鹽酸胺腈和雌二醇對離體蛙心收縮活動的影響

摘要

[目的] 探討雌二醇和鹽酸胺腈在量子能量水溶液制成的任氏液對離體蛙心收縮功能的影響。[方法] 分別用農夫山泉礦泉水和量子能量水配制任氏液，采用離體蛙心灌流的方法用不同濃度的藥物對蛙心進行處理，通過BL-420F生物機能實驗系統觀察不同濃度的雌二醇和鹽酸胺腈對離體蛙心活動的影響。[結果] 在農夫山泉任氏液中，當鹽酸氨腈濃度為0.421mg/ml時蛙心收縮振幅較與用藥前明顯降低（Plt;0.05）;在量子能量水任氏液中，當鹽酸氨腈濃度為0.211 mg/ml時，蛙心收縮振幅較用藥前明顯降低（Plt;0.05）。在普通任氏液中，當雌二醇濃度為0.163 mg/ml時，蛙心收縮振幅和頻率較用藥前都明顯降低（Plt;0.01）;在量子能量水任氏液中，當雌二醇濃度為0.408 mg/ml濃度時，蛙心收縮振幅較用藥前明顯降低（Plt;0.01）。[結論] 鹽酸胺腈和雌二醇對離體蛙心的作用有濃度依賴性，在農夫山泉任氏液和量子能量水任氏液中有差異。

關鍵詞 雌二醇;鹽酸胺腈;離體蛙心;收縮活動;量子能量水

中圖分類號 S188 "文獻標識碼 A "文章編號 0517-6611（2014）32-11326-02

Effects of Glycinonitrile Hydrochloride and Estradiol on the Contractive Ability of Isolated Frog Heart

XIE Shuihong， CONG He， FENG Jinman， JIANG Chengzhe* et al

（Agricultural College of Yanbian University， Yanji， Jilin "133002）

Abstract "[Objective] The research aimed to discuss the effects of estradiol and aminoacetonitrile hydrochloride in Ringer's solution made with quantum energy solution on the contractile function of isolated frog heart. [Method] Ringer’solution was prepared with Nongfu Spring mineral water and quantum energy solution. The frog hearts were treated with different concentrations of drugs by using the method of isolated frog heart perfusion. Using BL-420F biological experimental system， the effects of different concentrations of estradiol and aminoacetonitrile hydrochloride on the activities of isolated frog heart were observed. [Result] In Ringer's solution with Nongfu mineral water， the contractile amplitude of frog heart significantly decreased than that before drug administration （Plt;0.05）when the concentration of aminoacetonitrile hydrochloride was 0.421 mg/ml. In Ringer's solution with quantum energy solution， the contractile amplitude of frog heart significantly decreased than that before drug administration （Plt;0.05） when the concentration of aminoacetonitrile hydrochloride was 0.211 mg/ml. In normal Ringer’s solution， the contractile amplitude and frequency of frog heart were significantly decreased than that before drug administration （Plt;0.01） when estradiol concentration was 0.163 mg/ml. In Ringer’s solution with quantum energy solution， the contractile amplitude of frog heart significantly decreased than that before drug administration （Plt;0.01） when the concentration of estradiol was 0.408 mg/ml. [Conclusion] The effects of estradiol and aminoacetonitrile hydrochloride on the isolated frog heart were concentration-dependent， which had differences in Ringer’solution with Nongfu Spring mineral water and quantum energy solution.

Key words " Estradiol; "Aminoacetonitrile hydrochloride ; Isolated frog heart; Contractile activities; Quantum energy solution

目前人體內發現的雌激素（Estrogen）有3種：雌二醇、雌酮和雌三醇，其中最重要的是雌二醇（Estradiol，E2，17βestradiol）。一般認為，雌激素通過與雌激素受體（Estrogen receptor，ER）結合，啟動基因轉錄和蛋白質合成過程，發揮其正常的生理學效應[1]。近年來，隨著對雌激素生理功能研究的進展，逐漸發現雌激素除影響生殖泌尿統的生理病理外對機體的其他系統也有廣泛的影響，如對機體膠原纖維代謝、機體的免疫系統、骨代謝、心血管以及中樞神經系統均有一定的影響[2-3]。據報道，機體中除泌尿生殖系統及乳腺中已證明確有雌激素受體存在外，皮膚、骨骼、中樞神經系統、心血管系統和胃腸道也均發現有雌激素受體存在[4]。因此，雌激素的生理作用不僅對生殖功能有影響，而且廣泛影響全身的代謝功能。雌激素也可以調整心血管系統的細胞功能，能促使細胞合成DNA、RNA和相應組織內各種不同的蛋白質[4]。

