粘附分子sICAM—1，sVCAM—1，sCD44在高白細胞急性髓系白血病中的表達

摘要：目的 探討高白細胞急性髓系白血病（hyperleukocytic acute myeloid leukemia，HAML）患者治療前后血清可溶性細胞間粘附分子-1（sICAM-1）、可溶性血管細胞粘附分子（sVCAM-1）和可溶性CD44分子（sCD44）的表達水平及其臨床意義。方法 采用酶聯免疫吸附實驗（ELISA），對15例初診高白細胞急性髓系白血病（WBC>100×109/L）和40例非高白細胞急性髓系白血病（non-hyperleukocytic acute myeloid leukemia，NHAML）（WBC<100×109/L）患者治療前后的血清sICAM-1、sVCAM-1和sCD44水平進行檢測并與正常人比較。結果 ①HAML組及NHAML組患者化療前血清的sICAM-1、sVCAM-1和sCD44水平均顯著高于對照組，差異有統計學意義，化療后，兩組中骨髓達到緩解者sICAM-1、sVCAM-1和sCD44水平下降，與治療前比較差異有統計學意義，與對照組比較，差異無統計學意義；②化療前，HAML組患者血清的sICAM-1、sVCAM-1和sCD44水平顯著高于NHAML組患者血清的水平（P<0. 05），HAML組緩解率40%低于NHAML組緩解率72.5%（P<0. 05）。結論 對于HAML患者，檢測血清sICAM-1、sVCAM-1和sCD44水平，有助于指導臨床治療，為病情監測、療效觀察及預后判定提供了有價值的臨床指標。

關鍵詞：急性髓系白血病；高白細胞；sICAM-1；sVCAM-1；sCD44

高白細胞急性髓系白血病（HAML）屬急性白血病中的高危類型，病情兇險預后極差，目前白細胞單采術聯合化療是一種安全、有效的治療措施，但完全緩解病例仍是十分稀少，因此至今仍缺乏準確地早期判斷其預后的指標。目前國內外對粘附分子在NHAML中的表達水平及臨床意義研究較多，但對其在HAML中相關報道較少，本實驗通過對可溶性粘附分子sICAM-1、sVCAM-1和sCD44在HAML治療前后的表達水平進行檢測，為臨床對HAML的診斷、病情進展、療效及預后判斷提供相關實驗依據。

1 資料與方法

1.1一般資料

1.1.1 HAML組 15例HAML患者（非AML-M3）為2013年1月～2014年4月在濰坊醫學院附屬醫院住院患者（WBC>100×109/L），男性8例，女性7例，年齡10～62歲，平均年齡36.8歲。其中M1 2例、M2 4例、M4 3例、M5 6例。NHAML組：40例NHAML患者（非AML-M3）為同時期隨機抽取的住院患者（WBC<100×109/L），男性24例，女性16例，年齡8～65歲，平均年齡34. 5歲。其中M1 5例、M2 10例、M4 11例、M5 14例。所有病例均符合張之南《血液病診斷及療效標準》第三版[1]，并排除早期死亡（Early death）、其他惡性血液病、心腦血管病、肝腎疾病、孕婦或哺乳期婦女。正常對照組：為門診健康體檢人群20例，其中男性11例，女性9例，年齡15～61歲，平均年齡38.3歲，均無感染性疾病，無心腦血管疾病，無肝腎疾病。

1.1.2聯合誘導緩解治療方案：HAML組患者采用羥基脲或羥基脲+阿糖胞苷降低白細胞計數（WBC<50×109/L）后，與NHAML組患者應用DA方案（柔紅霉素+阿糖胞苷）或HA方案（高三尖杉酯堿+阿糖胞苷）化療。

1.1.3療效判定 化療1個療程后行療效判定，評價標準按張之南《血液病診斷及療效標準》第三版[1]，其中HAML組達到緩解（完全緩解+部分緩解）6例，NHAML組達到緩解（完全緩解+部分緩解）29例。

1.2方法 所有AML組患者分別在治療前、化療1療程后抽取清晨空腹靜脈血2mL，正常對照組直接抽取清晨空腹靜脈血2mL，注入無抗凝劑試管內，2h內，以3000 r/min，離心10 min，收集血清，于-20℃凍存待測。

血清sICAM-1、sCD44和sVCAM-1水平檢測：采用酶聯免疫吸附試驗（ELISA），其中sICAM-1、sVCAM-1試劑盒為美國RD公司產品，代購自上海繼錦化學科技有限公司，sCD44試劑盒購自上海西唐生物科技有限公司，操作方法嚴格按試劑盒說明進行。

1.3統計學方法 采用SPSS 18. 0統計軟件包完成，組間比較采用方差分析、t檢驗和χ2檢驗，計量資料均用（x±s）表示，P<0. 05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 HAML組患者治療前后的血清sICAM-1、sVCAM-1和sCD44水平比較

HAML組共15例，治療前患者血清的sICAM-1、sVCAM-1和sCD44水平較正常對照組顯著升高（P<0.05），化療1個療程后，達到緩解（完全緩解+部分緩解）共6例，緩解率40%，三種粘附分子表達水平顯著下降，與治療前比較差異有統計學意義（P<0.05），而與正常對照組比較，差異無統計學意義（P>0.05）；化療后未緩解者9例，三種粘附分子表達水平下降，與治療前比較差異無統計學意義（P>0.05），而與正常對照組比較，差異有統計學意義（P<0.05）。見表1。

