花椒提取物對蟾蜍坐骨神經(jīng)動作電位的影響

摘要：目的 觀察花椒提取物對蟾蜍離體坐骨神經(jīng)動作電位閾刺激、不應(yīng)期及傳導(dǎo)速度的影響，研究其對坐骨神經(jīng)電生理特性的作用。方法 將制備的蟾蜍坐骨神經(jīng)干分為閾刺激、不應(yīng)期、傳導(dǎo)速度3 組，引導(dǎo)神經(jīng)干動作電位，分別測其正常時與加藥后的閾刺激、不應(yīng)期、傳導(dǎo)速度的變化。結(jié)果 花椒提取物能夠提高蟾蜍離體坐骨神經(jīng)閾刺激，延長不應(yīng)期，與對照組比有顯著性差異（P<0.05，P<0.01）；可減慢傳導(dǎo)速度，但無顯著性差異。結(jié)論 花椒提取物對蟾蜍坐骨神經(jīng)動作電位的抑制作用與提高閾刺激、延長不應(yīng)期相關(guān)。

關(guān)鍵詞：花椒提取物；蟾蜍；動作電位；坐骨神經(jīng)干

花椒提取物有鎮(zhèn)痛作用[1]，是溫陽散寒除濕止痛之劑，和其他藥物配伍應(yīng)用，振奮陽氣、驅(qū)散風(fēng)寒濕邪之功效更著。文獻報道花椒或花椒提取物為主方治療牙痛等疼痛性疾病有較好的療效[2]，有關(guān)報道較少。本實驗通過離體實驗方法，觀察花椒提取物對蟾蜍坐骨神經(jīng)復(fù)合動作電位閾刺激、傳導(dǎo)速度、不應(yīng)期等的影響。驗證關(guān)初步的探討花椒提取物的鎮(zhèn)痛作用及可能機制。

1 材料與制備

1.1材料 健康蟾蜍30只，雌雄不拘，由湖州師范學(xué)院醫(yī)學(xué)院提供。花椒（川椒）購于藥材公司。電子天平（上海精密科學(xué)儀器有限公司）； 神經(jīng)屏蔽盒（四川成都泰盟科技有限公司）； BL- 420生物機能實驗系統(tǒng)（成都泰盟）；任氏液，乙醇所用均為化學(xué)純試劑。

1.2 花椒提取物的制備 將花椒果皮粉碎后稱取1000g加入pH 3的70%乙醇，料液比1：10，在60℃提取4h，減壓回收乙醇，水提液用氨水調(diào)pH至9～10，置于4℃冰箱保存?zhèn)溆?。采用NKA-9大孔樹脂先分別以水和50%乙醇洗脫除去水溶性雜質(zhì)，再用70%乙醇反復(fù)洗脫至無生物堿特征反應(yīng)，洗脫液減壓濃縮得大孔樹脂洗脫物23.6 g。

用分析天平準確稱取純化后的花椒生物堿，無菌生理鹽水配制成高、中、低3種濃度梯度供試液，每毫升分別相當(dāng)于生藥472、236、118 mg。

2 方法

2.1動物分組與坐骨神經(jīng)干標(biāo)本制備 取蟾蜍30只，制備蟾蜍的坐骨神經(jīng)干標(biāo)本，游離后均置于任氏液中穩(wěn)定30min，待其生理指標(biāo)穩(wěn)定后隨機分成不應(yīng)期、閾刺激、傳導(dǎo)速度3 組，每組20條，測閾刺激，含花椒提取物置神經(jīng)干電極刺激端；測不應(yīng)期與速度，含花椒提取物置神經(jīng)干兩對引導(dǎo)電極之間，加藥前后對比。

2.2 神經(jīng)干動作電位的引導(dǎo) 在室溫20℃～22℃條件下，分別將制備好的坐骨神經(jīng)干標(biāo)本置于神經(jīng)屏蔽盒的電極上，外周端接刺激電極，中樞端接引導(dǎo)電極，測量每一復(fù)合動作電位的閾刺激、不應(yīng)期及傳導(dǎo)速度。

