抗內皮細胞抗體檢測在診斷血管炎中的應用分析

摘要：目的探究在系統性血管炎臨床診斷中抗內皮細胞抗體（AECA）檢測的應用意義。方法回顧性分析2011年12月~2013年12月我院收治的87例系統性血管炎患者，運用細胞酶聯免疫吸附試驗法檢測患者血清中AECA的水平；同時取87例正常人作為對照組，同樣進行上述的血液生化檢查，將兩組檢測結果進行對比分析。結果系統性血管炎組患者血清AECA陽性率明顯高于正常人組，兩組之間的數據差異具有統計學意義（P<0.05）。結論系統性血管炎患者普遍存在血清AECA表達陽性，因此AECA檢測對于血管炎的臨床診斷具有較高的敏感性。

關鍵詞：抗內皮細胞抗體（AECA）；系統性血管炎；診斷

血管內皮細胞表面存在很多抗原分子，抗內皮細胞抗體可通過與內皮細胞表面相應的抗原結合，引起相關免疫反應，造成血管管壁的損傷，引發(fā)炎癥反應[1]。AECA作為一種血清生化檢測指標，廣泛應用于免疫介導的血管損傷相關的機體疾病。本研究通過檢測系統性血管炎患者血清AECA陽性率分析AECA檢測對于血管炎診斷敏感性的高低，現匯報如下：

1資料與方法

1.1一般資料選擇自2011年12月~2013年12月于我院風濕免疫科就診的87例系統性血管炎患者作為研究對象，疾病診斷均符合1990年美國風濕病學會系統性血管炎的診治分類標準，見表1。所有患者作為一組，其中男58例，女29例，年齡28~75歲，平均年齡（37.4±2.6）歲，同時取87例正常人（未患免疫相關性疾病）作為對照組，男56例，女31例，年齡32~74歲，平均年齡（38.4±2.3）歲。此項研究已獲得本單位倫理委員會的論證批準，同時所有受試者均由本人或其家屬簽署知情同意書。

1.2方法[2]具體試驗步驟：第一步，在體外進行人臍靜脈內皮細胞的分離和培養(yǎng)，對于培養(yǎng)得到的內皮細胞的特性需進行堅定，方法為經人Ⅷ因子相關抗原免疫組織化學染色法；第二步，將通過不同臍帶分離培養(yǎng)得到的1~2代內皮細胞經細胞酶聯免疫吸附試驗法進行混合培養(yǎng)，在其分裂增殖成單層后再種植于96孔細胞培養(yǎng)板，采用37℃、5％CO2環(huán)境進行孵育；第三步，在內皮細胞再次分裂增殖成單層，用磷酸鹽緩沖液(PBS)沖洗3次，再用0.2％戊二醛和0.5％Triton-X-100固定15 min；2％牛血清白蛋白(BSA)37℃封閉2h；加入1：50待測血清37℃、2h；第四步，加入1：3000稀釋的辣根酶標羊抗人IgG二抗(Sigma公司)37℃、1h；3，3'，5，5'-四甲基聯苯胺(TMB)顯色(Sigma公司)，終止，讀數。

1.3觀察指標[3]兩組患者血清生化檢測結果中AECA的陽性率。

1.4統計學方法應用SPSS 18.0 軟件進行統計分析。結果以標準差(x±s)，算術平均數±形式表示，計量資料進行t檢驗，計數資料應用χ2檢驗，P<0.05時差異有統計學意義。

2結果

87例患者中，血清AECA陽性例數58例，陽性率達66.67%；87例正常人中，血清AECA陽性例數3例，陽性率為3.45%，兩組之間的數據差異具有統計學意義（χ2=76.3601，P<0.05）；各病種間的數據差異不顯著，沒有統計學意義（P>0.05），見表2。

