當(dāng)歸-川芎配伍對(duì)急性血瘀證大鼠血液流變學(xué)的影響

孔德平吳穎湯倩吳德康

（1.南京醫(yī)科大學(xué)附屬南京婦幼保健院，江蘇南京 210004；2.南京中醫(yī)藥大學(xué)，江蘇南京 210029）

當(dāng)歸-川芎配伍對(duì)急性血瘀證大鼠血液流變學(xué)的影響

孔德平1吳穎2湯倩1吳德康2

（1.南京醫(yī)科大學(xué)附屬南京婦幼保健院，江蘇南京 210004；2.南京中醫(yī)藥大學(xué)，江蘇南京 210029）

目的：比較當(dāng)歸-川芎藥對(duì)不同配比對(duì)急性血瘀證大鼠血液流變學(xué)的影響。方法：SD大鼠隨機(jī)分為空白組、模型組和歸芎不同配比給藥組，分別灌胃相應(yīng)藥物或生理鹽水，連續(xù)7d，于灌胃第3日除空白組外其余各組采用皮下注射鹽酸腎上腺素和冰水浴復(fù)制急性血瘀證模型，第7日給藥后30min測(cè)定各組大鼠全血黏度、血漿黏度、血沉和紅細(xì)胞壓積。結(jié)果：與空白組比較，模型組血液流變學(xué)各項(xiàng)指標(biāo)均有明顯升高；與模型組比較，歸芎不同配比組均能明顯降低全血黏度值（1s-1）、血漿黏度值、血沉，其中歸芎3∶2組有極顯著作用。結(jié)論：當(dāng)歸-川芎不同配比對(duì)急性血瘀證大鼠血液流變學(xué)均有不同程度的改善，為闡明當(dāng)歸-川芎藥對(duì)配伍的科學(xué)性提供一定依據(jù)。

血瘀 當(dāng)歸 川芎 血液流變學(xué) 實(shí)驗(yàn)研究

痛經(jīng)為婦科血瘀證臨床常見多發(fā)病癥，常影響婦女正常工作和生活。當(dāng)歸-川芎配伍是臨床常用的養(yǎng)血活血藥對(duì)，具有養(yǎng)血補(bǔ)血、活血祛瘀的功效，大凡血虛、血瘀之證均可選用，尤為血虛兼血瘀者所宜。當(dāng)歸偏養(yǎng)血和血，川芎偏行血散血，二藥配對(duì)使用，可增強(qiáng)養(yǎng)血活血之功效。許多養(yǎng)血類方劑如佛手散、四物湯及其衍化方、八珍湯等都含有歸芎藥對(duì)，并且該藥對(duì)也獨(dú)自成方如佛手散、神驗(yàn)胎動(dòng)方和芎歸散[1-3]。經(jīng)統(tǒng)計(jì)，本院中醫(yī)科治療婦科血瘀證亦常用此藥對(duì)。當(dāng)歸-川芎藥對(duì)根據(jù)病情的不同，常采用不同配比。本實(shí)驗(yàn)選取本院中醫(yī)科治療婦科血瘀證痛經(jīng)時(shí)五種常用配比（當(dāng)歸-川芎2∶1、3∶2、1∶1、2∶3、1∶2）以及當(dāng)歸、川芎?jiǎn)挝端庍M(jìn)行研究，觀察不同配比歸芎藥對(duì)對(duì)急性血瘀證模型大鼠血液流變學(xué)指標(biāo)的影響，為研究婦科血瘀證方劑的配伍規(guī)律提供一定依據(jù)，進(jìn)一步驗(yàn)證歸芎藥對(duì)配伍使用的科學(xué)性與合理性。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 動(dòng)物SD大鼠90只，雌性，體重（200±20）g，由上海斯萊克動(dòng)物實(shí)驗(yàn)有限責(zé)任公司提供，合格證號(hào)：SCXK（滬）2008-0033。

1.2 藥物當(dāng)歸為傘形科植物當(dāng)歸的干燥根（泰州仁濟(jì)中藥飲片有限公司，批號(hào)：20110210）；川芎為傘形科植物川芎的干燥根莖（泰州仁濟(jì)中藥飲片有限公司，批號(hào)：20110401）。藥材均經(jīng)南京中醫(yī)藥大學(xué)中藥鑒定教研室吳德康教授鑒定。

