心型脂肪酸結(jié)合蛋白\\CK-MB和LDH聯(lián)合檢測(cè)在毒蛇咬傷患者中的診斷價(jià)值

摘要：目的探討心型脂肪酸結(jié)合蛋白、CK-MB和LDH在毒蛇咬傷心肌損傷中的診斷價(jià)值。方法將286例毒蛇咬傷的臨床資料按入院時(shí)的病情分為：輕型174例，重型63例，危重型49例。按蛇毒類型分類：神經(jīng)毒22例，血循毒16例，混合毒248例。比較各組間的心型脂肪酸結(jié)合蛋白和心肌酶譜的變化。結(jié)果h-FABP在健康組、輕型組中結(jié)果有顯著性差異(P<0.05)，而CK-MB、LDH在健康組、輕型組中結(jié)果有無(wú)顯著性差異(P>0.05)。CK-MB在重型組、危重組中結(jié)果有顯著性差異(P<0.05)，而h-FABP在重型組、危重組中結(jié)果有無(wú)顯著性差異(P>0.05)。在血循毒和混合毒咬傷患者中，h-FABP、CK-MB、LDH三種標(biāo)志物與健康組相比有顯著性差異(P<0.05)，神經(jīng)毒組與健康組無(wú)顯著差異(P>0.05)。結(jié)論h-FABP、CK-MB、LDH三種血清標(biāo)志物對(duì)于蛇傷心肌損傷的診斷敏感高、特異性好、監(jiān)測(cè)時(shí)間長(zhǎng)的特點(diǎn)，適宜于臨床應(yīng)用。

關(guān)鍵詞：心型脂肪酸結(jié)合蛋白；CK-MB；LDH

毒蛇咬傷可引起身體多器官損傷，嚴(yán)重的可引起心臟的損傷而危及生命，以往用心肌酶譜（AST、CK、LDH、HBDH）作為心肌損傷的診斷指標(biāo)，但心肌酶譜存在心肌損傷后釋放時(shí)間較晚及特異性差往往會(huì)造成臨床的及時(shí)診治。本研究采用心型脂肪酸結(jié)合蛋白（heart-type fatty acid binding proteinhFABP）、CK-MB、LDH聯(lián)合檢測(cè)，旨在能對(duì)毒蛇咬傷患者的心肌損傷作出正確評(píng)價(jià)，以指導(dǎo)臨床用藥。

1資料與方法

1.1一般資料①毒蛇咬傷患者286例，來(lái)自江蘇省南通市中醫(yī)院2012年7月~2013年9月住院患者，男性192例，女性94例。年齡11~78歲，平均年齡44.5歲。正常健康體檢人員40例。②患者分類：按臨床癥狀：分為輕型（174例）、重型（63例）、危重型（49例）。按蛇毒類型：分為神經(jīng)毒（22例）、血循毒（16例），混合毒（248例）。③標(biāo)本：采集靜脈血4ml立即送檢，血液凝固后以3500轉(zhuǎn)/min離心10min，取血清待用。

1.2主要儀器ADVIA2400全自動(dòng)生化儀（德國(guó)SIEMENSAGFWB） 、AIA 2000全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光儀（日本Tosoh Corporation）、LEPU Quant-Gold-1免疫定量分析儀（樂(lè)普（北京）醫(yī)療器械股份有限公司）。

1.3主要試劑CK-MB的檢測(cè)試劑購(gòu)自日本Tosoh Corporation、心型脂肪酸結(jié)合蛋白（H-FABP)檢測(cè)試劑購(gòu)自樂(lè)普（北京）醫(yī)療器械股份有限公司、LDH檢測(cè)試劑購(gòu)自德賽診斷系統(tǒng)（上海）有限公司。

1.4方法①血清中乳酸脫氫酶（LDH)：采用速率法在ADVIA2400全自動(dòng)生化儀上進(jìn)行檢測(cè)。②血清中肌酸激酶同工酶（CK-MB)：采用微粒子酶免疫發(fā)光法在AIA 2000全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光儀上進(jìn)行檢測(cè)。③血清中心型脂肪酸結(jié)合蛋白（H-FABP)：采用膠體金免疫層析法在LEPU Quant-Gold-1免疫定量分析儀上進(jìn)行檢測(cè)。步驟如下:?訩從原包裝試劑袋中取出檢測(cè)試紙，在1h內(nèi)應(yīng)盡快使用，特別是在室溫高于30℃，并且在高度潮濕的環(huán)境中應(yīng)盡快使用。?訪將試紙放置在干凈的水平臺(tái)面上，用滴管垂直滴入2~3滴血漿標(biāo)本于試紙中的樣本孔中。?訫5min后采用LEPU Quant-Gold-1免疫定量分析儀檢測(cè)試紙中H-FABP含量，測(cè)試結(jié)果應(yīng)在12~15min之內(nèi)完成。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS 10.0 統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)各種檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行分析。

2結(jié)果

2.1健康、輕型、重型、危重型組中三種標(biāo)志物檢測(cè)H-FABP在健康組、輕型組、重型組患者中其值皆成上升趨勢(shì)，且三者之間有顯著性差異(P<0.05)，而在危重組與重型組之間雖然二者結(jié)果有所差異但無(wú)顯著性差異(P>0.05)。CK-MB在重型組、危重組與健康組之間檢測(cè)結(jié)果有顯著性差異；而在輕型組與健康組之間無(wú)顯著性差異(P>0.05)。LDH在健康組與重型組、危重型組之間有顯著性差異(P<0.05)，但健康組與輕型組之間無(wú)顯著性差異(P>0.05)；而且健康組、輕型組、重型組、危重型組四組順次相比均無(wú)顯著性差異(P>0.05)，見(jiàn)表1。

