補(bǔ)氣活血膠囊中阿魏酸的含量測(cè)定

王惟江

【摘 要】本研究建立了高效液相色譜法測(cè)定補(bǔ)氣活血膠囊中阿魏酸的含量，以控制補(bǔ)氣活血膠囊的質(zhì)量。樣品經(jīng)提取后，采用色譜柱為Phenomenex ODS3柱（250×4.6nm，5μm），流動(dòng)相為乙腈-0.085%磷酸溶液（17：83）；流速為1mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)為316nm下進(jìn)行高效液相色譜法研究分析。本方法簡(jiǎn)單可行、穩(wěn)定可控。

【關(guān)鍵詞】補(bǔ)氣活血膠囊；高效液相色譜；阿魏酸；含量測(cè)定

【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B 【文章編號(hào)】1004-7484（2014）02-0754-02

補(bǔ)氣活血膠囊處方由黃芪、當(dāng)歸、川芎等組成，為我院院內(nèi)中藥制劑，主要用于中風(fēng)病的治療，其湯劑經(jīng)臨床多年驗(yàn)證，安全、有效。為方便患者，將湯劑改為膠囊劑。

1 儀器與材料

1.1 儀器 XS105型電子天平（瑞士METTLER公司）； Agilent 1100 高效液相色譜儀；Agilent G1314A 紫外檢測(cè)器；Agilent G1310A泵（美國(guó)安捷倫公司）；202型電熱恒溫干燥箱（上海躍進(jìn)醫(yī)療器械廠）；ZB-1D智能崩解儀（天津大學(xué)精密儀器廠）；

1.2材料 阿魏酸對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)：110773-200611）；補(bǔ)氣活血膠囊（蓬萊市中醫(yī)院委托煙臺(tái)大洋制藥有限公司配制，批號(hào)分別為，批號(hào)分別為20090508、20090509、20090510）；乙醇為分析醇，甲醇為色譜純，蒸餾水為新鮮自制。

2方法與結(jié)果

2.1.色譜條件

色譜柱為Phenomenex ODS3柱（250×4.6nm，5μm），流動(dòng)相為乙腈-0.085%磷酸溶液（17：83）；流速為1mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)為316nm；柱溫室溫；進(jìn)樣量20μl。

2.2對(duì)照品溶液的制備

取置五氧化二磷減壓干燥器中干燥12小時(shí)的阿魏酸對(duì)照品3mg，精密稱定，置50mL棕色容量瓶中，加70%甲醇至近刻度，超聲溶解，取出，放冷，補(bǔ)足溶劑至刻度，搖勻，即得每1mL含阿魏酸0.06mg的對(duì)照品溶液。

2.3供試品溶液的制備

取本品10粒的內(nèi)容物，混合均勻，從中取出細(xì)粉約0.5g，精密稱定，置平底燒瓶中，精密加入70%乙醇20mL，精密稱定總重，回流提取半小時(shí)，放冷，精密稱重，補(bǔ)足溶劑至原重。濾過，取續(xù)濾液置棕色容量瓶中作為供試品溶液。

2.4空白干擾試驗(yàn)

按處方取除當(dāng)歸、川芎外的其他幾味中藥飲片，依處方制成樣品，再按上述供試品溶液的制備方法制成陰性對(duì)照溶液。進(jìn)樣20μl，結(jié)果如圖1表明，陰性無干擾，此分析方法對(duì)阿魏酸測(cè)定具有專屬性。

2.5.線性關(guān)系考察

精密量取對(duì)照品儲(chǔ)備液0.25、0.5、1.0、2.0、4.0、6.0mL分別置10mL棕色容量瓶中，加70%甲醇至刻度，搖勻。進(jìn)樣20μl，測(cè)得峰面積。以峰面積為縱坐標(biāo)，以濃度（μg/mL）為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，其回歸方程為Y=111.24X+15.035，r=0.9995。結(jié)果見圖2、圖3及表Ⅰ：

結(jié)果表明：阿魏酸對(duì)照品在1.565～37.560μg/mL的范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系。

2.6精密度試驗(yàn)

取濃度為6.260μg/mL的對(duì)照品溶液，重復(fù)進(jìn)樣6次，每次進(jìn)樣20μl，按上述條件測(cè)定峰面積，結(jié)果平均峰面積為732.8，RSD值為1.81%。結(jié)果見表Ⅱ：

平均峰面積為732.8，RSD值為1.81%，說明儀器的精密度良好。

2.7穩(wěn)定性試驗(yàn)

取同一樣品溶液（批號(hào)20090509），進(jìn)行穩(wěn)定性考察。在0、2、4、6、8、10h分別進(jìn)樣20μl，按上述條件測(cè)定峰面積，結(jié)果平均峰面積為684.7，RSD值為1.90%，說明樣品溶液在10小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。樣品高效液相圖見圖2，穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果見圖4及表Ⅲ：

2.8重復(fù)性試驗(yàn)

取濃度為12μg/mL的阿魏酸對(duì)照品溶液作為對(duì)照品溶液。

取同一批樣品6份（批號(hào)20090508），按供試品溶液的制備方法制備得供試品溶液。分別進(jìn)樣20μl，按上述條件測(cè)定峰面積，計(jì)算阿魏酸含量，結(jié)果見表Ⅳ：

2.9加樣回收率試驗(yàn)

取濃度為12μg/mL的阿魏酸對(duì)照品溶液作為對(duì)照品溶液。

精密稱取已知含量的樣品6份（批號(hào)20090508），每份0.25g，分別加入濃度為62.2μg/mL的阿魏酸對(duì)照品溶液1.0mL，再精密加入70%甲醇19mL，按供試品溶液的制備方法制備，得供試品溶液。

分別進(jìn)樣20μl，按上述條件測(cè)定峰面積，計(jì)算阿魏酸含量，結(jié)果見表Ⅴ：

2.10樣品含量測(cè)定

取濃度為12μg/mL的阿魏酸對(duì)照品溶液作為對(duì)照品溶液。

取三批黃芪通脈活絡(luò)膠囊樣品，按供試品溶液的制備方法制備，得供試品溶液。分別進(jìn)樣20μL，測(cè)定峰面積，計(jì)算樣品中阿魏酸含量，結(jié)果見表Ⅵ：

3討論

因處方中當(dāng)歸、川芎等藥材主要含有阿魏酸成分，故以阿魏酸為指標(biāo)對(duì)提取條件進(jìn)行優(yōu)選。

本方法樣品提取效果好，對(duì)色譜柱的損傷較小，質(zhì)量控制穩(wěn)定可靠。

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