單波長測定醫院制劑復方替硝唑含漱液中主要成分的含量

潘濤 歐陽波 王秀梅 田霞 黃懿

【摘 要】目的：建立測定復方替硝唑含漱液中替硝唑與醋酸氯己定的含量。方法：用Hpyersil C18（250mm×4.6mm， 5um）色譜柱，流動相為乙腈-0.1M磷酸二氫鈉溶液（28：72），流速為1.0ml·min-1， 檢測波長為254nm，柱溫為30℃；結果：替硝唑與醋酸氯己定線性范圍分別為40.09～320.72mg·L-1（r=0.9999），40.29～322.32mg·L-1 （r=0.9999）；平均加樣回收率分別為100.44%，99.82% ；RSD分別為0.71%，1.00%（n=9）。結論：該方法簡便準確，可用于復方替硝唑含漱液的質量控制。

【關鍵詞】替硝唑；醋酸氯己定；高效液相色譜法；質量控制

【文獻標識碼】B 【文章編號】1004-7484（2014）02-0724-01

復方替硝唑含漱液中替硝唑是繼甲硝唑后研制的硝酸咪唑抗厭氧菌及抗原蟲藥，具有比甲硝唑療效高，療程短的特點1，且毒副作用比甲硝唑低，無致癌性。醋酸氯己定具有顯著的消毒、防腐作用，其0.02%溶液是一種常用創面及創口沖洗液2.為滿足臨床需要，自制復方替硝唑含漱液，用于治療口腔厭氧菌感染及其他細菌引起的咽喉炎、口腔潰瘍、咽炎及牙組織炎。

1儀器與藥品

1.1儀器 島津LC-20A液相色譜儀（日本島津），；METTLER XS205（瑞典梅特勒公司）

1.2藥品 替硝唑（浙江蘇泊爾制藥有限公司生產，批號：001-130101）醋酸氯己定（錦州九泰藥業有限責任公司生產，批號：121207），替硝唑對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號為100336-200703）醋酸氯己定對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號為100183-201003），乙腈（色譜級，TIDEA公司）；水（重蒸餾水）；其他試劑均為分析純；復方替硝唑含漱液（本院自制）

2方法與結果

2.1色譜條件 色譜柱：Hpyersil C18（250mm×4.6mm， 5um）；流動相：乙腈-0.1M磷酸二氫鈉溶液（28：72）流速：1.0ml·min-1， 檢測波長：254nm；柱溫30℃；進樣量：10ul.理論板數按醋酸氯己定峰計算不低于2000.

2.2對照品、供試品溶液的制備

2.2.1對照品溶液的制備 分別精密稱取替硝唑對照品0.08018 g和醋酸氯己定對照品0.08058g，置于100ml量瓶中，加甲醇使溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得含替硝唑0.8018mg/ml和含醋酸氯己定0.8058mg/ml的對照品溶液；

2.2.2供試品溶液的制備 量取本品5ml，搖勻，微孔濾膜（0.45um）濾過，取續濾液即為供試品溶液；

圖一 對照品HPLC色譜圖（1，替硝唑；2，醋酸氯己定）

2.3線性關系的考察 精密吸取含替硝唑0.8018mg/ml和含醋酸氯己定0.8058mg/ml的對照品溶液0.5、1.0、2.0、3.0、4.0ml，分置5個10ml容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻。各10ul進樣，測定其峰面積，以進樣濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標，繪制標準曲線，試驗結果表明，替硝唑濃度在40.09～320.72ug/ml范圍內，峰面積與濃度線性關系良好（r=0.9999），醋酸氯己定濃度在40.29～322.32ug/ml范圍內，峰面積與濃度線性關系良好（r=0.9999）；

2.4精密度試驗 精密吸取同一供試品溶液（批號為131108）10ul，重復進樣6次，測得峰面積，結果替硝唑峰面積RSD為0.24%，醋酸氯己定RSD峰面積RSD為0.26%，表明該方法進樣精密度良好。

2.5穩定性試驗 取同一批樣品溶液（批號為131108）10ul，分別于0、2、4、8、12、18及24小時測定峰面積，結果替硝唑峰面積RSD為0.21%（n=6），醋酸氯己定RSD峰面積RSD為0.26%（n=6），表明樣品溶液在24小時內穩定。

2.6重復性試驗 取同一批樣品溶液（批號為131108）6份，分別按“2.2.2”項下制備供試液，按樣品含量測定方法測定兩種成分的含量結果替硝唑峰面積RSD為0.24%（n=6），醋酸氯己定RSD峰面積RSD為0.89%（n=6），表明該方法重復性良好。

2.7回收率試驗 分別精密量取已測定含量的同一批號樣品各3份，分別置10ml量瓶中，依次分別精密加入對照品溶液，結果替硝唑的含量總回收率為100.44%（n=9 RSD=0.71%），醋酸氯己定的含量總回收率為99.82%（n=9 RSD=1.00%），表明該方法回收率良好。

2.8樣品含量測定結果 取5批樣品，依次制備供試品溶液，分別精密吸取對照品和供試品溶液10ul，注入高效液相色譜儀，測定按擬定的含量測定方法測定5批成品的替硝唑與醋酸氯己定的含量，結果見表二

3 討論

3.1 流動相的選擇 比較了許多種流動相體系，其中乙腈-0.1M磷酸二氫鈉溶液（28：72）時，色譜峰分離效果良好，柱效高，加入一定量的磷酸調節流動相的ph，使其保持在酸性。

3.2檢測波長的選擇 從替硝唑、醋酸氯己定的紫外掃描圖譜可見，二者的最大吸收波長分別為256，273nm，因在273nm附近是醋酸氯己定的波谷，因此不宜選擇，為了兼顧二者的檢測靈敏度，實驗最終選擇254nm 為檢測波長。

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作者簡介：

潘濤（1979-）男，碩士，主要從事醫院藥物制劑工作