干化學(xué)分析法檢測尿潛血和尿沉渣鏡檢紅細(xì)胞的對比分析

摘要：目的 對尿液的干化學(xué)分析法檢測尿潛血反應(yīng)和尿沉渣鏡檢紅細(xì)胞（RBC）兩種檢驗(yàn)方法的結(jié)果進(jìn)行對比分析。方法 對480例門診患者的尿樣按照儀器操作規(guī)程進(jìn)行尿液干化學(xué)分析法檢測尿潛血和尿沉渣顯微鏡檢查紅細(xì)胞。結(jié)果 干化學(xué)分析法潛血反應(yīng)陽性，同時(shí)鏡檢有紅細(xì)胞者191例，鏡檢無紅細(xì)胞者37例。干化學(xué)分析法潛血反應(yīng)陰性，鏡檢有紅細(xì)胞者19例，無紅細(xì)胞者233例。兩種檢測方法結(jié)果出現(xiàn)差異。結(jié)論 臨床工作中尿液干化學(xué)分析法潛血反應(yīng)與顯微鏡檢查紅細(xì)胞應(yīng)聯(lián)合進(jìn)行，尤其是顯微鏡檢查至關(guān)重要。

關(guān)鍵詞：干化學(xué)分析法；潛血反應(yīng)；鏡檢紅細(xì)胞

尿液干化學(xué)分析法的快速，簡便，準(zhǔn)確，使其在各級醫(yī)療機(jī)構(gòu)的檢驗(yàn)科得到了迅速普及，它不但使患者和臨床醫(yī)生在第一時(shí)間就能得到檢驗(yàn)結(jié)果，更使檢驗(yàn)人員的勞動(dòng)強(qiáng)度大幅度降底。但干化學(xué)分析法檢測原理是尿中相應(yīng)的化學(xué)成分使尿多聯(lián)試帶上相應(yīng)試劑模塊發(fā)生顏色變化，顏色深淺與尿中相應(yīng)物質(zhì)濃度成正比[1]。而沉渣顯微鏡檢查則是通過顯微鏡的放大作用直接將細(xì)胞等有形成分直觀真實(shí)地呈現(xiàn)在鏡下，因此顯微鏡檢查更為直觀，準(zhǔn)確，不應(yīng)被忽視。現(xiàn)對干化學(xué)分析法檢測尿潛血和尿沉渣鏡檢紅細(xì)胞的符合程度進(jìn)行對比分析，發(fā)現(xiàn)兩種結(jié)果出現(xiàn)顯著差異，因此，本研究對480例門診患者的隨機(jī)尿樣做了干化學(xué)分析法檢測尿潛血和尿沉渣鏡檢紅細(xì)胞對比分析。現(xiàn)報(bào)告如下：

1原理和方法

1.1兩種方法的原理干化學(xué)分析法中的尿潛血反應(yīng)是根據(jù)血紅蛋白（Hb）中亞鐵血紅素的過氧化物酶樣活性可使過氧化物分解釋放出新生態(tài)，后者氧化底物鄰甲苯胺變成鄰聯(lián)甲苯胺發(fā)生由黃色→草綠色→深藍(lán)色的顏色變化，其顏色深淺與尿中血紅蛋白濃度成正比。尿液顯微鏡檢查則是通過顯微鏡的放大作用直接將細(xì)胞等有形成分直觀真實(shí)地呈現(xiàn)在鏡下，是對底物的真實(shí)反映。

1.2方法

1.2.1干化學(xué)分析法使用由山西亞森生產(chǎn)的FA-800尿液分析儀及儀器配套使用的尿分析試紙條。于混勻的10ml新鮮尿液浸入尿試紙條1s后取出，進(jìn)行儀器測定。實(shí)驗(yàn)測定后，自動(dòng)打印結(jié)果。

1.2.2鏡檢方法于刻度離心管中加入混勻后新鮮尿液10ml，以1500r/min離心5min，棄去上清液，留沉淀0.2ml，輕搖使尿沉渣有形成分混勻后取0.02ml于載玻片上鏡檢，加蓋玻片（2.0cm×2.0cm），然后用較弱的光線以低倍鏡觀察全貌，以免漏掉量少而有意義的物體，再用高倍鏡辨認(rèn)細(xì)胞[2]。結(jié)果報(bào)告為：х個(gè)/高倍視野（HP）。本方法所使用的顯微鏡是Olympus顯微鏡（日本奧林巴斯株氏會社）。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用x2檢驗(yàn)。

