盾葉薯蕷皂苷元“濕法”提取與含量測(cè)定

摘 要 自上世紀(jì)七十年代起，我國(guó)在皂苷元生產(chǎn)上采用自然發(fā)酵、酸水解、酶解、微生物法和提淀粉、糖等方法對(duì)薯蕷干品原料處理進(jìn)行分離提取皂苷元。本文對(duì)薯蕷鮮品原料提取皂苷元方法進(jìn)行了探討，以期改進(jìn)生產(chǎn)工藝，提高皂苷元提取效率。

關(guān)鍵詞 盾葉薯蕷 提取方法 含量測(cè)定

薯蕷皂苷元是從薯蕷屬植物的根莖中所含甾體皂苷經(jīng)酸水解、萃取獲得。因其具有溶血、降血脂和抗菌等作用而備受重視，是重要的醫(yī)藥化工原料。

一、試驗(yàn)材料

鮮品盾葉薯蕷為湖北十堰周邊區(qū)域栽培2～3年的原料。儀器：722S分光光度計(jì)（上海精密科學(xué)儀器有限公司），JJ-2高速組織搗碎機(jī)（金壇市恒豐儀器廠），索氏提取器。試劑：無(wú)水乙醇、乙酸酐、H2SO4、CHCL3、120#溶劑汽油、分析純鹽酸、L.B試劑

二、試驗(yàn)方法和結(jié)果分析

1、將鮮品原料用搗碎機(jī)粉碎至1～5毫米顆粒，植物體內(nèi)自身的酶在一定環(huán)境條件下酶解部分淀粉、糖等物質(zhì)，同時(shí)可以把皂苷分子從植物組織中游離出來(lái)。在水解過(guò)程中，排除一些水解干擾因素，降低酸的濃度、縮短水解時(shí)間，其回收率高于干品原料。

2、試驗(yàn)工藝路線(xiàn)

鮮品→清洗泥沙→勻漿機(jī)粉碎至1～5毫米→發(fā)酵酶解37℃3至5天→酸水解4至6h→水解物洗至中性→干燥→干燥產(chǎn)物用120#溶劑汽油回流10h→粗皂苷元用乙醇結(jié)晶得到薯蕷皂甙元。盾葉薯蕷鮮品按2、方法，做三次提取，每次500g，平均數(shù)為3.93g，占鮮品含量為0.78%，溶點(diǎn)在195℃以上，符合標(biāo)準(zhǔn)要求。

3、分光光度法做含量測(cè)定

（1）顯色試劑（Liebermann-Barcharacl）反應(yīng)

（2）標(biāo)準(zhǔn)溶液吸光度測(cè)定 配成100g/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液，從標(biāo)準(zhǔn)液中取1ml，滴入25ml容量瓶中，用CHCl3滴加到刻度，塞上軟木塞放入50℃恒溫水浴40分鐘，取出冷至室溫，用L.B試劑做空白對(duì)照，在460nm處進(jìn)做比色測(cè)定，讀取吸光度。以縱坐標(biāo)為吸光度，橫坐標(biāo)為含量做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。

（3）待測(cè)溶液吸光度測(cè)定 取10g鮮品原料粉碎，加入50ml 15%H2SO4，回流4h，過(guò)濾水解物洗至中性烘干。溶于200ml CHCl3回流30分鐘，提取液在1升容量瓶中定容后，取1ml，按（2）方法操作，讀取吸光度。

4、標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制 精密吸取對(duì)照溶液10～100€？0-6g/ml一組，按（2）方法測(cè)得的吸光度數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，以吸光度（y）對(duì)薯蕷皂苷元濃度€%p回歸，得回歸方程：y=0.01988€%p-0.1953，€%＼=0.9998。再以（y）為縱坐標(biāo)，€%p為橫坐標(biāo)作標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)繪制。線(xiàn)性范圍15～100€？0-6g/ml，標(biāo)準(zhǔn)誤差估計(jì)為0.00103。

5、標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法測(cè)定結(jié)果分析 按（3）方法將樣品制備得的樣液用（2）方法在460nm處測(cè)定吸收度，依標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)繪圖查算其濃度數(shù)值后，以下面公式計(jì)算鮮品盾葉薯蕷中皂苷元的百分含量。

四、小結(jié)

“濕法”工藝路線(xiàn)，即薯蕷鮮品生產(chǎn)工藝，一是可以破壞維管束、木栓細(xì)胞、粘液細(xì)胞并容易截短纖維，有利于激活酶作用，粉碎粒度可為1～5mm，打漿粉碎機(jī)功率選用值為800r/min；二是有利于濾棄纖維渣及大分子團(tuán)的淀粉沉降，使水溶性糖苷處于懸浮游離態(tài)，利用薯蕷植物內(nèi)源酶和外源酶自然發(fā)酵。發(fā)酵后的上清液回流循環(huán)使用，懸浮液濃縮，發(fā)酵溫度控制在38℃€？℃值和發(fā)酵時(shí)間不易超過(guò)3～5天為最好；最后是減輕涼曬加工的勞動(dòng)強(qiáng)度或霉變損耗，以及減少生產(chǎn)皂素廠家的堆酵場(chǎng)地，而且更有利于縮短水解時(shí)間。

本試驗(yàn)應(yīng)用了分光光度法檢測(cè)盾葉薯蕷皂苷元的含量分析，筆者認(rèn)為該法可應(yīng)用于商業(yè)性薯蕷原料的等級(jí)分類(lèi)檢測(cè)，以及作為薯蕷生產(chǎn)、科研的快速檢測(cè)方法，以確保薯蕷生產(chǎn)質(zhì)量，提出適時(shí)采挖，是更有效地提高薯蕷植物資源的開(kāi)發(fā)利用和資源保護(hù)的重要措施。

參考文獻(xiàn)：

[1]郭劍偉.薯蕷皂素提取工藝研究進(jìn)展[J].藥學(xué)專(zhuān)論，2011，20（18）：13-15.

[2]彭司勛.藥物化學(xué)[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，1998：400-447.

[3]湯興利.盾葉薯蕷皂素提取工藝及檢測(cè)方法研究進(jìn)展[J].中藥材，2004，27（11）：877-880.