噻嗎心安為一種新的強效β受體阻斷藥，對β1和β2受體都有阻斷作用，作用強度為普萘洛爾的8倍，無膜穩定作用，無內源性擬交感活性，具有明顯的降低眼壓作用。鹽酸胺腈，別名氨基乙腈鹽、鹽、鹽酸胺腈、氨基乙氰鹽酸鹽、甘氨基腈鹽酸鹽、氰基甲胺鹽酸鹽、氨基乙腈.鹽酸鹽，用作噻嗎心安的中間體，由亞甲基氨基乙腈與鹽酸或硫酸反應制得。筆者探討了鹽酸胺腈和雌二醇在量子能量水溶液制成的任氏液對離體蛙心收縮活動的影響。

1 材料與方法

1.1 "材料

1.1.1

供試藥品。雌二醇、鹽酸胺腈 （美國Sigma公司產品）、NaCl、KCl、 NaHCO3、NaH2PO4，CaCl2、葡萄糖均為國產常用分析純。

1.1.2

供試動物。蟾蜍，購自延邊大學實驗動物中心，150～200 g，雌雄不限。

1.1.3

溶液配制。農夫山泉任氏液：NaCl 6.5 g/L、KCl 0.14 g/L、CaCl2 0.12 g/L、NaHCO3 0.20 g/L、NaH2PO4 0.01 g/L、葡萄糖2.0 g/L;量子能量水任氏液：在上述任氏液基礎上將農夫山泉水改成量子能量水即可;20%雌二醇溶液;5%鹽酸胺腈溶液。

1.1.4

主要儀器。水浴鍋;BL420F生物機能實驗系統（成都泰盟科技有限公司）;量子能量水處理器Quantum Wave BlanceWater Generator（QBG2040）（中國東星 TBCH）;常用手術器械;壓力換能器。

1.2 方法

1.2.1

水的處理。將市售的農夫山泉礦泉水由量子能量裝置（Quantum Wave BlanceWater Generator）處理，而不同機體器官的量子能量水由延邊量子醫學研究所提供。

1.2.2

試驗分組。取蟾蜍20只，分為2組，每組各10只（雌雄不限）。以農夫山泉任氏液組為對照組，以量子能量水任氏液組為試驗組。

1.2.3

離體蛙心的制備。將動物處死后按斯氏蛙心灌流法制備蟾蜍離體心臟標本[5]，先洗出心臟內部血液，用帶有長線的蛙心夾夾住心尖，將長線連接到BL420F生物機能實驗系統上，并保持蛙心套管內液面高度的恒定（約1.0 ml），觀察并記錄正常心臟收縮曲線，待心臟穩定10 min后加入不同任氏液和不同濃度的藥液，觀察并記錄10 min后的藥物作用，然后用任氏液反復換洗標本，觀察并記錄10 min，待心臟收縮波形恢復正常后，再加入下一種藥液。

1.2.4

測定指標。待心臟穩定后依次累積加入2 μl溶液相當于濃度0.043、0.082、0.122、0.163、0.245、0.326、0.408 mg/ml的雌二醇和0.125、0.211、0.312、0.421、0.842 mg/ml的氯化氨基乙腈觀察并記錄每次加藥及沖洗后心肌的收縮張力、舒張張力、振幅及收縮頻率的變化情況。

1.2.5

數據處理。以加藥前離體蟾蜍心臟的收縮張力振幅及心率作為對照值，以給藥后的數值作為效應值。根據記錄的收縮曲線，使用BL420F生物機能實驗系統隨機測量8個連續的收縮波的收縮力，取平均值，作為該只心臟的收縮力;根據連續8個心動周期的時程計算出心率。試驗數據以平均值±標準差表示，給藥前后振幅及頻率、各劑量組間振幅及頻率增值均采用t檢驗。

