肺癌的診斷水平十分有效，而且經(jīng)濟(jì)實(shí)惠，患者痛苦少，易于接受。CA153作為乳腺癌的特異性標(biāo)志物，現(xiàn)有很多報(bào)道都已證實(shí)肺癌患者血清中也都有明顯升高[5-6]。NSE是由2 個(gè)r 亞單位組成的糖酵解酶，存在于正常神經(jīng)細(xì)胞和神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞內(nèi)，神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞和神經(jīng)源性腫瘤中含有大量的NSE，其含量是正常肺組織中的3～35 倍。小細(xì)胞肺癌（small cell lung cancer，SCLC）是一種起源于神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞的腫瘤，具有明顯的神經(jīng)內(nèi)分泌（neuroendocrine，NE）分化特征。多數(shù)研究現(xiàn)已證實(shí)，部分（non-small cell lung cancer，NSCLC） 亦伴有NE 分化，同時(shí)在生物學(xué)行為上與其他NSCLC 有很大差別，具有類(lèi)似SCLC 的生物學(xué)特性，對(duì)化療比較敏感，具有更強(qiáng)的腫瘤侵襲特性[7]，這可能是NSE 在NSCLC 中為何異常表達(dá)的重要原因。NSE 不僅在SCLC 中明顯升高，在一些NSCLC 中也有明顯升高，總陽(yáng)性率達(dá)50%左右[8]。

支氣管肺泡灌洗技術(shù)是近年來(lái)逐漸被臨床廣泛采用的成熟技術(shù)，近年研究發(fā)現(xiàn)早期肺癌患者血清中腫瘤標(biāo)志物CEA、CA153、NSE濃度較低，而B(niǎo)ALF中腫瘤標(biāo)志物較血中出現(xiàn)早、濃度高，尤其把支氣管肺泡灌洗技術(shù)與纖維支氣管鏡檢查相結(jié)合，對(duì)早期癌的診斷有一定的輔助作用[9]。NSE、CEA在BALF中的含量明顯高于血清，并且良、惡性比較有顯著性差異，其靈敏度和特異性高。這可能是由于肺癌細(xì)胞分泌、代謝物首先進(jìn)入支氣管肺泡，然后才進(jìn)入血循環(huán)的緣故[10]，因而在腫瘤早期血中含量較低，不易檢測(cè)，當(dāng)含量明顯升高被檢出時(shí)，多數(shù)患者已進(jìn)入晚期；而B(niǎo)ALF是取自于病變部位的支氣管肺泡內(nèi)，因而較血清中出現(xiàn)早，含量高[11]。目前臨床上還少有用支氣管肺泡灌洗液中腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)來(lái)輔助肺癌的診斷。

本研究結(jié)果表明：上述3種腫瘤標(biāo)記物在不同類(lèi)型，不同標(biāo)本中的表達(dá)各有差異。CEA在鱗癌升高最為明顯，其次為小細(xì)胞癌，而鱗癌及小細(xì)胞癌BALF的水平高于血清水平。肺癌組BALF及血清中的NSE除在小細(xì)胞癌中有明顯升高外，在鱗癌、腺癌中的水平與對(duì)照組相比無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。而小細(xì)胞癌組BALF的NSE水平明顯高于血清。上述結(jié)果與之前的文獻(xiàn)報(bào)道類(lèi)似。此外，我們通過(guò)以病理為金標(biāo)準(zhǔn)，通過(guò)一致性檢驗(yàn)可知：盡管NSE的敏感性最高，但其假陽(yáng)性率較高，不適用于以篩查為目的的早期腫瘤診斷，而將此3種標(biāo)記物聯(lián)合起來(lái)進(jìn)行肺癌診斷，雖然真陽(yáng)性率與單用NSE一致，但其假陽(yáng)性率最低，與病理結(jié)果具有高度一致性， 且BALF明顯優(yōu)于外周血血清。

綜上，CEA+NSE+CA153-BALF敏感性較高，假陽(yáng)性率較低，與病理具有高度一致性，臨床應(yīng)將其用于肺癌的早期篩查。

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編輯/張燕