1.3 試劑鹽酸腎上腺素（上海禾豐制藥有限公司，批號(hào)：W110102）；肝素鈉注射液（常州千紅生化制藥股份有限公司，批號(hào)：110518）；水合氯醛（國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)：20100709）。

1.4 實(shí)驗(yàn)器材LG-R-80電腦血液黏度測(cè)試儀（北京世帝科學(xué)儀器公司），Anke LXJ-IIB離心機(jī)（上海安亭科學(xué)儀器廠）。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 藥材提取按當(dāng)歸-川芎1∶0、0∶1、2∶1、3∶2、1∶1、2∶3、1∶2不同配比稱取當(dāng)歸、川芎飲片適量，先用8倍量蒸餾水浸泡30min后，回流提取2次，每次2h，合并濾液，濃縮，冷藏備用。

2.2 造模大鼠給予鹽酸腎上腺素注射液0.8mg/kg共2次，間隔時(shí)間為4h。第1次皮下給予鹽酸腎上腺素0.8mg/kg后2h，將大鼠置于0～2℃冰水中游泳4min，造成大鼠急性血瘀模型。第2次皮下注射鹽酸腎上腺素后，大鼠禁食不禁水飼養(yǎng)，12h后頸總動(dòng)脈取血，測(cè)血液流變學(xué)相關(guān)指標(biāo)確定造模效果[4]。

2.3 分組與給藥將SD大鼠隨機(jī)分為9組，分別為空白組、模型組、給藥組（歸芎1∶0、0∶1、2∶1、3∶2、1∶1、2∶3、1∶2組，按臨床等效量的5倍進(jìn)行給藥，8.10g/kg），每組10只。給藥組取不同配比提取液每日按0.2mL/10g體重灌胃，空白組和模型組每日灌胃等劑量的生理鹽水，連續(xù)7d。于第3天對(duì)除空白組外的各組進(jìn)行造模。動(dòng)物給藥劑量按體表面積換算系數(shù)計(jì)算：人臨床用量×0.018/200×1000×臨床等效量的倍數(shù)[4]。

2.4 血液流變學(xué)指標(biāo)檢測(cè)各組大鼠于第7天給藥后30min頸總動(dòng)脈取血，測(cè)定血液流變學(xué)相關(guān)指標(biāo)。大鼠在10%水合氯醛麻醉下，頸總動(dòng)脈插管取血，以1%肝素鈉抗凝，用溫氏管法測(cè)定血沉（ESR）和紅細(xì)胞壓積（HCT），使用LG-R-80B電腦血液黏度測(cè)試儀測(cè)定全血黏度（WBV）、血漿黏度（PV）。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

如表1所示，與空白組比較，模型組大鼠全血黏度值、血漿黏度值和血沉均有明顯升高，呈現(xiàn)顯著性差異（P＜0.01），說(shuō)明造模成功。與模型組比較，當(dāng)歸、川芎?jiǎn)挝端幣c不同配比歸芎藥對(duì)對(duì)急性血瘀大鼠血液流變學(xué)指標(biāo)均有不同程度的改善。

4 討論

血瘀證是指離經(jīng)之血不能及時(shí)排出或消散，而停留于人體某部，或血液運(yùn)行不暢，瘀積于經(jīng)脈或器官之內(nèi)所出現(xiàn)的證候。現(xiàn)代研究認(rèn)為，血液流變學(xué)、血液循環(huán)及血液理化性質(zhì)的改變?yōu)檠鲎C發(fā)生的主要生化基礎(chǔ)[5]。其中，血液流變學(xué)指標(biāo)的改變多早于臨床表現(xiàn)，恢復(fù)正常又晚于臨床癥狀和體征的消失，因此藥物治療血瘀證的療效確定是以血液流變學(xué)指標(biāo)為標(biāo)準(zhǔn)的[6]。不同病種的血瘀證其血液流變性的改變有共同的特征，主要為血液流變性皆呈“濃”、“黏”、“凝”、“聚”狀態(tài)。“濃”，紅細(xì)胞壓積增加，球蛋白、β-脂蛋白、膽固醇、甘油三酯明顯增加；“黏”，全血黏度、血漿黏度、還原黏度增加；“凝”，血液凝固性增加，纖維蛋白原含量增加，纖溶活性降低，血漿復(fù)鈣時(shí)間縮短；“聚”，紅細(xì)胞及血小板在血漿中電泳速度減慢，血小板對(duì)ADP類誘導(dǎo)物質(zhì)的聚集性增加[7]。