2 結果與分析

2.1 不同濃度鹽酸胺腈作用的結果

由表1可知，鹽酸胺腈在農夫山泉任氏液中對離體蛙心心率的抑制作用比在量子能量水任氏液中的抑制作用明顯。當鹽酸胺腈濃度為0.105 mg/ml時，在農夫山泉任氏液中的心率為20次/min，在量子能量水任氏液中的頻率為19.5次/min。當鹽酸胺腈濃度增大到0.421 mg/ml時，在農夫山泉任氏液中的心率為1.2次/min，在量子能量水任氏液中的頻率為9.9次/min，而對振幅的影響卻沒有明顯差異。

不同濃度的鹽酸胺腈在農夫山泉任氏液中與用藥前相比，當鹽酸胺腈濃度0.421 mg/ml時，蛙心收縮振幅明顯降低（Plt;0.05）;在量子能量水任氏液中與用藥前相比，當鹽酸胺腈濃度為0.211 mg/ml時，蛙心收縮振幅明顯降低（Plt;0.05）。

2.2 不同濃度雌二醇作用的結果

從表2可以看出，雌二醇在農夫山泉任氏液中對離體蛙心心率的抑制作用比在量子能量水任氏液中的抑制作用明顯。當雌二醇濃度為0.082 mg/ml時，在農夫山泉任氏液中的心率為23次/min，在量子能量水任氏液中的頻率為17次/min。當雌二醇濃度增大到0.163 mg/ml時，在農夫山泉任氏液中的心率為19次/min，在量子能量水任氏液中的頻率為15次/min。不同濃度雌二醇對離體蛙心心率和振幅的抑制的變化更大一些。不同濃度的雌二醇在普通任氏液中與用藥前相比，當雌二醇濃度為0.163 mg/ml時，蛙心收縮振幅和頻率都明顯降低（Plt;0.01）;在量子能量水任氏液中與用藥前相比，當雌二醇濃度為0.408 mg/ml時，蛙心收縮振幅明顯降低（Plt;0.01）。

表1 不同濃度的鹽酸胺腈在農夫山泉任氏液和量子能量水任氏液中對離體蛙心振幅和頻率的影響

組別鹽酸胺腈濃度∥mg/ml振幅∥%頻率∥次/min

對照組0100.000±0.00020.100±7.233

0.10556.799±29.31420.333±6.658

0.21152.304±20.97512.857±8.174*

0.31230.862±25.8259.000±12.728

0.42129.132±34.883*1.200±1.6431**

0.842--

試驗組0100.000±0.00019.769±8.890

0.10557.798±23.50619.500±2.121

0.21161.694±17.222*15.364±6.531

0.312--

0.42131.679±30.5629.909±9.407

0.8425.628±0.0000

表2 不同濃度的雌二醇在農夫山泉任氏液和量子能量水中對離體蛙心振幅和頻率的影響

組別雌二醇濃度∥mg/ml振幅∥%頻率∥次/min

對照組0--

0.04395.694±0.00026.000±0.000

0.08277.574±11.15023.000±5.354

0.12279.745±0.00023.000±0.000

0.16361.619±19.60218.750±5.909**

0.245--

0.32637.306±17.63118.958±8.737

0.408--

試驗組0100.000±0.00017.143±5.866

0.043--

0.08288.623±19.65517.125±7.026

0.122--

0.16382.210±9.70414.875±5.110

0.24562.552±18.78612.167±6.362

0.32662.312±22.98013.000±5.099

0.40863.774±25.91911.400±6.479**

3 討論與結論

通過離體蛙心灌流試驗發現雌二醇和鹽酸胺腈對離體蛙心臟均有抑制作用，且隨著藥物濃度的增加，心臟的心肌收縮力和心率減慢。同時雌二醇和鹽酸胺腈在農夫山泉任氏液和量子能量水任氏液中也有所不同，特別是鹽酸胺腈在農夫山泉任氏液中對離體蛙心心率的抑制作用比在量子能量水任氏液中的抑制作用更加明顯。雌二醇對離體蛙心心肌收縮力和頻率在農夫山泉任氏液中的抑制作用都較能量量子水中更加明顯。據此推測，能量量子水對心臟有一定作用，還有待進一步研究。

每100 ml農夫山泉含400 mg鈣、50 mg鎂、35 mg鉀、80 mg鈉、180 mg偏所含成分似乎也會起到