PAI—1 4G/5G多態性與膿毒癥發生發展的相關性

摘要：

目的：分析PAI-1 4G/5G多態性與膿毒癥發生發展的相關性。方法：對我院2010年8月到2012年8月收治的60例膿毒癥患者以及60例正常人作為研究對象，進行回顧性分析，將60例膿毒癥患者作為試驗組，正常人員作為對照組，根據MODS的診斷標準采用聚合酶鏈反應結合限制性片段長度多態性方法（PCR-RFLP）分析各組中PAI-1和TLR4單個核苷酸多態性，比較試驗組組和對照組中PAI-1基因型同等位基因的頻率分布差異，比較PAI-1 4G/5G多態性與疾病發生的相關性。結果：在兩組中，試驗組中PAI-1 4G/5G在膿毒癥組織表達中，試驗組膿毒癥組中，4G/5G多態性同膿毒癥的易感性與轉歸呈正相關，兩者之間有差異有統計學意義（P<0.5）。結論：在臨床中，檢測出PAI-1 4G/5G多態性與膿毒癥的發生有關，在膿毒癥的發生發展中與PAI-1和TLR4基因多態性有相關性，根據PAI-1 4G/5G變化提示，可以做好對膿毒癥患者預后工作，值得在實際中推廣。

關鍵詞：PAI-1 4G；PAI-1 5G5；膿毒癥；相關性

【中圖分類號】

R632.5 【文獻標識碼】B 【文章編號】1002-3763（2014）06-0009-01

膿毒癥在全球每年的總病例數約為1800萬例，膿毒癥的發生多與嚴重感染有關，會導致人體的多器官功能障礙甚至衰竭， 因此在實際中預防手術后嚴重感染，并合理救治患者是臨床醫生以及從事感染工作者的重要使命。

1 資料與方法

1.1 研究資料：

我院2010年8月到2012年8月收治的60例膿毒癥患者作為研究對象，將其作為試驗組，男患者為36例，女患者為24例，患者年齡在25歲～65歲，平均年齡在36.3±4.8歲，患者在檢查前均沒有使用類固醇激素以及其它免疫抑制劑；再選擇60例身體正常的人員，使其作為對照組，男性35例，女性25例，年齡在25歲～65歲，平均年齡在36.3±4.8歲；兩組中人員均簽署知情書，兩組差異無統計學意義，具有一定的可比性。

1.2 方法：

抽取兩組人員的靜脈血2 ml，應用2%乙二胺四乙酸二鈉（EDTA）抗凝[1]，并在-80e凍存備用。在DNA的提取中，應用2% EDTA抗凝靜脈血1m，使用酚-氯仿提取DNA，在紫外分光光度儀下進行定量。之后，擴增目的DNA片段，可以采用聚合酶鏈，根據其反應（PCR）特異性來擴增PAI-1基因序列。最后，對其進行多態性分析，可以應用5U Bsl1限制性內切酶對5Ll PCR產物進行酶切。由于Bsl1酶，以此來識別序列，將99 bp（5G）片段酶切成77 bp片段和22 bp片段，并以16%濃度的聚丙烯酰胺凝膠電泳，設置電為壓180 V，時間為2.5 h，并在凝膠成像儀下觀察溴化乙錠染色后的結果，從而確定基因型。

1.3 統計學處理：

對本次的試驗結果，采用SPSS13.O統計軟件[2]對實驗數據進行統計分析，并且對于試驗組與對照組指標的陽性率將會采用APACHⅡ評分；計量資料采用t檢驗，計數的資料采用x2檢驗，以P<0.05具有統計學意義。

2 結果

兩組中膿毒癥患者同正常人員的研究中，分析兩組中的PAI-1基因型電泳結果，PAI-1基因4G/5G多態性與膿毒癥發生發展表現出相關性，兩組對象中的PAI-1 4G/5G基因型分布中，兩組之間差異有統計學意義（P<0.5），患者的PAI-14G/5G基因型攜帶頻率是0.44， 5G等位基因攜帶頻率是0.65；對照組中的分別是0.25與0.50，同時在實驗組膿毒癥死亡與存活患者中的PAI-1 4G/5G基因也存在多態性，有統計學意義。

表1 兩組中PAI-1 4G/5G基因型分布對比

表2 試驗組存活與死亡患者PAI-1 4G/5G基因型分布

結果PAI-1 4G/5G的多態性，同膿毒癥的易感性與轉歸呈正相關，具有一定相關性，對改善膿毒癥患者預后有積極的影響。

3 討論

據悉，膿毒癥的基礎病因目前還不清楚，先前研究中多認為與細胞因子炎癥、纖維化有關。PAI-1 4G/5G多態性，就是指在基因轉錄的起始上游-675bp位置中，存在鳥苷插入與缺失，從而表現出三種多態性，導致 PAI-1基因的PCR產物也形成三種基因型，產生4G/5G基因型、5G/5G基因型、4G/5G基因型。

3.1 當前膿毒癥治療進展：

在醫院臨床治療中，膿毒癥作為預后差的疾病，及早發現、及早治療已成為治愈膿毒癥的關鍵。明確攜帶PAI-1那種基因型及等位基因膿毒癥患者容易發展成MODS，攜帶那種PAI-1基因型及等位基因患者死亡率高，比較PAI-1 4G/5G，TLR4 Asp299Gly和Thr399Ile基因型的分布在各組的差異，根據PAI-1和TLR4基因多態性結果，綜合膿毒癥患者臨床表現進行全面分析，科學提出膿毒癥患者預后情況。

3.2 PAI-1 4G/5G多態性與發病之間的相關性：

PAI-1基因多態性與膿毒癥發病相關性研究結果表明，患者PAI-1 4G/5G基因型頻率高于正常人群，攜帶4G/5G基因型的個體，其發生膿毒癥的風險較高；還有就是4G/5G基因型個體PAI-1活性水平高， 降低纖溶活性，使細胞的外基質更加穩定，加速了膿毒癥的發展。

3.3 預后措施：

在膿毒癥患者預后中，4G純合子以及4G等位基因，是人體易感膿毒癥的預警指標，基因多態性與膿毒癥的發生發展具有一定的相關性，對此有助于實現對膿毒癥的個體化防治。

由上可知，在臨床膿毒癥治療中，根據PAI-1 4G/5G多態性與病情發展具有相關性，通過PAI-1 4G/5G多態性變化對膿毒癥進行診治，降低誤診的發生，提高診治準確率，而且也將會提高患者的預后效果。

參考文獻

[1] 倪俊學，王亞軍，李平，付紅敏，馬燕，萬健. 膿毒癥患兒血漿膽固醇、白細胞介素-6水平變化與病情危重度的關系[J]. 實用兒科臨床雜志，2012，07（18）：41-42.

[2] 饒小平，朱綠綺. 動態監測血乳酸對評估小兒膿毒癥的臨床意義[J]. 南昌大學學報（醫學版），2011，14（12）：76-77. [J]. 實用藥物與臨床，2011，06（34）：45-46.