2.2 NHAML組患者治療前后的血清sICAM-1、sVCAM-1和sCD44水平比較 NHAML組共40例，治療前患者血清的sICAM-1、sVCAM-1和sCD44水平較正常對照組顯著升高（P<0.05），化療1個療程后，達到緩解（完全緩解+部分緩解）共29例，緩解率72.5%，三種粘附分子表達水平顯著下降，與治療前比差異有統計學意義（P<0.05），與正常對照組比差異無統計學意義（P>0.05）；化療后未緩解者11例，三種粘附分子表達水平下降，與治療前比差異無統計學意義（P>0.05），與正常對照組比差異有統計學意義（P<0.05）。見表2。

2.3 HAML組患者血清的sICAM-1、sVCAM-1和sCD44水平與NHAML組患者血清的sICAM-1、sVCAM-1和sCD44水平治療前后比較 治療前，HAML組患者血清的sICAM-1、sVCAM-1和sCD44水平高于NHAML組患者血清的水平，差異有統計學意義（P<0.05），HAML組緩解率40%低于NHAML組緩解率72.5%，差異有統計學意義（P<0.05）。

3 討論

細胞粘附分子（cell adhesion molecules，CAM）是眾多介導細胞間或細胞與細胞外基質間相互接觸和結合分子的統稱，位于細胞表面或細胞基質中，以受體和配體結合的形式發揮作用，AML細胞表達不同的粘附分子，粘附特性改變可能是白血病細胞異常增殖的原因，可溶性粘附分子（soluble adhesion molecules，sAM）是一類呈溶解狀態的粘附分子，仍具有結合抗原或受體的功能。正常狀態下sAM的含量相對穩定，某些疾病狀態下可出現sAM的升高，其含量的改變與疾病的發生、發展、預后及復發呈一定的相關性。因此，檢測sAM的水平可能成為監測某些疾病狀態的指征。

Syrigos等[2]檢測霍奇金淋巴瘤患者血清中的sICAM-1和sVCAM-1水平，發現初診患者血清水平均增高，且隨化療的進行水平均逐漸下降。Graf等[3]在105例初發白血病患者中采用流式細胞術測定骨髓原始細胞ICAM-1的表達，發現ICAM-1的表達水平較正常對照組明顯增高。李大啟等[4]的研究表明，多種惡性淋巴增殖性疾病包括惡性淋巴瘤、慢性淋巴細胞白血病及急性淋巴細胞白血病患者血清sICAM-1水平顯著升高。Hatzistilianou[5]等研究發現，血清sVCAM-1水平可用作監測ALL患者活動性及對治療的反應，并可作為預測早期復發的指標。國外研究表明[6]，sCD44在惡性腫瘤治療前和疾病進展時升高，達完全緩解后降為正常。

本實驗結果表明，HAML組及NHAML組治療前患者血清的sICAM-1、sVCAM-1和sCD44水平均較正常對照組顯著升高，經治療達緩解后，三種粘附分子水平顯著下降，與治療前比較明顯降低，差異有統計學意義；與對照組比較差異無統計學意義。在本實驗中，白細胞計數越高者，血清sICAM-1、sVCAM-1和sCD44水平越高，其緩解率越低，治療效果也越差，而聯合化療可以降低粘附分子表達水平，提示，對于治療前高水平者，在治療上有機結合粘附分子靶向治療可望進一步提高療效。因此，治療前血清sICAM-1、sVCAM-1和sCD44高水平可作為判斷 AML 預后不良指標之一，治療后粘附分子表達水平的變化可反映AML不同的緩解程度。而且，治療后血清sICAM-1、sVCAM-1和sCD44水平反彈，是否可早期預示髓外浸潤或早期復發，還有待于進一步大樣本隨訪監測觀察研究。

綜上所述，動態檢測血清sICAM-1、sVCAM-1和sCD44水平對于AML患者，特別是HAML患者的診斷、病情進展、療效及預后判斷有一定的幫助。

參考文獻：

[1]張之南，沈悌. 血液病診斷及療效標準[M]，第3版.北京：科學出版社，2007：103-121.

[2]Syrigos KN， Salgami E， Karayiannakis AJ， et al. Prognostic significance of soluble adhesion molecules in Hodgkin s' disease[J]. Anticancer Res， 2004， 24（2C）： 1243-1247.

[3]Graf M，Reif S， Hecht K， et al. High expression of costimulatory molecules correlates with low relapse free survival probability in acute myeloid leukemia （AML） [J]. Ann Hematol， 2005， 84（5）： 287-297.

[4]李大啟，李公寶，崔為發，等. 惡性淋巴增殖性疾病患者血清可溶性細胞間粘附分子-1的檢測[J].中華血液學雜志，1999， 20（5）： 232-234.

[5]Hatzistilianou M， Athanassiadou F， Agguridaki C， et al. Ciculating soluble adhesion molecule levels in children with acute lymphoblastic leukemia[J]. Eur-J-Pediatr， 1997，156（7）： 537-540.

[6]Kwong YL， Au WJ， Xhim CS， et al. Arsnic trioxide and idarubicin inducedrem issions in relapsed acute promyelocytic leukenia： climco patological molecular features of a pilot study [J]. Am J Hematol，2001，66： 274-279.

編輯/哈濤