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高良姜水提和醇提樣品液解酒效果比較研究

2014-04-27 05:29:37楊中林
亞太傳統醫藥 2014年13期
關鍵詞:小鼠實驗模型

周 利,葛 方,楊中林

(中國藥科大學 現代中藥教育部重點實驗室,江蘇 南京 210009)

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高良姜水提和醇提樣品液解酒效果比較研究

周 利,葛 方,楊中林*

(中國藥科大學 現代中藥教育部重點實驗室,江蘇 南京 210009)

目的:比較研究高良姜水提樣品液和醇提樣品液的解酒效果及對酒精性肝損傷的保護作用。方法:第1天小鼠均用52℃紅星二鍋頭白酒0.14mL/10g體重灌胃,造成小鼠急性酒精中毒,灌酒30min后,模型組給予蒸餾水,其余各組給予相應的藥物,灌胃體積為0.2mL/10g體重,檢測指標為小鼠在金屬網上的攀附時間,研究藥物的解酒作用。第2天至第6天小鼠給酒造模3h后給藥,造成小鼠酒精性肝損傷模型,檢測指標為血清中GPT(谷丙轉氨酶)的活性,研究藥物的保肝作用。結果:高良姜水提樣品液和醇提樣品液都能延長小鼠在金屬網上的攀附時間,并降低酒精性肝損傷小鼠血清中GPT的活性。結論:水提高良姜的解酒效果和保肝效果均優于醇提高良姜。

高良姜;解酒作用;酒精性肝損傷

隨著人們物質生活水平的不斷提高,飲酒過量已成為一種普遍現象。飲酒過量可導致中毒,引起機體生理功能紊亂,嚴重時可因呼吸肌麻痹而致死。目前,西藥并無特效解酒藥物,而中藥在解酒方面卻有較好效果。因此,為了人們的身心健康,提高人們的健康水平,根據解酒產品的需求及現狀,有必要對解酒藥物進行實驗研究。

高良姜性味辛熱,有散寒止痛、溫中止嘔之功,可用于解酒毒。藥理學研究表明,其具有抗潰瘍、抗腹瀉、鎮痛抗炎、抗血栓形成、抗氧化、抗菌等藥理活性[1-2]。有研究表明,高良姜對酒精性肝損傷具有保護作用[3]。目前還未見有關高良姜解酒作用的研究報道。本文通過建立小鼠急性酒精中毒和酒精性肝損傷模型,研究高良姜的解酒作用和對小鼠急性酒精性肝損傷的保護作用。

1 實驗材料

1.1 儀器

BS124S型萬分之一電子天平[賽多利斯科學儀器(北京)有限公司],80-2型低速離心機(江蘇金壇市金城國勝實驗儀器廠),96孔細胞培養板(Costar公司),DG5033A型酶標儀(華東電子),10μL、50μL、200μL和1 000μL移液器[大龍醫療器設備(上海)有限公司],垂直金屬網(0.6cm×0.6cm孔徑,50cm×50cm長寬)。

1.2 試劑與試藥

高良姜(產地:廣西,批號:130427,購自南京上元堂天景山藥房,經中國藥科大學楊中林教授鑒定為姜科植物高良姜(AlpiniaofficinarumHance)的干燥根莖),52℃紅星二鍋頭白酒(北京紅星股份有限公司),GPT測試盒(批號:20130926,南京建成生物工程研究所),海王金樽(深圳市海王健康科技發展有限公司)。

1.3 動物

ICR小鼠,雄性,體重23~30g,55只,購自揚州大學比較醫學中心。

2 實驗樣品液制備

2.1 水提高良姜實驗樣品液制備

精密稱取高良姜6.75g,加10倍量水(67.5mL)浸泡2h,分別以10倍、8倍、8倍量的水,各直火加熱提取一次,時間分別為2h、2h、1h,合并三次續濾液,減壓回收,加蒸餾水定容至100mL,得到的藥液濃度為0.067 5g/mL,備用。

2.2 醇提高良姜實驗樣品液制備

精密稱取高良姜6.75g,加10倍量70%的乙醇(67.5mL)浸泡2h,分別以10倍、8倍、8倍量的70%的乙醇,各回流加熱提取一次,時間分別為2h、2h、1h,合并三次續濾液,減壓回收至無醇味,加蒸餾水定容至100mL,得到的藥液濃度為0.067 5g/mL,備用。

2.3 陽性藥配制

取7片海王金樽(7g),研成粉末,精密稱取6.75g,放入100mL的容量瓶中,加蒸餾水定容至100mL,即得,濃度為0.0675g/mL。

3 方法與結果

3.1 高良姜水提樣品液和醇提樣品液解酒效果比較

實驗分組情況為:55只小鼠隨機分為5組各11只,分別為:空白組、模型組、海王金樽組、醇提高良姜組、水提高良姜組。實驗前12h小鼠禁食。每只小鼠均用52℃紅星二鍋頭白酒0.14mL/10g體重灌胃,灌酒30min后,模型組給予蒸餾水,灌胃體積為0.2mL/10g體重;其余各組給予相應的藥物,給藥劑量為1.35g/kg體重,給藥體積為0.2mL/10g體重,藥物濃度為0.067 5g/mL。

在給予藥物30min、90min、3h和4.5h后,將小鼠放在垂直懸掛的金屬網正中間。同時記錄小鼠在金屬網上的攀附時間(把小鼠放在金屬網上直至從金屬網上掉落的時間),時間以秒(s)來記錄。對于在金屬網上的攀附時間超過10min 中的小鼠,其攀附時間一律記為10min(即600s)。