當(dāng)歸和川芎均為臨床常用的活血散瘀藥物。當(dāng)歸長(zhǎng)于補(bǔ)血，有“補(bǔ)血之圣藥”之稱；川芎長(zhǎng)于行氣，有“血中氣藥”之稱，活血兼行氣，有良好的活血祛瘀之功。兩者同用，體現(xiàn)了補(bǔ)血藥常配伍行氣活血藥的配伍規(guī)律。其配伍比例的不同，其藥物活性也略有不同，如佛手散中當(dāng)歸和川芎組方比例為當(dāng)歸四兩、川芎六兩，芎歸散中當(dāng)歸和川芎組方比例為當(dāng)歸、川芎等分。黃美艷等[8]研究發(fā)現(xiàn)歸芎藥對(duì)的配比在2∶1到1.3∶1之間時(shí)，表現(xiàn)出明顯的協(xié)同作用（協(xié)同作用強(qiáng)度為：－0.9）；當(dāng)歸劑量在2~3.5g，川芎劑量在7~9g區(qū)域內(nèi)，表現(xiàn)出拮抗作用（拮抗作用強(qiáng)度為：0.2）。本實(shí)驗(yàn)采用血液流變學(xué)相關(guān)指標(biāo)，選擇當(dāng)歸-川芎1∶0、0∶1、2∶1、3∶2、1∶1、2∶3、1∶2不同配比，來(lái)考察歸芎藥對(duì)對(duì)血瘀模型大鼠的活血祛瘀功效。研究結(jié)果顯示當(dāng)歸、川芎?jiǎn)斡门c不同配比使用均可不同程度改善急性血瘀證大鼠的血液流變學(xué)指標(biāo)，而不同配比歸芎藥對(duì)配伍應(yīng)用時(shí)各項(xiàng)指標(biāo)的改善較單用更為顯著，其中歸芎3∶2組改善作用最為顯著，可能與歸芎藥對(duì)產(chǎn)生協(xié)同作用有關(guān)，為驗(yàn)證歸芎藥對(duì)配伍的科學(xué)性和合理性提供了一定依據(jù)。

表1 各組大鼠處理后血液流變學(xué)指標(biāo)結(jié)果（±s，n=8）

表1 各組大鼠處理后血液流變學(xué)指標(biāo)結(jié)果（±s，n=8）

注：GX表示當(dāng)歸∶川芎。與空白組比較，#P＜0.05，##P＜0.01；與模型組比較，*P＜0.05，**P＜0.01。

[1]劉培，宿樹蘭，周衛(wèi)，等．香附四物湯與四物湯對(duì)急性血瘀模型大鼠血液流變性及卵巢功能的影響．中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2010，16（8）：124

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[3]王歡，唐于平，郭建明，等．當(dāng)歸－川芎藥對(duì)不同配比組方對(duì)家兔血小板聚集和凝血功能的影響．中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2010，16（2）：73

[4]李偉霞，黃美艷，唐于平，等．大鼠急性血瘀模型造模方法的研究與評(píng)價(jià)．中國(guó)藥理學(xué)通報(bào)，2011，27（12）：1761

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[8]黃美艷，唐于平，尚爾鑫，等．基于響應(yīng)曲面分析法對(duì)歸芎藥對(duì)活血效應(yīng)相互作用研究．中國(guó)藥理學(xué)通報(bào)，2012，28（10）：1407

R271.113.05

：A

：1672-397X（2014）12-0085-02

孔德平（1986-），女，生藥學(xué)碩士，中藥師，從事中藥復(fù)方研究。

湯倩，njfytq@126.com

2014-08-14

編輯：吳寧

南京市科技發(fā)展計(jì)劃（藥學(xué)項(xiàng)目）（2011YX011）