氣相色譜-質譜法測定藤茶揮發油中化學成分

張世仙，敖克厚，曾啟華，劉 炎

（遵義師范學院 化學化工學院 黔北特色資源應用研究實驗室，貴州 遵義 563002）

藤茶（Ampelopsis grossedentata）俗稱端午茶、藤婆茶、山甜茶、龍須茶，為葡萄科、蛇葡萄屬木質藤本植物[1]。藤茶富含蛇葡萄素、二氫楊梅素、胡蘿卜素、維生素E等化學成分及鎂、鐵、鈣等礦物質元素[2]。現代醫學研究證明，藤茶具有抗菌消炎、清熱解毒、祛風除濕、強筋骨、降血壓、降血脂、保肝護肝、抗癌等功效[3-6]，民間常作為代茶[7]食品。

目前我國對藤茶的研究重點是對湖南、江西、福建、廣西等省份藤茶化學成分的種類、含量和主要成分的分離、鑒定及相關分析方法的建立等方面，尤其對藤茶總黃酮及其分離成分二氫楊梅素的研究較為系統和全面[8-12]，然而對具有抗氧化性的藤茶揮發性成分研究僅見張友勝等[13]報道。藤茶在干制加工過程中，包括氣味在內的風味組成會發生一系列的變化，為此，本研究選取藤茶干制品為研究對象，采用固相微萃取（solid-phase microextraction，SPME）頂空吸附法[14-15]對屬于省級重點自然保護區并具有“動植物基因庫”之稱的貴州省石阡縣佛頂山溝壑中藤茶的揮發油成分進行采樣，運用氣相色譜-質譜（gas chromatographymass spectrometry，GC-MS）聯用技術對樣品揮發性成分進行分析，經過檢索Nist2005和Wiley275標準譜圖庫的定性分析，確定了63種揮發性化學成分，再以峰面積歸一化法計算了各化學成分在揮發油中的相對含量，目的在于為規模化開發和加工貴州省石阡縣的佛頂山藤茶資源提供科學依據。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

藤茶：采挖于貴州省銅仁市石阡縣佛頂山；正己烷（優級純）：杭州勝行生物科技有限公司。

1.2 儀器與設備

HP6890/5975C GC/MS聯用儀：美國安捷倫公司；手動固相微萃取裝置：美國Supelco公司；萃取纖維頭為2 cm-50/30 μm DVB/CAR/PDMS StableFlex。

1.3 方法

1.3.1 藤茶揮發油的提取

將藤茶干制品碾細，稱取約3.0 g，置于25 mL固相微萃取儀采樣瓶，插入裝有2 cm-50/30 μm DVB/CAR/PDMS StableFlex纖維頭的手動進樣器，在85 ℃左右頂空萃取30 min取出，快速移出萃取頭并立即插入氣相色譜儀進樣口（溫度250 ℃）中，熱解析3 min進樣。

1.3.2 氣質聯用（GC-MS）分析

揮發油的分離鑒定在HP6890/5975C GC-MS聯用儀上進行。

色譜條件：色譜柱為ZB-5MSI彈性石英毛細管色譜柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm）；柱程序升溫：初始溫度40 ℃，保持2 min；以4 ℃/min速率升溫至220 ℃，保持2 min。汽化室溫度250 ℃；載氣為高純He（99.999%）；載氣流量1.0 mL/min；柱前壓52.5 kPa；不分流進樣；溶劑延遲時間1.5 min；進樣量1 μL。

質譜條件：電子轟擊離子源，離子源溫度230 ℃，電子能量70 eV；四極桿溫度150 ℃，接口溫度280 ℃；發射電流34.6 μA，倍增器電壓1 206 V；質量范圍20～450 m/z。

2 結果與討論

2.1 藤茶揮發油成分的總離子流圖

藤茶揮發油成分的總離子流圖見圖1所示。

圖1 藤茶揮發油成分的總離子流圖Fig.1 Total ion chromatogram of volatile oil from Ampelopsis grossedentata

由圖1可知，藤茶揮發油經GC-MS分離測定，共得到78個色譜峰。

2.2 艾葉藤茶揮發油成分

用SPME/GC-MS分離鑒定出艾葉藤茶揮發油成分見表1。

表1 藤茶揮發油化學成分分析結果Table 1 Chemical composition analysis results of volatile oil from Ampelopsis grossedentata

續表

由表1可知，采用固相微萃取分離貴州省銅仁市石阡縣佛頂山藤茶的揮發油，經GC-MS分析成分共檢測出63種化合物，占色譜流出峰面積的80.6%。其中烷烴類25種（相對含量占21.45%）、烯烴類15種（相對含量占21.85%）、醛類7種（相對含量占3.08%）、酮類5種（相對含量占2.95%）、苯類5類（相對含量占10.28%）、酯類3種（相對含量占3.65%）、醇類物質2種（相對含量占17.01%）、酚類1種（相對含量占0.33%）。

3 結論

SPME采集是在85 ℃的低溫條件下，利用非極性萃取頭直接頂空、吸附、富集樣品，不破壞香氣成分組成和性質，類似用鼻子感覺藤茶氣味的客觀實際，無液-液萃取引起的水、高沸點或非揮發性物質的超載或污染。通過GC-MS分離分析貴州省銅仁市石阡縣佛頂山藤茶的揮發油主要化學成分為乙醇、1，3-二叔丁基苯、2-甲基癸烷、2，4-二甲基-1-癸烯、2，4-二甲基-1-庚烯、7-甲基-十一烯、2，6-二甲基壬烷、檜烯、α-蒎烯、甲酸乙酯、十三烷、β-崖柏酮、1-十一烯、2，3，5，8-四甲基-十一烷、4，6-二甲基-十二烷等，為藤茶呈香機理的明晰提供了分子水平上的理論依據，也為其干制加工方式及深度加工奠定了基礎。

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