3.2 高良姜水提樣品液和醇提樣品液保肝效果比較

小鼠連續給酒造模6天,連續給藥6天。從第2天開始,給酒造模3h后給藥。于連續給藥的第6天眼底靜脈叢取血。分離血清,按試劑盒說明書方法測定血清中GPT(谷丙轉氨酶)的活力。

3.3 統計學方法

3.4 實驗結果

實驗結果顯示:海王金樽組、水提高良姜組與模型組比較,海王金樽組和水提高良姜組小鼠的攀附時間延長(P<0.05),說明海王金樽和水提高良姜的解酒效果顯著。模型組與空白組比較,模型組的GPT值升高(P<0.05),說明小鼠的酒精性肝損傷模型成功;海王金樽組和水提高良姜組與模型組比較,海王金樽組和水提高良姜組小鼠的GPT值降低(P<0.05),說明海王金樽和水提高良姜具有保護肝損傷的作用。在給藥30min和4.5h時各給藥組小鼠的攀附時間與模型組比較,P>0.05。各組藥物的解酒效果和保肝作用見表1、表2。

表1 小鼠第1天的攀附時間

注:與模型組比較,*P<0.05;與模型組比較,△P<0.05。

表2 血清GPT的測定結果 ±s,卡門氏單位)

注:與空白組比較,△P<0.05;與模型組比較,*P<0.05。

4 討論

醉酒也稱乙醇中毒,是指一次飲酒過量而導致的中樞神經等發生損傷的過程。乙醇攝入后,75%由十二指腸和空腸吸收,其余由胃吸收。95%以上乙醇在體內經過肝臟氧化、分解和代謝,其余乙醇未經氧化直接經腎從尿中排出、經呼吸道呼出或經皮膚汗腺隨汗排出[4]。乙醇及其代謝產物能促進體內氧自由基的生成和脂質過氧化反應,誘發器官損傷,尤其是肝及神經系統。

要使人快速醒酒,恢復清醒狀態,就要加速肝臟中乙醇的氧化分解代謝,減少其在體內蓄積;同時要增強清除自由基的能力,防止自由基對機體尤其是肝臟的直接或間接損害[5]。

本實驗以小鼠在金屬網上的攀附時間長短來判斷小鼠的清醒狀態,結果表明水提和醇提高良姜液都可以使小鼠的攀附時間延長,但是水提液效果更顯著。其作用機制還需要進一步研究。

目前認為,過量的氧自由基在酒精性肝損傷發病過程中起了重要作用。機體大量攝入乙醇后,經乙醇脫氫酶和微粒體乙醇氧化系統分解代謝,產生大量氧自由基,導致肝細胞膜脂質過氧化反應,引起細胞代謝及功能障礙,造成肝細胞氧化損傷[6]。本研究發現,高良姜能顯著降低急性酒精性肝損傷小鼠血清GPT水平,提示高良姜對酒精性肝損傷小鼠具有一定的保肝作用。但其作用機制還需進一步研究。

[1] 胡佳惠, 閆明. 高良姜的研究進展[J]. 時珍國醫國藥, 2009,20(10):2544-2546.

[2] 張明發, 沈雅琴. 高良姜的溫里藥理研究[J]. 陜西中醫, 1996,17(7):324-326.

[3] 周園, 黎小妍, 熊天琴, 等. 高良姜對小鼠急性酒精性肝損傷的保護作用[J]. 北方藥學, 2012(7):30-31.

[4] 郭金英. 中草藥解酒藥物研究進展[J]. 釀酒科技, 2007(11):86-91.

[5] 鐘曉凌, 王然. 醒酒機理的研究進展[J]. 科教文匯, 2009(24):271-272.

[6] 馮志強, 沈志祥, 譚詩云. 酒精性脂肪肝的發病機制研究進展[J]. 世界華人消化雜志, 2002(3):346-348.

(責任編輯:宋勇剛)

Study on the Anti-alcoholism Effect of Alpinia officinarum Hance of Water Extraction and Alcohol Extraction

Zhou Li,Ge Fang, Yang Zhonglin*

(Key laboratory of Modern Chinese Medicines of Ministry of Education, China Pharmaceutical University, Nanjing 210009,China)

Objective:To Study the Anti-alcoholism Effect and the protective effect of alcoholic liver injury of Alpinia officinarum Hance of water extraction and alcohol extraction. Methods:Alcoholic liver injury in mice model was established by alcohol gavage (52%U/U at 20mL/kg)per day for six days.Day 1 test in vertical metal clings time in mice. On the sixth day the determination of serum Glutamic Pyruvic Transaminase (GPT) activity. Results:Compared with model group, the clings time in the metal net was prolonged and the levels of GPT was significantly lowered by Alpinia officinarum Hance of water extraction and alcohol extraction. Conclusion:Alpinia officinarum Hance of water extraction and alcohol extraction has the Anti-alcoholism Effect and the protective effects on acute alcohol-induced liver injury in mice, but Alpinia officinarum Hance of water extraction was better than Alpinia officinarum Hance of alcohol extraction.

Alpinia Officinarum Hance; Anti-alcoholism Effect; Alcoholic Liver Injury

2014-03-07

周利 (1989-),女,中國藥科大學碩士研究生,研究方向為解酒藥藥理作用。

楊中林(1950-),女,滿族,中國藥科大學教授,博士生導師,研究方向為中藥新藥研發。E-mail:yzl1950@126.com。

R285.5

A

1673-2197(2014)13-0004-02

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