采用Levene F方差齊性檢驗(yàn)方法對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行組間的均值比較：重型、危重型組中三種標(biāo)志物與健康組相比均有顯著性差異(P<0.05)，輕型組中H-FABP與健康組比有顯著性差異(P<0.05)，其他二種標(biāo)志物無(wú)顯著性差異(P>0.05)

2.2神經(jīng)毒、混合毒、血循毒組中三種標(biāo)志物檢測(cè)：H-FABP在健康組與神經(jīng)毒組中無(wú)顯著性差異(P>0.05)；H-FAB在健康組與混合毒組、血循毒組之間有顯著性差異(P<0.05)。CK-MB、LDH的結(jié)果與H-FABP相似，見(jiàn)表2。

采用Levene F方差齊性檢驗(yàn)方法對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行組間的均值比較：H-FABP、CK-MB、LDH檢測(cè)結(jié)果在健康組與神經(jīng)毒組中均無(wú)顯著性差異(P>0.05)；而在健康組與混合毒組、血循毒組之間均有顯著性差異(P<0.05)。H-FABP、CK-MB 在混合毒組與血循毒組之間有顯著性差異(P<0.05)；而LDH在混合毒組與血循組之間無(wú)顯著性差異(P>0.05)。

3討論

蛇毒可引起身體多器官損傷，嚴(yán)重的可引起心肌損傷而危及生命，早期診斷早期治療顯得尤為重要，以往臨床以心肌酶譜作為診斷心肌損傷的指標(biāo)[1]，而心肌酶譜廣泛存在于心肌、腎臟、骨骼肌等組織中，對(duì)于心肌損傷的靈敏性高但是特異性較低，尤其是合并其它組織損傷時(shí)。在毒蛇咬傷的患者中，特別是混合毒和血循毒的患者由于有骨骼肌的損傷，肌肉組織的炎癥、壞死、溶解，導(dǎo)致心肌酶譜明顯增高，極易被臨床醫(yī)生誤診為心肌損傷。心型脂肪酸結(jié)合蛋白（H-FABP）大量存在于心肌組織中，約占心臟全部可溶性蛋白的4％～8％，分子量為14～15kDa[2]。屬于細(xì)胞內(nèi)小的疏水基配體結(jié)合蛋白家族，是心肌細(xì)胞內(nèi)脂肪酸運(yùn)輸和調(diào)節(jié)的主要蛋白，在心肌中的含量豐富1，當(dāng)心肌缺血損傷后立即釋放入血，因 此 檢 測(cè)H-FABP含量對(duì)于心肌損傷患者的診斷和治療具有重要意義[3，4]。

心肌缺血性損傷出現(xiàn)后，h-FABP可以早在胸痛發(fā)作后1~3h在血液中被發(fā)現(xiàn)，6~8h達(dá)到峰值而且血漿水平在24~30h內(nèi)恢復(fù)正常[5]；CK-MB在心肌梗死后2~4h開(kāi)始升高，18~36h達(dá)到高峰，約維持2~4d后恢復(fù)正常[6]；而LDH在心肌發(fā)生損傷之后12~24h開(kāi)始升高，3~6d達(dá)到峰值，持續(xù)時(shí)間可達(dá)10d[7]。 LDH對(duì)心肌損傷的病程觀察以及就診較晚的患者具有重要的價(jià)值，如LDH病程中再次升高或恢復(fù)遲，可預(yù)示再發(fā)生損傷或損傷范圍擴(kuò)大[8]。這些特性決定了h-FABP、CK-MB、LDH三種指標(biāo)在檢測(cè)心肌損傷時(shí)各有側(cè)重點(diǎn)，h-FABP適用于早期、輕、中度的心肌、而CK-MB適用于早中期、中、重高的心肌損傷、LDH主要適用于心肌損傷的后期診斷。本研究通過(guò)對(duì)健康、輕型、重型、危重型組中h-FABP、CK-MB、LDH三種標(biāo)志物檢測(cè)證實(shí)了這一點(diǎn)；h-FABP在健康組、輕型組中結(jié)果有顯著性差異，而CK-MB、LDH在健康組、輕型組中結(jié)果有無(wú)顯著性差異。CK-MB在重型組、危重組中結(jié)果有顯著性差異，而h-FABP在重型組、危重組中結(jié)果有無(wú)顯著性差異。LDH在健康組、輕型組、重型組、危重型組四組中結(jié)果順次相比均無(wú)顯著性差異，這與患者的采血時(shí)間有關(guān)。

本研究發(fā)現(xiàn)在血循毒和混合毒咬傷患者中，h-FABP、CK-MB、LDH三種標(biāo)志物與健康組相比有顯著性差異，神經(jīng)毒組與健康組無(wú)顯著差異；說(shuō)明血循毒與混合毒對(duì)心肌損害比神經(jīng)毒強(qiáng)。因此，h-FABP、CK-MB、LDH三種血清標(biāo)志物對(duì)于蛇傷心肌損傷的診斷敏感高、特異性好、監(jiān)測(cè)時(shí)間長(zhǎng)的特點(diǎn)，適宜于臨床應(yīng)用。

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