3討論

系統性血管炎是一類由于血管管壁發(fā)生炎癥反應而出現血管的損傷，如纖維素滲出沉積、膠原纖維玻璃樣變性、血管內皮細胞變性壞死等特征的臨床綜合征。系統性血管炎按發(fā)病原因分為原發(fā)性血管炎和繼發(fā)性血管炎，前者包括變應性肉芽腫血管炎、結節(jié)性多動脈炎、韋格納肉芽腫病、顯微鏡下多動脈炎、大動脈炎等，后者包括系統性紅斑狼瘡、類風濕性關節(jié)炎皮肌炎有肺部病發(fā)癥等。血管管壁發(fā)生炎癥主要表現為炎性細胞的浸潤、內皮細胞的變性壞死、血管管壁通透性增大等。血管炎的發(fā)生機制存在多種學說，其中內皮細胞的受損一直是國內外學者研究血管炎發(fā)生機制的熱點問題，同時AECA的存在可能與內皮細胞的受損擁有相關性；在實際臨床工作中，也發(fā)現在系統性血管炎患者的血清中檢測到AECA的存在[4]。

抗內皮細胞抗體(AECA)是一類可以與存在于內皮細胞多種分子蛋白相互結合的非同質性自身免疫性抗體，它的抗原分子為表達于血管內皮細胞表面或吸附于其上的一些蛋白分子，同時這些抗原分子會因患者以及所患疾病的不同而表現出一定的特異性，當然這些抗原分子中會存在一些針對某個或某類疾病相關的特定抗原， AECA在不同的自身免疫性疾病中也可能具有不同的致病作用，即是，AECA在不同的疾病中具有不同的異質性，而這種異質性的存在也為其用于不同疾病的診斷提供了可能。AECA還可以與血管內皮細胞之外的細胞上皮細胞、外周血單個核細胞以及成纖維細胞發(fā)生交叉抗原反應。有研究報道稱[5]，在經由機體免疫反應、炎癥反應所介導的，同時與血管管壁內皮細胞損傷相關的多數自身免疫性疾病中發(fā)現有抗內皮細胞抗體廣泛出現，這種現象在系統性血管炎中尤其突出，除此之外，其他相關疾病還包括有系統性紅斑狼瘡(SLE) 、白塞病網、系統性硬化等等。近年來，對于AECA及其相關靶抗原的研究已經逐漸成為熱點，AECA通過多種復雜機制參與血管ECs的損傷，并誘導血管炎癥發(fā)生，與眾多疾病，尤其是系統性血管炎的發(fā)病過程及病情活動有一定的相關性。本研究結果提示在大多數系統性血管炎患者的血清中可以檢測到AECA的存在，這將為系統性血管炎的臨床診斷工作開辟出一條新的思路，在一定程度上，AECA的檢測對于系統性血管炎的臨床診斷的敏感性的提高具有較高的價值。

綜上所述，抗內皮細胞抗體檢測可以提高系統性血管炎診斷的敏感性，值得在臨床推廣應用。

參考文獻：

[1]陳柏諭，任少敏.抗內皮細胞抗體與系統性血管炎關系的研究進展[J].臨床兒科雜志，2013，31(9):891-892.

[2]李立明，李金玉，曾小平，等.抗內皮細胞抗體與抗中性粒細胞胞漿抗體聯合檢測在診斷血管炎中的應用[J].贛南醫(yī)學院學報，2011，31(1):381-39.

[3]肖艷群，張健，蔣玲麗，等.與α-烯醇化酶相關的抗內皮細胞抗體ELISA的建立及臨床初步應用[J].檢驗醫(yī)學，2011，26(12):891-892.

[4]張夢瑩，李志，呂坤，等.系統性紅斑狼瘡患者血清抗內皮細胞抗體和抗β2糖蛋白Ⅰ抗體水平及其對人臍靜脈內皮細胞增殖的影響[J].中國臨床藥理學與治療學，2013，18(2):1421-1426.

[5]江盈，楊祖欽，麥菁蕓，等.抗內皮細胞抗體在過敏性紫癜腎炎患兒中的表達及臨床意義[J].中國中西醫(yī)結合腎病雜志，2012，13(5):436-437.編輯/申磊