2結(jié)果

見表1。

注：干化學(xué)分析法潛血反應(yīng)+也歸為+

由表1可以反映出干化學(xué)分析法潛血反應(yīng)和鏡檢紅細(xì)胞兩種檢驗(yàn)結(jié)果存在一定差異。

3討論

由于尿液干化學(xué)分析法測潛血反應(yīng)與鏡檢紅細(xì)胞的原理不同，所受各種干擾影響因素也不一樣，現(xiàn)討論分析如下：

3.1假陽性即尿液干化學(xué)分析法潛血反應(yīng)陽性，鏡檢陰性，其常見原因有：①血紅蛋白（Hb）尿液干化學(xué)分析法潛血反應(yīng)既能與完整的RBC發(fā)生陽性反應(yīng)，也可與RBC溶解釋放的Hb發(fā)生陽性反應(yīng)，而顯微鏡只能檢出尿中未溶解的RBC。健康人尿中Hb含量極微，定性為陰性。疾病時(shí)，尿中Hb有兩個(gè)來源：一是發(fā)生血管內(nèi)溶血，血漿Hb超過了結(jié)合珠蛋白的結(jié)合能力，游離Hb從尿中排出。另一個(gè)是尿路（尤其是上尿路）出血，RBC在高滲或（和）低滲時(shí)破壞Hb逸出。此時(shí)，尿液干化學(xué)分析法潛血反應(yīng)陽性，但尿沉渣鏡檢不見RBC或僅見RBC碎片。②肌紅蛋白（Mb）分子中也含有血紅素基團(tuán)，具有過氧化物酶活性。Mb主要存在于心肌和骨骼肌組織中，正常人尿中含量甚微，不能檢出。當(dāng)心肌或骨骼肌發(fā)生嚴(yán)重?fù)p傷時(shí)，血漿Mb增高，經(jīng)腎臟排泄，使尿液Mb含量增高，故潛血反應(yīng)呈陽性，鏡檢RBC為陰性。③某些患者尿液中含有對熱不穩(wěn)定酶，也可使試劑塊發(fā)生顏色改變，出現(xiàn)潛血反應(yīng)陽性，鏡檢為陰性。④某些氧化性污染物，例如次氯酸鹽會導(dǎo)致潛血反應(yīng)假陽性。⑤菌尿尿液是細(xì)菌良好的培養(yǎng)基，菌尿時(shí)有些細(xì)菌會產(chǎn)生氧化性物質(zhì)，使得試劑塊發(fā)生顏色變化，導(dǎo)致潛血反應(yīng)陽性，鏡檢RBC為陰性。此外，微生物過氧化酶的侵入也可引起假陽性。⑥長時(shí)間存放及高溫實(shí)驗(yàn)證明，標(biāo)本不新鮮，存放時(shí)間長或高溫存放，使?jié)撗磻?yīng)的陽性率相對增高，而RBC鏡檢相應(yīng)減少，測試結(jié)果極有可能出現(xiàn)假陽性。因此，建議尿液標(biāo)本存放時(shí)間不得超過2h。⑦尿試紙條的超期使用或被污染以及不妥善保存和操作方法的不正確，均可造成測試結(jié)果假陽性。⑧尿液分析儀靈敏度過高（0.2mg/dl出現(xiàn)++），\"級差\"范圍太大（0.8～50mg/dl級為+++），常會遇到儀器測試為++，而鏡檢測試紅細(xì)胞為陰性，臨床上又找不到任何導(dǎo)致血紅蛋白尿原因的情況。

3.2假陰性即鏡檢陽性，尿液干化學(xué)分析法潛血反應(yīng)陰性，其常見原因有：①食物或藥物的影響：由于飲食或藥物使尿液呈堿性時(shí)，RBC溶解破裂，形成褐色顆粒，潛血反應(yīng)呈陽性，而鏡檢呈陰性。②VitC尿液中大量存在時(shí)，能競爭性奪取反應(yīng)產(chǎn)生的氧，引起假陰性反應(yīng)。③高比重、高蛋白尿樣降低了試劑塊潛血反應(yīng)的靈敏度，使?jié)撗磻?yīng)出現(xiàn)假陰性。④尿液中黏液成分增多，使RBC被包裹起來，試劑接觸不到Hb，而使?jié)撗磻?yīng)呈現(xiàn)假陰性。

3.3離心對結(jié)果的影響離心時(shí)，如速度過快，可使有形成分破壞；但速度過慢，當(dāng)每毫升尿液中的RBC在5000以下時(shí)，沉渣中可能找不到RBC，以至把隱匿型腎小球腎炎漏掉，因而在對檢驗(yàn)結(jié)果有懷疑時(shí)，可用潛血反應(yīng)證實(shí)。

因此，兩種尿檢潛血的方法都并非完美無缺。干化學(xué)分析法能檢測到溶解的紅細(xì)胞，但干化學(xué)分析法檢測潛血假陽性較多，所以必須用顯微鏡法予以驗(yàn)證，以保證報(bào)告的可靠性。顯微鏡法雖是尿液紅細(xì)胞檢驗(yàn)的金標(biāo)準(zhǔn)，但對已溶解破壞的紅細(xì)胞卻不能檢出。兩種方法各有其優(yōu)勢和弊端，只能說是優(yōu)勢互補(bǔ)，絕對不能互相替代。尿沉渣鏡檢以其獨(dú)特的臨床價(jià)值仍是尿液分析中不可缺少的檢查手段。

參考文獻(xiàn)：

[1]熊立凡，劉成玉.臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)[M].第4版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2007：191.

[2]葉應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜.全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].第3版.南京：東南大學(xué)出版社，2006：297.

編輯/王海靜