糖尿病患者血清中游離脂肪酸的水平分析

周壯海

【摘要】 目的：探討型糖尿?。?T2DM）患者血清游離脂肪酸（NEFA）和脂蛋白（a）（Lp（a））的水平變化及其與糖尿病的關系。方法：對50例T2DM患者和50例健康體檢者進行血清NEFA、TG及Lp（a）的檢測并進行比較。結(jié)果：T2 DM患者血清NEFA、TG及Lp（a）的水平明顯高于正常對照組（P<0.01）。結(jié)論：T2 DM患者血清NEFA及Lp（a）水平測定可作為糖尿病病情控制良好與否及監(jiān)測并發(fā)癥的參考指標。

【關鍵詞】 糖尿??；游離脂肪酸；健康人群

【中圖分類號】R722.12

【文獻標識碼】B

【文章編號】1671- 0061（2014） 12 - 00048 - 02

隨著人們生活水平的提高和生活方式的改變，糖尿病的發(fā)病率越來越高。糖尿病是人類最常見的代謝性疾病，不僅表現(xiàn)為高血糖，脂代謝異常也是其常見表現(xiàn)。血清中游離脂肪酸（ FFA）的增加不僅參與了胰島素抵抗的發(fā)生，同時也有損害胰島B細胞分泌胰島素的功能和導致胰島細胞凋亡的作用，與型糖尿病發(fā)病密切相關。本文通過比較健康人與型糖尿病患者血清游離脂肪酸（ NEFA）和脂蛋白（a）（Lp（a））的水平變化及其與糖尿病的關系。

本文對50例T2DM患者血清NEFA及Lp（a）水平進行回顧性分析并與健康人進行比較，探討其與T2DM的關系。

1.資料與方法

1.1.一般資料根據(jù)2007年版《中國2型糖尿病防治指南》的診斷標準，選擇2013年12月至2014年6月在我院住院的50例T2DM患者，其中男38例，女12例，年齡35-76歲，平均（61. 12±10.65）歲；同時選擇50例健康體檢者作為正常對照組，年齡38～75歲，平均（58.78 ±9.75）歲，排除高血壓、冠心病、糖尿病、肝腎疾病及血液病等。

1.2.儀器、試劑與方法NEFA測定采用酶法，試劑由積水醫(yī)療株式會社提供。TG測定采用比色法，試劑由德國羅氏診斷有限公司提供。Lp（a）測定采用免疫比濁法，試劑由上海北加生化試劑有限公司提供。儀器為日立7600全自動生化分析儀。標本采集：被檢者空腹12 h后于次日晨采集靜脈血2 ml，分離血清待檢。

1.3.分析方法（1）、儀器與試劑1100型HPLC儀配四元梯度泵（Agilent公司），熒光檢測器，100位自動進樣器，Elipse XDB - C8色譜柱，AETS（自制），DMF（減壓蒸餾后使用），四種脂肪酸標準樣品（上海試劑廠），乙腈為光譜純，其余試劑均為分析純，水為去離子水（2）、色譜條件色譜柱：EclipseXDB - C8色譜柱（4.6mm*150mm，5um）流動相：A：20%乙腈水溶液B：100%的乙腈流速：1.Oml/min柱溫：30℃。激發(fā)波長：404nm，發(fā)射波長：440nm梯度洗脫：15%B20min線性梯度到25%B，50min線性梯度到100%B，之后再運行15min。（3）、血清預處理及分析取樣本血清100μl，加入盛有l(wèi)Omg無水K2 C03催化劑的2ml安培瓶中，再依次加入180μIN-N二甲基甲酰胺（DMF），120μl熒光衍生化試劑吖啶酮。

1.4.分析方法驗證。分別取空白血清6份各100μl按照“血清預處理”項方法操作，不加內(nèi)標，進樣10μl分析，得色譜圖A；取空白血清100μl，分別加入十四酸、油酸、亞油酸標準溶液100μl（125μmnol？L-1）、內(nèi)標正十七酸100μl（125 μmol？L-l），依同法操作，得色譜圖B；取樣本血清100μl，加入內(nèi)標正十七酸100μl（125μmol？L-1），依同法操作，得色譜圖C。比較A、B、C色譜圖中各FFA和內(nèi)標物的出峰時間，計算RSD，確定有無雜質(zhì)的干擾。取高、中、低3個濃度（分別為20、100、300μnol？L-1）的正十四酸溶液，每個濃度連續(xù)進樣5次，連續(xù)進樣3個分析批，獲得測定結(jié)果的平均值和批間RSD，驗證相關數(shù)據(jù)是否符合要求。取高、中、低3個濃度的正十四酸標準溶液；在一45℃下分別放置ld、2d、4d、8d，重復測定三次以上。與新配置的標準正十四酸在相同條件下的測定值比較。