2.3觀察指標(biāo) 動作電位引導(dǎo)，以最小正電壓至刺激前基線為準，引導(dǎo)出動作電位的刺激強度。動作電位不應(yīng)期的測定，按動作電位記錄方法引導(dǎo)動作電位，記錄不應(yīng)期。傳導(dǎo)速度的測定，按動作電位記錄方法引導(dǎo)動作電位，記錄兩對引導(dǎo)電極動作電位起始部時間差（t，s）和兩對引導(dǎo)電極之間的距離（d，m），計算動作電位。

2.4數(shù)據(jù)處理 記錄給藥前（對照組）與給藥后坐骨神經(jīng)復(fù)合動作電位的閾刺激、不應(yīng)期與傳導(dǎo)速度，實驗數(shù)據(jù)用x±s 描述，采用配對t 檢驗進行顯著性檢驗。

3 結(jié)果

3.1花椒提取物對坐骨神經(jīng)干復(fù)合動作電位不應(yīng)期的影響 實驗組與對照組相比，藥物作用坐骨神經(jīng)干，不應(yīng)期延長，具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），見表1。

3.2 花椒提取物對坐骨神經(jīng)干復(fù)合動作電位閾刺激的影響 實驗組與對照組相比，藥物作用坐骨神經(jīng)干，閾刺激增大，興奮性降低，具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），見表2。

3.3花椒提取物對坐骨神經(jīng)干復(fù)合動作電位傳導(dǎo)速度的影響 實驗組與對照組相比，藥物作用坐骨神經(jīng)干，傳導(dǎo)速度變慢，但不具有統(tǒng)計學(xué)意義（見表3）。

4 討論

由文獻可得花椒對于疼痛有局麻作用而且有止痛的效果?；ń肥菧刂猩⒑凉裰雇粗畡?，通過多種機制達到鎮(zhèn)痛效果?；ń纺苊黠@緩解牙痛產(chǎn)生局麻現(xiàn)象[3]。花椒浸液在一定濃度下確實能降低神經(jīng)的興奮性和可逆性地阻斷神經(jīng)沖動的傳導(dǎo)，這是產(chǎn)生局麻作用的基礎(chǔ)。實驗還表明其發(fā)生作用的速度和持續(xù)時間隨著藥物濃度的增高而相應(yīng)快和延長[4]?；ń坊ń分兴?，8-桉葉素可能是醚提物鎮(zhèn)痛抗炎的活性成分之一[1]。中醫(yī)療法以散寒祛風(fēng)除濕，活血通經(jīng)，解痙止痛[3]。本實驗結(jié)果表明花椒提取物能提高蟾蜍離體坐骨神經(jīng)閾刺激，降低興奮性，延長不應(yīng)期，對牙痛傳導(dǎo)具有明顯阻滯作用。

花椒提取物和酚妥拉明合用只能減弱其鎮(zhèn)痛作用，普奈洛爾對花椒的這種作用根本就無影響[5]。

近年來，中藥受到廣泛重視，但中藥在鎮(zhèn)痛作用上還存在不足且中藥療效時間長，有待改進。需利用現(xiàn)代藥理學(xué)實驗方法，不斷提高中醫(yī)治療疼痛的療效，對傳統(tǒng)鎮(zhèn)痛中藥藥效及其機制進行研究，是推動中醫(yī)藥現(xiàn)代化的有效手段。

參考文獻：

[1]張明發(fā).花椒的溫理作用[J].西北藥理雜志，1995，10（2）：89.

[2]黃志華.石椒辛荷漱劑治牙痛[J].四川中醫(yī)雜志，1986，（4）：57.

[3]孫洪范，吳明燊，王代容，等.花椒阻滯經(jīng)神沖動作用的研究[J].貴州醫(yī)藥雜志，1990；14（5）：272.

[4]孫洪范，吳明燊，王代容，劉果.花椒對蟾蜍離體神經(jīng)的作用[J].貴州醫(yī)藥雜志，1984；8（4）：14.

[5]袁娟麗，王四旺.花椒的化學(xué)成分及其藥效學(xué)研究[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進展，2010，10（3）：553.

編輯/蘇小梅