1.5.統(tǒng)計學方法運用SPSS 13.O統(tǒng)計軟件。檢測數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標準差（ +s）表示，兩樣本均數(shù)比較采用t檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2.結(jié)果

T2DM患者和正常對照組血清NEFA、TG及Lp（a）的檢測結(jié)果：T2 DM患者血清NEFA、TG及Lp（a）的水平明顯高于正常對照組（P

3.討論

NEFA是血清中未與甘油、膽固醇等酯化的脂肪酸，在血清中長鏈的脂肪酸與白蛋白結(jié)合而成可溶狀態(tài)，短鏈脂肪酸具有較大的水溶性，可以以解離的形式存在，或以陰離子的形式存在。其來源主要由貯存于脂肪組織中的TG被分解釋放人血。正常情況下血清中NEFA含量極少，僅占總脂肪酸的5%一10%，主要與血清蛋白結(jié)合轉(zhuǎn)運到全身組織利用。NEFA有很強的細胞毒性，可損害細胞膜、線粒體和溶酶體膜等，引起細胞內(nèi)微器損害，而且能增強細胞因子毒性，在許多疾病的病理生理中起重要作用。高濃度的NEFA可以通過多種途徑影響胰島素的作用及葡萄糖代謝，與胰島素抵抗的發(fā)生有著密切的關系。NEFA通過抑制葡萄糖氧化、抑制糖原合成，促進糖異生，影響胰島素的分泌和信號轉(zhuǎn)導、影響細胞的凋亡等造成IR。

目前已有充分證據(jù)表明：血清中酯類水平的升高（主要是NEFA和TG）是導致IR的重要原因。本研究結(jié)果顯示，T2DM患者血清NEFA水平明顯升高，與正常對照組比較有顯著性差異（P<0.Ol）。說明T2DM患者存在脂代謝紊亂。還有研究表明，在T2DM中，血脂各項指標差異不明顯，NEFA和葡萄糖的變化相一致，在反應機體脂代謝異常情況方面NEFA的變化要比甘油三酯和膽固醇的變化更敏感，因而可以把NEFA作為除葡萄糖之外另一個反映糖尿病的敏感指標，定期檢測NE-FA水平，了解血脂水平，對T2DM的治療有重要意義，可作為糖尿病病情控制良好與否的參考指標。

本文結(jié)果顯示糖尿病患者血清Lp（a）水平明顯高于正常對照組。Lp（a）是一種由肝臟合成的獨立的脂蛋白，與其他脂蛋白無相關性，腎臟是主要代謝場所，在血清中的濃度主要由遺傳決定，幾乎不受飲食、年齡、性別等因素影響，在個體中相對穩(wěn)定，男女間無顯著差異。Lp（a）的升高被認為是動脈粥樣硬化的一個相對獨立的危險因子，與動脈粥樣硬化的展有密切關系。而微血管病變是糖尿病患者嚴重的并發(fā)癥，Lp（a）的升高會促進血栓形成，加重腎小球基底膜的損害，促進腎小球硬化，加重腎損害甚至形成惡性循環(huán)，因此有效控制Lp（a）的水平對延緩糖尿病并發(fā)癥的發(fā)生、發(fā)展有重要意義。

綜上所述，糖尿病患者會有明顯的脂代謝異常，其在糖尿病并發(fā)癥的發(fā)生、發(fā)展中有重要作用，NEFA水平可作為糖尿病病情控制良好與否的參考指標，Lp（a）的水平可作為監(jiān)測糖尿病并發(fā)癥的參考指標，定期檢測其水平對糖尿病的早期診斷和防治具有現(xiàn)實的指導意義和臨床應用價值。

參考文獻

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